二级生物安全实验室建设探讨

为建立规范化的二级生物安全(BSL-2)实验室,使生物安全实验室建设在设计、施工和验收等方面满足生物安全防护要求和备案标准,能够有效防范实验室意外事件的发生。该文参照相关行业标准并结合BSL-2实验室建设经验,对检验科BSL-2实验室建设进行探讨。     

TPS、CA199和CEA在结直肠癌患者血清中的表达及其临床意义

[目的]研究结直肠癌患者血清中组织多肽特异性抗原（TPS）、CA199和CEA水平及结直肠癌患者根治术前后两者水平的变化,为结直肠癌的临床诊断、预后提供参考。[方法]用ELISA法检测血清TPS水平：用ECL法检测血清CA199和CEA水平。[结果]结直肠癌患者的血清TPS、CA199和CEA水平与结直肠良性疾病和正常人比较有显著性差异（P〈0.001），且随TNM分期增加而升高。手术治疗后三种肿瘤标志物水平明显下降,而术后复发患者的水平则明显升高。各种组合检测中，以TPS＋CA199＋CEA组合的敏感性和约登指数最高。[结论]血清TPS、CA199和CEA均可作为结直肠癌诊断、预后的临床指标,三者联合检测可提高结直肠癌的临床应用价值。     

检测HIV-1新近感染的BED捕获酶免疫实验的重复性和稳定性评价

目的对BED捕获酶免疫实验（BED capture enzyme immunoassay，BED-CEIA）的重复性和稳定性进行评价。方法对在国家艾滋病参比实验室（参比室）和A、B两个艾滋病确证中心实验室，使用BED-CEIA方法对新近感染检测的实验数据进行统计。分别对在参比室和A、B两实验室进行检测的59、35和18块酶标板的质控品（NC、CAL、LPC和HPC）OD和OD-n的Mean、SD和CV进行统计。对3个实验室初筛和确认实验结果的一致性进行比较，得出R^2值。使用同一考核血清盘，将11位不同实验人员的实验结果与参比室实验员的实验结果进行比较，得出R^2值。结果在参比室进行的实验中，对OD-n的统计显示，质控品NC的CV为14．4％，LPC和HPC的CV值约为5％；在A实验室中，LPC和HPC的CV值均控制在10％以内；在B实验室中，LPC和HPC的CV值均控制在12％以内。3个实验室初筛和确认实验结果的R。值均达到了0．90以上。其他实验人员与参比室实验人员的结果实验比较显示，R^2为0．9777，不同实验员之间可重复性强。结论BED-CEIA方法的稳定性和重复性均十分突出，可以在我国接受过专项培训的艾滋病确证中心实验室开展该项工作。     

血清HE4在卵巢癌患者预后判断中的临床价值

[目的]探讨人附睾蛋白4(HE4)在判断卵巢癌患者预后中的价值。[方法]检测76例卵巢癌患者治疗前血清HE4和CA125水平,分析HE4水平与患者无病生存期的关系。[结果]76例患者血清HE4中位浓度为208pmol/L。血清HE4水平同卵巢癌患者病理类型及临床分期相关(P=0.014,P<0.001)。HE4低水平患者(≤208pmol/L)的无进展生存期为29.0个月,而血清HE4高水平组(>208pmol/L)为19.0个月(P=0.005)。多因素回归分析证明HE4血清水平为判断卵巢癌患者预后的独立指标(HR=1.001,95%CI:1.000～1.002;P=0.021)。[结论]血清HE4可为卵巢癌患者预后判断提供重要的临床参考依据。     

血清S100BB蛋白水平与肺癌脑转移的相关性

目的 分析探讨血清S100BB蛋白在肺癌脑转移中的表达情况及其临床意义.方法 用ELISA法测定43例肺癌脑转移患者(脑转移瘤1 cm以下组12例,1～2 cm组9例,2 cm以上组17例,5例未知脑转移瘤大小)、44例肺癌患者、45例肺炎患者及44名健康人血清S100BB蛋白水平,并分析血清S100BB蛋白与肺癌脑转移的相关性.结果 肺癌脑转移组血清S100BB蛋白水平为42.28(38.56～121.70)ng/L,显著高于肺癌组的34.09(27.38～43.89)ng/L、肺炎组的31.11(26.79～37.15)ng/L和健康对照组的30.97(7.27～35.84)ng/L,组间比较,差异均有统计学意义(U值分别为422.5、325.5和237.5,P均<0.01).血清S100BB诊断肺癌脑转的ROC曲线AUC为0.828,当以37.15 ng/L为临界值时,其敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别为83.7%(36/43)、74.4%(99/133)、51.4%(36/70)、93.4%(99/106)、76.7%(135/176).肺癌脑转移组、肺癌组、肺炎组和健康对照组中S100BB蛋白阳性率分别为83.7%(36/43)、36.4%(16/44)、24.4%(11/45)、15.9%(7/44),肺癌脑转移组S100BB的阳性率显著高于肺癌组、肺炎组和健康对照组(X~2=50.705,P<0.01).肺癌脑转移肿瘤1 cm以下组、1～2 cm组和2 cm以上组的S100BB蛋白水平分别为47.87(39.63～131.68)ng/L、45.28(40.02～126.70)ng/L和38.79(34.86～58.23)ng/L,3组间差异均无统计学意义(U值分别为50.5、65.0和56.0,P均>0.05).结论 血清S100BB蛋白水平可以作为肺癌脑转移发生的辅助诊断指标,但肺癌脑转移瘤大小可能与S100BB蛋白水平无关.     

应用BED-CEIA方法估算重庆市静脉吸毒人群艾滋病病毒感染的发病率

目的检测重庆市静脉吸毒人群中艾滋病病毒（HIV）新近感染状况并计算HIV发病率。方法收集重庆市两个监测哨点自1999—2006年以来的监测样本共计4711份，通过酶联免疫和蛋白印迹实验检测出HIV-1感染的样本，再应用Ig—G—捕获HIV-1 BED-发病率酶联方法（BED—CEIA），检测其中的新近感染样本，进而估算该人群的HIV-1发病率。结果共检出HIV-1阳性样品130份。哨点A 2001—2005年HIV感染率分别为0．73％、2．02％、1．54％、2．96％、2．80％，发病率分别为0．57％、0．93％、0、1．24％、1．68％；哨点B 2004—2006年HIV感染率分别为4．21％、9、96％、8．13％，发病率分别为0．95％、1．04％、0．90％。虽然两个哨点在发病率方面都有起伏，但差异无统计学意义，感染率与发病率变化趋势一致。结论目前在重庆市监测哨点发现的HIV感染者大部分为既往感染者，发病率维持在较稳定的范围。     

鼻咽癌患者血浆EBV-DNA检测的临床价值

目的 EB病毒与鼻咽癌的发生发展明确相关,多个研究显示血浆EBV-DNA对于鼻咽癌的诊断分期及预后判断有重要意义,因此对我院患者进行了血浆EBV-DNA的检测并分析其临床价值。方法 2013—2016年连续性鼻咽癌患者471例,分析其治疗前EBV-DNA水平与分期、肿瘤负荷的相关性,并对治疗前、治疗末EBV-DNA进行生存相关分析。结果 患者治疗前血浆EBV-DNA中位数137 copies/ml (0~494000),与T分期、N分期、M分期、总的临床分期、肿瘤负荷均有明显统计学相关性。生存分析显示治疗前血浆EBV-DNA拷贝数≤1300组比>1300组的患者有更好OS (P=0.007)、PFS (P=0.011)、DMFS (P=0.003)。治疗末血浆EBV-DNA不可检测到的患者有更好OS (P=0.016)、PFS (P=0.000)、DMFS (P=0.000)。Cox多因素分析T分期、治疗末是否可检测到EBV-DNA为OS (P=0.030、0.012)的预后因素,N分期(P=0.037、0.017)、放疗末是否可检测到EBV-DNA (P=0.006、0.001)为PFS及DMFS的预后因素。结论 鼻咽癌患者治疗前血浆EBV-DNA水平与分期及肿瘤负荷有明显相关性,治疗前EBV-DNA水平更高的患者可能治疗后的预后更差。治疗末血浆EBV-DNA是否可检测到对于OS、PFS、DMFS有较好的预测价值。     

沃芬ACLTOP750全自动凝血分析仪凝血七项性能验证

目的 对沃芬ACLTOP750全自动凝血分析仪检验凝血七项进行性能验证。方法 根据美国临床实验室标准化委员会(CLSI)EP文件、(CNAS)-GL037 《临床化学定量检验程序性能验证指南》《临床血液学检验常规项目分析质量要求》(WS/T 406—2012)、《凝血分析仪》(YY/T 0659—2017)等文件,对PT、TT、APTT、FIB、FDP、DD、AT-Ⅲ7个项目的准确度、正确度、精密度、参考区间、携带污染率、线性范围、可报告范围性能进行验证。结果 准确度、正确度、精密度结果均在允许范围内。所有项目参考区间验证通过。携带污染率均≤10%,符合要求。线性验证的回归方程斜率均在(1±0.05)内,且相关系数(r)均≥0.975,符合要求。可报告范围分析中0%≤R≤120%,验证通过。结论 沃芬ACLTOP750全自动凝血分析仪性能验证符合质量目标要求,可用于临床标本的检验。     

血清新型细胞角蛋白标志物在非小细胞肺癌诊断中的价值

[目的]研究新型血清标志物Monototal在非小细胞肺癌诊断中的临床应用价值。[方法]选取197例非小细胞肺癌患者、35例肺部良性疾病患者和120例健康体检血清标本,检测CA125、CEA、CYFRA21-1、SCC和Monototal水平。采用SPSS 19.0进行统计分析,比较不同血清肿瘤标志物诊断非小细胞肺癌的敏感度和特异性。[结果]非小细胞肺癌组血清Monototal中位浓度是53.19U/L,显著性高于肺部良性组(41.60U/L)和健康体检组(5.55U/L)(P均<0.01)。血清Monototal诊断非小细胞肺癌的敏感度(30.46%)和特异性(91.43%)与Cyfra21-l(38.07%,94.29%)较为接近。不同临床分期中,Monototal诊断Ⅰ期肺癌的敏感度最高,为19.05%,Cyfra21-1则为17.86%。Cyfra21-1诊断Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期肺癌的敏感度最高,分别为46.51%、61.90%和75.00%;而Monototal则分别为30.23%、50.00%和41.67%。[结论 ]Monototal是一种较好的非小细胞肺癌肿瘤标志物,对非小细胞肺癌的诊断效能接近Cyfra21-1,对早期非小细胞肺癌辅助诊断可能有更好的诊断价值。     

HIV新近感染者耐药的现状与耐药的检测方法

高效抗逆转录病毒治疗(HAART)给艾滋病病毒(HIV)感染者带来了福音;但耐药毒株的出现很容易导致临床治疗失败。耐药毒株的传播又会引起HIV新近感染者中耐药的发生,在新近感染者中进行耐药检测并了解耐药的现状是十分必要的,能为将来的抗病毒治疗提供指导。