两种试剂检测抗心磷脂抗体的比较

目的 对两种商品化的抗心磷脂抗体(Anti-cardiolipin,ACA)试剂的检测结果进行比较。方法 采用欧蒙公司ACA-IgA/G/M(总ACA)检测试剂和亚辉龙公司ACA-IgG,IgM和抗β2糖蛋白I(β2GPI)抗体IgG(ACA 3项)测定试剂盒,同时检测66例血清样本,比较两者结果的差异,并分析两者之间的关系。结果 欧蒙总ACA试剂的检出阳性率为37.88%(25/66); 亚辉龙ACA 3项试剂的检出阳性率为31.82%(21/66,ACA-IgG,IgM和抗β2GPI IgG三者任一阳性),两种试剂检测结果不具有统计学差异; 两者的检测符合率为87.88%(58/66)。欧蒙试剂ACA-IgA/G/M的检测结果与亚辉龙试剂ACA-IgG,IgM和抗β2GPI IgG 3个检测值的总和具有良好的相关性(r²=0.892,P<0.01)。结论 两种试剂检测结果符合性较高,具有良好的相关性,能满足临床应用的需要; 两种试剂各具特色,可以根据需要选择合适的试剂单独或联合进行检测。     

蛋白质组学在寻找肝癌生物标记物中的研究进展

蛋白质组学技术的快速发展和广泛应用,为寻找特异性肝癌标记物提供了值得探索的有效手段。近年来在肝癌血清、组织和细胞系中,许多有潜在价值的新标记物相继被发现。     

两种ErbB2/Neu阳性－PTEN缺失乳腺癌基因工程小鼠模型的建立及其生物学特征比较

目的： 建立两种ErbB2/Neu阳性-PTEN缺失的乳腺癌基因工程小鼠模型并比较其生物学特征。 方法：利用先前建立的由鼠乳腺肿瘤病毒（MMTV） 启动子同时驱动活化型ErbB2/Neu基因和重组酶Cre表达的FVB/N-MMTV-NIC小鼠与Flox-PTEN小鼠交配;或将由内源性启动子驱动活化型ErbB2/Neu基因表达的FVB/N-ErbB2KI、FVB/N-MMTV-Cre及Flox-PTEN三种基因工程小鼠交配; PCR分别扩增Neu、Cre和PTEN基因,对其子代小鼠进行基因型鉴定;免疫组织化学法检测乳腺组织ErbB2/Neu和PTEN蛋白表达。对两种模型的成瘤时间、肿瘤数目、肺转移等生物学特征进行比较,观察肿瘤组织病理学形态,免疫组织化学法检测肿瘤细胞Ki-67表达,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡水平。 结果：经基因型鉴定和组织蛋白表达分析,获得了两种ErbB2/Neu阳性－PTEN纯合型缺失的乳腺癌基因工程小鼠模型：一是由MMTV外源性启动子同时驱动活化型ErbB2/Neu和Cre表达,抑癌基因PTEN条件性敲除的NIC/PTEN-/-模型;二是由MMTV-Cre使内源性启动子驱动ErbB2/Neu基因表达,PTEN条件性敲除的ErbB2KI/PTEN-/-模型。NIC/PTEN-/-模型的平均成瘤时间低于ErbB2KI/PTEN-/-模型（30 d与368 d,P<0.01）;肿瘤数目、肺转移率均高于ErbB2KI/PTEN-/-模型（分别为10个与1～2个,75.0%与37.5%,均P<0.01）;两种模型肿瘤呈现不同的组织病理形态,肿瘤细胞凋亡水平相当（P>0.05）;NIC/PTEN-/-模型Ki-67阳性细胞百分率高于ErbB2KI/PTEN-/-模型（86.9%±2.8%与37.4%±7.2%,P<0.01）。 结论：两种不同表型的ErbB2/Neu阳性－PTEN缺失的乳腺癌基因工程小鼠为探索ErbB2/HER2阳性乳腺癌的发生、发展规律及更有效的防治方案提供了理想的动物模型。     

叶绿酸铜钠对SMMC7721肝癌细胞抑制作用的体外实验研究

[目的]研究叶绿酸铜钠（CHL）体外抑制SMMC7721肝癌细胞的作用及机制。[方法]（1）MTT法测半数抑制浓度（IC50）并绘制生长曲线;（2）流式细胞仪观察CHL对SMMC7721细胞凋亡的诱导作用;（3）免疫组化方法检测增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞周期素D1（Cyclin D1）、环氧化酶-2（COX-2）的表达。[结果]（1）CHL对SMMC7721细胞具有增殖抑制作用,且具有浓度和时间依赖效应;（2）CHL能诱导SMMC7721细胞G1期阻滞,通过抑制细胞生长周期、降低细胞增生速率抑制肿瘤细胞增殖;（3）CHL对SMMC7721细胞凋亡无明显诱导作用;（4）CHL能下调SMMC7721细胞PCNA和COX-2蛋白表达,并呈一定的浓度依赖性。对Cyclin D1的表达无明显影响。[结论]CHL能抑制SMMC7721细胞的生长,这种抑制作用同PCNA、COX-2表达下调及细胞G1期阻滞有关,但与细胞凋亡和Cyclin D1的表达无关。     

人外周血IL-35水平与乙型肝炎疫苗免疫效果相关性分析

目的研究外周血单个核细胞(PBMC)和血清中IL-35的水平与乙型肝炎疫苗免疫效果的关系,探讨影响乙型肝炎疫苗免疫应答的可能原因。方法随访400名按标准方案接种乙型肝炎疫苗后的健康大学生志愿者,化学发光法定量检测乙型肝炎病毒表面抗体(HBs Ab),随机选取无应答、弱应答组和中、强应答组各8人,分离PBMC,并提取总RNA,实时定量PCR检测构成IL-35的EB病毒诱导基因3(EBI3)和IL-12p35 mRNA表达水平;随机选取无应答、弱应答者和中、高应答者各40名,ELISA检测、比较2组人群血清中IL-35的含量,并与HBs Ab水平进行相关性分析。结果乙型肝炎疫苗免疫后中、强应答组PBMC中EBI3和IL-12p35 mRNA的含量显著高于无应答、低应答组,分别是无应答、低应答组的(12.73±2.26)倍和(7.93±1.06)倍;另外,中、强应答组人群血清中IL-35平均含量为(111.50±49.53)ng/L,显著高于无应答、弱应答组的(15.01±12.82)ng/L;血清HBs Ab水平与IL-35含量呈正相关(r=0.84)。结论外周血中IL-35水平与机体对乙型肝炎疫苗的免疫效果有关,IL-35水平低下可能是乙型肝炎疫苗无应答、弱应答发生的原因或机制之一。     

核糖体蛋白 S7对宫颈癌 HeLa 细胞凋亡的影响

目的：初步探讨核糖体蛋白 S7（RPS7）对宫颈癌 HeLa 细胞凋亡的影响。方法用构建的带增强绿色荧光蛋白（EGFP）报告基因的 RPS7重组表达质粒 pIRES2-EGFP-RPS7转染 HeLa 细胞作为实验组,以转染空载体 pIRES2-EGFP 的细胞作为对照组,流式细胞仪检测带绿色荧光细胞的含量, Western blotting 检测细胞中 RPS7蛋白表达;用带有荧光染料藻蓝蛋白（APC）的磷脂结合蛋白-V （Annexin-V）试剂对瞬时过表达和稳定干扰 RPS7的细胞进行染色,流式细胞仪分析细胞凋亡水平。结果在获得的瞬时过表达RPS7的 HeLa 细胞中,细胞凋亡水平明显高于转染空载体的细胞[（10．00±0．60）％∶（5．73±0．61）％],差异有统计学意义（t ＝8．63,P ＝0．001）。另一方面,抑制 RPS7表达的Sh-RPS7细胞凋亡水平低于对照细胞[（3．08±0．49）％∶（5．97±0．63）％],差异有统计学意义（t ＝6．40,P ＝0．003）。结论上调 RPS7表达具有促进 HeLa 细胞凋亡的作用,而下调 RPS7表达可抑制HeLa 细胞的凋亡。     

亲环素A在肿瘤研究中的进展

亲环素A（CypA）广泛存在于多种组织和细胞,具有肽基脯氨酰顺反异构酶（PPIase）活性,最早发现其为免疫抑制剂环孢素A的细胞内受体。CypA在一系列生物学过程中发挥重要功能,如蛋白折叠、免疫抑制、与CD147相互作用以及细胞凋亡等。近年来的研究发现,CypA与一些肿瘤的发生发展存在密切的联系,特别是与肺癌、胰腺癌和肝癌等。进一步深入研究CypA在肿瘤生物学中的作用与分子机制具有重要意义,有可能成为肿瘤研究中一个新的关注点。     

蛋白质组学在寻找肝癌生物标记物中的研究进展

蛋白质组学技术的快速发展和广泛应用,为寻找特异性肝癌标记物提供了值得探索的有效手段。近年来在肝癌血清、组织和细胞系中,许多有潜在价值的新标记物相继被发现。     

人卵巢癌相关抗原OVA66的B细胞表位预测

目的:预测人卵巢癌相关抗原OVA66的B细胞表位。方法:B细胞表位预测,以单参数(亲水性、可及性、柔韧性、极性)预测为基础,结合ABCpred预测结果,并经二级结构预测筛选等综合分析。结果:OVA66的B细胞表位可能位于209-216,266-275,294-301,362-368和391-396氨基酸残基的区域内或附近。结论:该结果对应用合成肽抗原进行肿瘤患者的早期诊断研究具有重要指导意义。     

南京地区育龄女性TORCH感染状况调查

目的调查在南京大学医学院附属鼓楼医院进行孕前筛查和产前普查的育龄女性的TORCH感染情况,分析不同季节、不同年龄段人群TORCH感染的特征,为该地区育龄女性的预防保健提供参考依据。方法采用酶联免疫吸附试验对3 340例孕前及孕期妇女进行血清中TORCH特异性抗体IgM、IgG检测,根据季节、年龄分组比较TORCH不同病原体感染率的差异。结果 3 340例受检者中总IgM阳性率为2.6%,巨细胞病毒（CMV）的IgM阳性（近期感染）率和IgG阳性（既往感染）率分别为1.05%和65.14%;弓形虫（TOX）、风疹病毒（RV）和CMV IgM的检出率均在夏季最高,夏季TOX和RV IgM阳性率分别为1.38%和1.30%,显著高于其他3个季节（P〈0.01）;20-25岁年龄组TOX IgM检出率（1.08%）显著高于26-30岁组（0.36%）（P〈0.05）;CMV IgM的阳性率在20-25岁组最高,为1.49%,与31-45岁组（0.47%）差异有统计学意义（P〈0.05）。结论育龄女性TORCH感染以CMV最多见,相关病原体感染具有季节性和年龄差异,有必要有针对性地加强预防保健,并积极做好TORCH特异性抗体的检测和监测。