布氏田鼠封闭群遗传结构的随机扩增多态DNA分析

目的使用随机扩增多态DNA标记建立标准化的布氏田鼠封闭群遗传质量控制分子标记库。方法使用高盐沉淀法从鼠尾中提取布氏田鼠基因组DNA。采用40条PRAD引物对布氏田鼠封闭群进行PCR扩增,琼脂糖电泳分离条带,参考标准分子量标记计算条带大小,并使用多态位点数、单态位点数以及多态位点比率评价种群的遗传多样性。结果筛选出8个能获得清晰稳定扩增条带的RAPD标记。这8个RAPD标记检测到的多态位点数存在明显差异。8个引物得到的遗传多态位点的数据之和能揭示种群的遗传结构。结论本实验建立了检测布氏田鼠封闭群遗传结构的RAPD标记。     

广泛表达人载脂蛋白E3转基因小鼠的建立

目的 建立人载脂蛋白E3(apolipoprotein E3,ApoE3)转基因小鼠,研究该基因在多种组织中表达水平的变化对动物的影响,探索该基因的功能.方法 RT-PCR法克隆人ApoE3基因,把该基因插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立转ApoE3基因C57BIJ6J小鼠.并利用特异引物PCR法鉴定转基因小鼠的基因型,Westem blot检测基因表达水平.通过生化指标分析初步鉴定ApoE3基因的功能.结果建立了2个系的高表达人ApoE3转基因小鼠.结论 成功建立了CMV启动子启动的高表达人ApoE3基因转基因小鼠,为进一步探索该基因的功能奠定了基础.     

DHCR24转基因小鼠的性别特异性自主活动和应激反应

目的测定α-MHC24-脱氢胆固醇还原酶基因（DHCR24）转基因小鼠的行为学特征,研究该基因对小鼠活跃性和探究行为的影响。方法构建α-MHC DHCR24转基因表达载体,显微注射法获得C57BL/6背景DHCR24转基因小鼠,PCR鉴定小鼠基因型,选择DHCR24转基因和同窝阴性鼠进行旷场、modified SHIRPA和Rota-Rod转轮实验。结果DHCR24转基因雌鼠对新环境的恐惧感较小,但自主活动性低于对照鼠,而DHCR24转基因雄鼠的自主活动性和在胁迫环境下的应激性高于对照组,DHCR24转基因鼠的行为变化具有显著的性别差异。另外,本研究中雌鼠的活跃性、运动协调性和平衡能力均显著高于雄鼠,对胁迫环境的应激性也大于雄鼠。结论心脏特异表达DHCR24基因转基因小鼠自主活动和应激性的变化具有性别差异。     

SPF级和野生布氏田鼠血生化指标的比较分析

目的:检测布氏田鼠的血生化指标,比较布氏田鼠无特定病原体级(specific pathogen-free,SPF)封闭群和实验室驯育野生种群之间该指标的差异。方法:分别测定4月龄野生布氏田鼠和SPF级封闭群内布氏田鼠的25项血生化指标,每个种群各抽样16只个体,雌雄各半。结果:实验室开放环境饲养的野生布氏田鼠的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的值均显著高于SPF级布氏田鼠,部分血生化指标不同性别之间差异较大。结论:在一定程度上,布氏田鼠体内外的微生物控制状况影响该动物的血生化指标。     

布氏田鼠与BABL/C小鼠气道反应性的比较分析

目的:比较BABL/C小鼠和本实验室培养的封闭群布氏田鼠的增强呼气间歇,分析两者之间的气道反应性差别。方法:利用EMKA肺功能检测系统测定清醒无创状态下4周龄～6周龄BABL/C小鼠和布氏田鼠的各项呼吸生理参数,使布氏田鼠和小鼠吸入0.494 g/L～30 g/L倍增浓度的乙酰甲胆碱(Mch),测定相应浓度下的增强呼气间歇(Penh)指标。结果:通过对这两种动物的气道反应性的比较分析,发现布氏田鼠的气道高反应性(AHR)在Mch的刺激下比BABL/C小鼠明显。在3.75 g/L Mch的刺激下,布氏田鼠的Penh值明显高于BABL/C小鼠。结论:Penh指标可以成功检测BABL/C小鼠和本实验室培养的封闭群布氏田鼠的高气道反应性。     

SPF级布氏田鼠的繁殖及生长发育性能测定

目的:在屏障环境下,对本所饲养的SPF级布氏田鼠繁殖及生长发育性能进行测定。方法:在采用药物净化等方法同时初步尝试进行剖腹产净化,确定了在屏障环境中针对该动物的净化方法。从SPF级繁殖鼠中抽取20对,以雌雄1∶1长期同居,统计繁殖性能参数,随机选取雌雄各20只3周龄SPF级布氏田鼠进行生长发育性能测定,每周测定一次,到20周龄为止。结果:剖腹产手术成功。SPF级布氏田鼠的平均窝产子数为6.37只,平均离乳率为96.86%,平均胎间间隔为23.7 d。离乳后的布氏田鼠的体重和体长有一个快速增长期,9周龄后增长速度开始放慢。结论:本研究建立了SPF级布氏田鼠繁殖和生长发育性能的基本指标。     

SPF级和野生布氏田鼠血液学指标的比较

目的:了解不同微生物控制程度(屏障环境和普通环境)对布氏田鼠血液学指标的影响。比较SPF级布氏田鼠(specific pathogen-free,SPF)和野生布氏田鼠血液学指标的差异。方法:选取4月龄SPF级布氏田鼠和野生布氏田鼠各16只,雌雄各半,测定12项血液学指标。结果:实验室开放环境饲养的野生布氏田鼠血红蛋白指标低于SPF级布氏田鼠,红细胞分布宽度和血小板数高于SPF级布氏田鼠。部分血液学指标在不同性别之间差异较大。结论:普通开放条件下饲养的野外捕获的布氏田鼠与SPF级布氏田鼠的部分血液学指标存在显著差异,说明微生物控制能影响动物的血液指标。     

DHCR24转基因小鼠的性别特异性自主活动和应激反应

目的 测定α-MHC 24-脱氢胆固醇还原酶基因(DHCR24)转基因小鼠的行为学特征,研究该基因对小鼠活跃性和探究行为的影响.方法 构建α-MHC DHCR24转基因表达载体,显微注射法获得C57BL/6背景DHCR24转基因小鼠,PCR鉴定小鼠基因型,选择DHCR24转基因和同窝阴性鼠进行旷场、modified SHIRPA和Rota～Rod转轮实验.结果 DHCR24转基因雌鼠对新环境的恐惧感较小,但自主活动件低于对照鼠,而DHCR24转基因雄鼠的自主活动性和在胁迫环境下的应激性高于对照组,DHCR24转基因鼠的行为变化具有显著的性别差异.另外,本研究中雌鼠的活跃性、运动协调性和平衡能力均显著高于雄鼠,对胁迫环境的应激性也大于雄鼠.结论 心脏特异表达DHCR24基因转基因小鼠自主活动和应激性的变化具有性别差异.     

实验动物从业人员培训系统的建立与应用

实验动物是生命科学、医学研究的重要组成部分,是国家科技创新的重要支撑。实验动物科学对保障人类健康、食品安全和生物安全具有重要意义。食品安全、药物、疫苗、生物制品开发以及人类疾病发病机理研究等,都离不开实验动物。为适应中国实验动物行业的整体发展需求,本单位自主研发了"实验动物从业人员网络培训系统",该系统是一套集实验动物实际操作和理论知识于一体的网络教育培训平台,包括动物福利、动物饲养、动物手术等7个知识模块,以管理人员、实验人员、实验动物医师和饲养人员为培训对象,旨在加速实验动物的人才培养和团队建设,促进行业培训的转型发展。