重组人Hespintor对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用

目的 完善重组Hespintor蛋白(rHespintor)的纯化方法,提高蛋白提取效率,并探讨其对肝母细胞瘤HepG2细胞增殖及侵袭作用的影响.方法 在重组蛋白提取中增加包涵体洗涤过程,更改蛋白纯化缓冲体系,并利用Na-苯甲酰-DL-精氨酸-对硝基酰胺盐酸盐(BAPNA)为作用底物,测定纯化的rHespintor对胰蛋白酶水解抑制活性.以空白组为对照组,通过MTT实验、细胞划痕愈合实验、肿瘤细胞侵袭实验分别检测rHespintor对肝母细胞瘤HepG2细胞生长的影响及作用效果.结果 对包涵体蛋白进行尿素梯度洗涤后可有效去除目的蛋白中绝大多数杂蛋白,一步纯化后,目的蛋白rHespintor具有较高胰蛋白酶水解抑制活性,且抑制效果呈剂量依赖关系.rHespintor作用于肝母细胞瘤HepG2细胞后,细胞增殖受到抑制,迁移能力减弱,侵袭的细胞数量显著减少.结论 rHespintor在体外可明显抑制肝母细胞瘤HepG2细胞的增殖及侵袭作用.     

两种严重急性呼吸综合征冠状病毒S蛋白结构特征及抗原表位比较

目的: 通过严重急性呼吸综合征冠状病毒（SARS-CoV）-2与SARS-CoV S蛋白结构特征及抗原表位的比较分析,从分子水平为SARS-CoV-2致病机制研究提供数据支持,并为疫苗、抗体及药物研发寻找合适的候选靶点。方法: 利用生物信息学方法和工具,基于S蛋白参考序列进行理化性质、疏水性、信号肽、跨膜区、结构域、二级结构、三级结构分析及抗原表位预测,同时对受体血管紧张素转换酶2（ACE2）、C型凝集素（CLEC4M）的组织表达及关联通路、途径进行分析。结果: SARS-CoV-2、SARS-CoV S蛋白氨基酸序列一致性为75.80%,两者结构特征具有较高一致性,但SARS-CoV-2高级结构特征不如SARS-CoV明显。受体ACE2、CLEC4M在消化系统及心脏、肾脏、肺、胎盘中均有表达,主要关联的肾素-血管紧张素系统、蛋白质消化吸收通路及血管紧张素前体转化、G蛋白偶联受体（GPCR）配体结合途径与2019冠状病毒病典型症状相关。分析获得S蛋白三对高度或完全同源的抗原表位,即SARS-CoV-2 S蛋白第600~605位氨基酸残基与SARS-CoV第586~591位高度一致,SARS-CoV-2 S蛋白第695~703位、第888~896位氨基酸残基分别与SARS-CoV第677~685位、第870~878位高度或完全一致。结论: SARS-CoV-2与SARS-CoV S蛋白结构上的相似性决定了两者具有相近的感染模式和临床表现。筛选获得的高可信度的SARS-CoV-2候选抗原表位可为病毒诊断和疫苗研制提供参考。     

白藜芦醇抑制NLRP3炎性小体介导的细胞焦亡信号通路改善肥胖小鼠认知功能

目的 观察白藜芦醇(RES)对肥胖小鼠认知功能的保护作用,并探讨其海马组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体—细胞焦亡信号通路机制。方法 50只小鼠随机均分为：正常对照组、模型组和白藜芦醇高(100 mg/kg)、中(50 mg/kg)、低(25 mg/kg)剂量组,喂养6个月后,检测小鼠认知功能,海马组织细胞焦亡水平,海马组织沉默信息调节因子1(SIRT1)、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-18和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等蛋白表达情况。采用单因素方差分析或重复测量方差分析进行结果分析。结果 与模型组比较,白藜芦醇高剂量组小鼠终体质量降低(t=-14.453,P=0.021),海马组织细胞焦亡水平降低(t=-17.328,P=0.011),学习记忆能力改善,海马组织SIRT1蛋白表达升高(t=32.812,P<0.001),NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18和TNF-α蛋白表达均下降(t=-28.462,P=0.003;t=-38.148,P<0.001;t=-...     

关于医学检验实验室建设和管理的探讨

为培养技术型的医学检验人才,医学检验实验室的建设和管理应结合临床实际工作,分析其中存在的问题,采取相应的措施,不断改进,适应现代检验技术的发展。     

长期不同热量饮食对增龄小鼠胰岛素抵抗及肠道菌群的影响

目的 探究长期不同热量饮食对小鼠增龄所致胰岛素抵抗与肠道菌群紊乱的影响。方法 将30只8周龄的C57BL/6N小鼠随机均分为普通饲料喂养组(CON组)、高热量饲料喂养(HCD组)和低热量饲料喂养组(LCD组),喂养10个月后，测量动物体质量，空腹血糖和空腹胰岛素(FINS)水平，血脂四项及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平，计算胰岛素敏感指数(ISI)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),并进行口服糖耐量实验、肠道病理学检测和肠道菌群分析。采用SPSS 19.0进行统计分析，符合正态分布采用方差分析，不符合正态分布采用Kruskal-Wallis H检验检验。结果 饲养10个月后，CON组小鼠进入衰老阶段。与CON组比较，HCD组小鼠体质量增长最快(q=20.21,P<0.05),空腹血糖及血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL)含量升高(q=3.72,P<0.05;q=8.12,P<0.05;q=24.93,P<0.05;q=29.4,P<0.05)、高密度脂蛋白(HDL)含量下降(q=6.12,P<0.05),SO...