奥希替尼联合贝伐珠单抗治疗伴EGFR T790M突变肺腺癌的疗效与机制研究

  目的  通过移植瘤动物实验探讨奥希替尼联合抗VEGF单克隆抗体靶向药物贝伐珠单抗的疗效及作用机制,为进一步临床试验提供理论依据。  方法  构建EGFR T790M突变的H1975人肺腺癌细胞移植瘤动物模型。实验分组:低剂量奥希替尼组、高剂量奥希替尼组、低剂量奥希替尼联合贝伐珠单抗组、高剂量奥希替尼联合贝伐珠单抗组。每组各5只小鼠,给药  方法  奥希替尼2.5 mg/kg/d或5 mg/kg/d,采用每天灌胃处理;贝伐珠单抗5 mg/kg,每周2次腹腔注射。接种后和给药期间绘制肿瘤生长曲线,给药2周后处死裸鼠,活检整个肿瘤。免疫组织化学SP法检测肿瘤HIF-1α、VEGF和微血管密度（microvessel density,MVD）。应用Western blot法检测EGFR及其下游AKT和ERK信号通路蛋白的表达。  结果  给药2周后,高剂量奥希替尼单药组较低剂量奥希替尼单药组肿瘤体积明显缩小,HIF-1α、VEGF表达率和MVD显著降低（P < 0.05）,p-EGFR、p-AKT和p-ERK表达减少（P < 0.05）。低剂量奥希替尼联合贝伐珠单抗组肿瘤体积明显小于低剂量奥希替尼单药组（P < 0.05）,上述因子均明显降低（P < 0.05）。低剂量奥希替尼联合组与高剂量奥希替尼单药组比较,肿瘤体积差异无统计学意义（P=0.178）,p-EGFR、p-AKT、p-ERK表达差异无统计学意义（P＞0.05）。高剂量奥希替尼联合组与高剂量奥希替尼单药组体积差异无统计学意义（P=0.642）。两个联合组之间,体积差异均无统计学意义（P=0.072）,上述因子表达差异均无统计学意义（P＞0.05）。  结论  贝伐珠单抗能够显著增加奥希替尼对伴EGFR T790M突变的肺腺癌移植瘤的杀伤能力。贝伐珠单抗与奥希替尼协同作用是通过降低肿瘤中VEGF表达,改善肿瘤微环境,增强抑制EGFR下游信号通路激活而实现的。      

奥希替尼联合抗血管生成靶向药对人肺腺癌细胞抑制作用的实验研究

目的:通过体外细胞学实验初步探究奥希替尼联合两种不同机制的抗血管靶向治疗药物（贝伐珠单抗或阿帕替尼）治疗表皮生长因子受体（EGFR）敏感突变和T790M耐药突变肺腺癌细胞的抗肿瘤活性及其作用机制。方法:培养人肺腺癌细胞PC-9（E19 del）和H1975（E21 L858R/E20 T790M）,CCK-8法检测奥希替尼及抗血管靶向治疗药物（贝伐珠单抗或阿帕替尼）单药或联合处理肺腺癌细胞48 h后的抑瘤率;蛋白质印迹法检测EGFR及其下游AKT和ERK信号通路蛋白表达情况。结果:PC-9和H1975肺腺癌细胞对奥希替尼敏感且呈剂量依赖性。奥希替尼联合抗血管生成靶向药物（贝伐珠单抗,阿帕替尼）较同等浓度的单药奥希替尼可增加对PC-9和H1975细胞株的抑瘤率（P<0.05）。低浓度奥希替尼联合高浓度阿帕替尼（1 000 nmol/L）的抑制作用与高浓度奥希替尼相当（P>0.05）。随着联合的阿帕替尼浓度的升高,对PC-9和H1975细胞抑瘤率也有一定程度的提高（P<0.05）。不同处理因素对PC-9细胞的抑制率均高于对H1975细胞（P<0.01）。随着奥希替尼浓度的上升,p-EGFR、p-AKT、p-ERK磷酸化蛋白表达逐渐降低。结论:奥希替尼联合贝伐珠单抗或阿帕替尼会进一步增强对EGFR敏感突变或T790M突变肺腺癌细胞的杀伤作用。奥希替尼与阿帕替尼联合使用具有很强的抑瘤活性,具有很好的应用前景。奥希替尼单药或与抗血管形成药联合作用可能是进一步下调EGFR及其下游AKT和ERK信号通路的活化。     

横县全球基金结核病和艾滋病双重感染防治项目成效分析

关键词：全球基金;结核病;艾滋病;双重感染;结核分支杆菌
中图分类号：Ｒ５１２　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１４）０３ ０２７３ ０３