MICA新等位基因MICA?008：05的DNA序列鉴定及分析

目的：采用直接测序法及克隆测序法确认新等位基因 MICA?008：05。方法采用 Sequence Base Typing （ SBT）法分型技术对MICA的多态性进行常规基因分型,采用克隆测序法进行确认并与已知的等位基因序列进行比对。结果发现1个样本在外显子3上有1个碱基位置与国际通用MICA数据库不相符。该基因与MICA?008：01：01相比在外显子3的碱基位置591出现突变（ C→T）,密码子位置174由TCC→TCT,相应编码氨基酸是同义突变。结论 DNA测序结果表明该基因序列为新的MICA等位基因,已提交GenBank,并被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为MICA?008：05。     

人GST-PTEN融合蛋白的原核表达和纯化

目的构建人第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)原核表达质粒,使其在原核细胞中高效表达并进行纯化。方法将全长片段插入原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组子pGEX-4T-1-PTEN,转化BL-21感受态细胞。经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达PTEN融合蛋白的可诱导性表达,通过SDS-PAGE电泳、Western印迹分析证实蛋白表达的特异性。并用谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-Stransferase,GST)亲和层析对融合蛋白进行纯化。结果成功构建了原核表达载体pGEX-4T-1-PTEN,并将PTEN融合蛋白的成功表达,通过SDS-PAGE电泳、Western印迹分析,证实了蛋白表达的特异性。并对蛋白进行了纯化,获得了GST-PTEN融合蛋白的纯品。结论成功表达、纯化了GST-PTEN融合蛋白,为进一步研究PTEN蛋白的功能及其与其它功能性蛋白的相互作用研究奠定了基础。     

Rh血型不合新生儿溶血病产前诊断研究进展

新生儿溶血病(hemolytic disease of the newborn,HDN)是一组由于母婴血型不合导致的胎儿或新生儿免疫性溶血性疾病。在我国以ABO血型不合较多见,Rh血型不合次之,但后者病情较重,预后差。传统的HDN诊断是在产后经血清学实验确诊,而此时干预治疗已无法纠正产前溶血、贫血、高胆红素血症造成的组织器官损伤。早些时候HDN的产前诊断是通过羊膜腔穿刺或绒毛膜活检获取胎儿细胞进行的,此类方法费用高,对胎儿有一定危险性,如诱发流产、胎盘出血等,也曾有人试图采用脐静脉穿刺等方法获取胎儿有核红细胞,但技术复杂且危险性大。1977年,Lo等[1]…     

血小板输注无效患者体内血小板反应性抗体特异性调查研究

目的探讨血小板输注无效患者体内血小板反应性抗体的发生频率及其特异性。方法对48名血小板输注无效患者,利用MACE法筛查其血清中的血小板反应性抗体,进一步用PAK12诊断试剂MAIPA法鉴定血小板HPA抗体特异性。结果血小板输注无效患者中血小板反应性抗体的总检出率为50%(24/48),其中同种HLA抗体发生率为39.6%(19/48),占所有抗体检出的79.2%,同种HPA抗体的检出率为29.2%(14/48),而其中有64.3%(9/14)是与HLA抗体同时存在。检出的HPA抗体特异性有抗-HPA-3a(n=2),-5a(n=1),-5b(n=1),-2b(n=1),-4b(n=1);同时HPA抗体中有78.6%(11/14)是针对GPⅡb/Ⅲa,Ⅰa/Ⅱa和/或Ⅰb/Ⅸ的多反应性抗体。女性患者中检出抗体的比例55.2%(16/29)高于男性患者42.1%(8/19),但差异没有显著性统计学意义。结论血小板输注无效患者中血小板同种抗体以HLA抗体多见,但HPA抗体并不像之前报道的罕见。与高加索人群PTR患者血小板同种反应性抗体以抗-HPA-5b,-1b为主不同,研究发现中国人群PTR患者HPA同种抗体以HPA-3,-5系统抗体多见,同时检出了HPA-4b,-2b抗体。     

KIR基因的基础与应用

人类杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immunoglobulin like receptors,KIR)是主要表达于NK细胞和部分T细胞表面的一组免疫球蛋白样超家族成员.近年来随着对其分子生物学基础方面研究的深入,人们对其在移植免疫?抗感染免疫、肿瘤免疫等方面的作用十分关注并进行了大量研究.我们现就其分子生物学基础及某些应用方面的研究进行综述.     

AXB及BX亚型各1例的检测分析

AX 及 BX亚型均为少见的 ABO亚型 ,由少见的等位基因引起 ,临床上常表现为正、反定型不符 ,易导致血型错判及配血不合或错配。现报告 AXB及 BX亚型各 1例。临床资料标本 1 ,来自血液中心发放的血型室间质控品。标本 2 ,来自一临床患者 ,男 ,5 5岁。患急性肾衰 3个月 ,于门诊进行透析治疗 ,每周 1～ 2次 ,治疗 2个月。在治疗过程中因出现乏力、纳差、贫血等症状 ,拟输注红细胞悬液给予支持治疗 ,临床实验室检测 ,患者血型正定“O”型 ,反定未做。与 O型献血者作交叉配血 ,次侧在盐水中发生凝集。送本中心检测。患者否认有献血史。血型…     

HPV在健康人阴毛毛囊中感染情况的调查分析

目的 为了解HPV6和HPVll健康男性阴毛毛囊中感染情况.方法 采用PCR技术对健康人群耻骨部阴毛中的HPV进行检测.并对资料进行分析.结果 健康人群阴毛毛囊中的HPV检出率为17.21%(21/122),其中16例HPV6(13.11%),5例为HPV11 型(4.10%),HPVn(0.8%).结论 发现HPV在健康男性人群阴毛中的感染率为17.21%,高于女性的14.2%的水平,这也从一个侧面说明女性的HPV感染与男性有关.HPV在健康人阴毛毛囊中感染以HPV6(13.11%)和HPV11 (4.10%)亚型最多见.     

中国北方汉族人HLA-Ⅰ、Ⅱ类基因与HBV水平感染及预后相关性研究

目的探讨人类白细胞抗原Ⅰ、Ⅱ类基因与乙型肝炎病毒(HBV)感染及其预后的相关性。方法采用PCR-SSP方法分别对102名慢性持续性HBV感染者(实验1组)、76名急性HBV感染者(实验2组)及1383名中华骨髓库山东分库无血缘关系自愿骨髓捐献者(对照组)作HLA-Ⅰ、Ⅱ类基因分型检测,将结果作统计学处理。结果HLA-DR9、DR12在实验组(实验1组+2组)中的分布频率较对照组明显增高(P<0.01);HLA-DR8在实验1组的分布频率明显高于实验2组(P<0.01);HLA-DR13,DR15在实验1组中的频率明显低于实验2组(P<0.01,P<0.05)。结论HLA-DR9可能有助于HBV对宿主的感染;HLA-DR8,DR12可能有助于HBV对宿主的持续感染,对HBV感染的慢性化有促进作用;HLA-DR13,DR15可能有助于宿主对HBV的清除,对HBV感染的慢性化有抑制作用。     

Toll样受体9在慢性乙型肝炎患者外周血中的差异性表达

有研究显示Toll样受体9(TLR9)在临床慢性乙型肝炎患者外周血中的表达水平上调~([1]),提示TLR9可能在机体抗HBV应答中具有重要作用,本研究进一步探讨TLR9在慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达水平及其对炎性细胞因子分泌的影响.     

输血引起抗-E、抗-c所致配血不合1例

Rh血型系统D抗原的检测基本已在临床普及 ,但D以外的其它Rh抗原抗体检测系统在某些基层临床实验室尚未得到重视和普及。现对 1名再障贫血患者反复输血所致抗 E、抗 c产生 ,引起配血不合情况报告如下。1　材料与方法1 1　临床资料　患者 ,男 ,4 2岁 ,因再生障碍性贫血入院 ,经查血型O ,Rh(+)。入院前 1月曾因再生障碍性贫血在院外输注同型RBC悬液 2次 ,共 8U。拟再次申请输注洗涤RBC悬液。在主侧盐水配血中不凝集 ,无溶血 ,聚凝胺介质中有凝集。不完全抗体鉴定 ,患者血清中存在抗 E。与E抗原阴性同型洗涤RBC配血相合 ,输注洗涤RBC …