全文获取类型
收费全文 | 172篇 |
免费 | 2篇 |
国内免费 | 48篇 |
专业分类
儿科学 | 4篇 |
基础医学 | 6篇 |
临床医学 | 13篇 |
内科学 | 92篇 |
特种医学 | 28篇 |
外科学 | 18篇 |
综合类 | 20篇 |
预防医学 | 28篇 |
药学 | 8篇 |
中国医学 | 5篇 |
出版年
2023年 | 4篇 |
2022年 | 4篇 |
2021年 | 1篇 |
2020年 | 3篇 |
2018年 | 4篇 |
2016年 | 1篇 |
2014年 | 4篇 |
2013年 | 6篇 |
2012年 | 4篇 |
2011年 | 6篇 |
2010年 | 13篇 |
2009年 | 12篇 |
2008年 | 26篇 |
2007年 | 22篇 |
2006年 | 10篇 |
2005年 | 8篇 |
2004年 | 12篇 |
2003年 | 35篇 |
2002年 | 21篇 |
2001年 | 7篇 |
2000年 | 1篇 |
1998年 | 1篇 |
1997年 | 1篇 |
1996年 | 3篇 |
1995年 | 1篇 |
1992年 | 1篇 |
1991年 | 2篇 |
1990年 | 2篇 |
1989年 | 3篇 |
1988年 | 1篇 |
1982年 | 1篇 |
1981年 | 2篇 |
排序方式: 共有222条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
本根据农村给水工程的供水用户和用水量明确的特点,积累多年实践经验,提出了以设计配水当量为基础的管网水力计算方法。此方法简便易行,计算结果更接近实际。 相似文献
2.
目的观察手法复位旋转石膏固定对Colles骨折的疗效。方法采用手法整复、腕关节掌屈尺偏、旋转石膏固定治疗本病103例。结果本组103例中,98例获得随访,均达骨性愈合,腕关节恢复优62例,良32例,可5例,差0例。结论手法复位旋转石膏固定治疗Colles骨折,固定优良,腕关节功能恢复好,疗效高。 相似文献
3.
应用酵母双杂交技术筛选与乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白2结合的肝细胞蛋白编码基因 总被引:1,自引:1,他引:0
目的构建乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白2(HBEBP2)的真核表达载体并筛选人肝细胞中与HBEBP2相互作用的基因。方法通过PCR扩增获得HBEBP2基因,构建真核表达载体pGBKT7-HBEBP2,转化酵母菌AH109并在其中进行表达。随后与预转化了人肝细胞文库质粒pACT2的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)和铺有X-α-gal的营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)上进行双重筛选获得阳性克隆。提取文库质粒pACT2-DNA并与pGBKT7-HBEBP2共同转化AH109酵母菌株,于铺有X-α-gal的营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)上进行筛选以排除假阳性克隆。挑取真阳性克隆送测序,并进行生物信息学分析。结果筛选出6种与HBEBP2相互作用的蛋白,其中包括人类线粒体蛋白、人类α-2-糖蛋白1、人类磷酸甘露糖-p-长醇利用缺陷1和人类丝氨酸蛋白酶抑制剂等4个已知功能蛋白及2个未知功能序列。结论筛出人肝细胞中一组与HBEBP2相互作用的蛋白,为进一步探讨HBEBP2在HBV致病过程中的作用奠定了基础。 相似文献
4.
丙型肝炎病毒核心蛋白反式激活基因HCTP4启动子序列的确定及转录活性的鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(core)反式激活基因HCTP4基因序列表达的调控机制。方法:选取翻译起始密码子ATG上游44l bp的DNA序列为启动子序列,应用聚合酶链反应技术(PCR),以肝母细胞瘤细胞系HepG2基因组DNA为模板,扩增该启动子DNA片段,将其克隆至pCAT3中,构建pCAT3-HCTP4-promoter报告基因表达载体,以该质粒转染HepG2细胞,用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测报告基因编码产物氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性。结果:发现质粒pCAT3-HCTP4-promoter能够指导CAT的表达,吸光度(A值)是pCAT3对照质粒的5倍。结论:本研究克隆的启动子DNA序列具有转录活性,这一结果为研究HCTP4的调节机制,进一步阐明丙型肝炎病毒核心蛋白的作用机制奠定了基础。 相似文献
5.
目的研究丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白6号结合蛋白基因(Hcbp6)序列表达的调控机制。方法根据软件对启动子的预测,选取翻译起始密码子ATG上游3256bp及下游180bp的DNA序列,分成5段活性区域,分别以聚合酶链反应技术(PCR),肝母细胞瘤细胞系HePG2基因组DNA为模板,扩增该启动子DNA片段,将其克隆至PCAT3中,构建PCAT3-Hcbp6-P报告基因表达载体,将该质粒分别转染HePG2,NIH3T3细胞,用酶联免疫吸附法检测报告基因编码产物氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性。结果发现质粒pCAT3-Hcbp6-1066p和pCAT3-Hcbp6-240p能够指导CAT的表达,其平均吸光度值(4)是PCAT3-basic对照质粒的3.1倍和6.4倍。结论本研究克隆的启动子DNA序列具有转录活性,这一结果为研究HcbP6的调节机制,进一步阐明HCV核心蛋白的作用机制奠定了基础。 相似文献
6.
目的 探讨NS5AATP13能否在毕氏酵母中成功表达.方法 用Bst X I将pPICZαANS5ATP13线性化后,电转化毕氏酵母菌株KM71H,用Zeocin筛选高拷贝数的酵母菌落,在BMGY和BMMY培养基中进行诱导表达,以甲醇诱导,30℃培养4 d,表达产物进行SDS-PAGE和Western blot 分析.结果 预期分子量大小的NS5ATP13蛋白分泌至培养液.结论 NS5ATP13在毕氏酵母中成功表达. 相似文献
7.
目的构建人肝细胞生长因子(hHGF)真核表达载体,在L02细胞中表达hHGF并筛选其中的差异表达基因。方法构建pcDNA3.1(-)-hHGF载体,测序鉴定;其转染L02细胞后进行蛋白免疫印迹检测;将pcDNA3.1(-)-hHGF和pcDNA3.1(-)载体分别转染L02细胞后,提取总mRNA并逆转录为cDNA,运用基因表达谱芯片技术分析差异表达基因。结果构建的hHGF真核表达载体pcDNA3.1(-)-hHGF经酶切和测序鉴定正确;转染L02细胞后经蛋白免疫印迹证实hHGF存在明确表达;pcDNA3.1(-)及pcDNA3.1(-)-hHGF分别转染L02细胞后提取总RNA,经基因表达谱芯片分析发现,表达水平显著上调和下调的基因分别有404个和145个,在表达显著上调的基因中包含7种锌指基因。结论筛选出了hHGF转染L02细胞后的差异表达基因,为其作用机制及与锌指蛋白相关性的研究提供了重要依据。 相似文献
8.
全球约有3.5亿乙型肝炎病毒(HBV)携带者,我国约1.3亿,其中1/4为慢性乙型肝炎,易发展为肝硬化、肝癌.近年来,慢性乙型肝炎的治疗已取得较大进展.尤其是d干扰素(IFNα)和核苷(酸)类似物药物的开发与应用.使慢性乙型肝炎的治疗有了较大进步,但其疗效还不理想。 相似文献
9.
目的 构建JC病毒Agnoprotein基因的原核表达载体,表达纯化该蛋白.方法 PCR扩增患者脑脊液中JC病毒晚期调节蛋白Agnoprotein基因,测序正确后克隆入pET-32a(+)原核表达载体,诱导表达Agnoprotein蛋白并纯化.结果 pET-32a(+)-Agnoprotein表达出预期分子量大小的具有免疫活性的重组融合蛋白.结论 成功地表达纯化了Agnoprotein融合蛋白,为进一步研究其生物功能奠定了基础. 相似文献
10.
白血病患儿化疗前后红细胞免疫水平的改变 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨化疗对白血病患儿红细胞免疫功能的影响。方法选择我院白血病患儿35例为治疗组,检测其化疗前后红细胞C3b受体花环(RBC-C3bRR)和红细胞免疫复合物花环(RBC-ICR)水平,并以健康体检正常的儿童30名作为对照组。结果化疗前白血病患儿RBC-C3bRR和RBC-ICR水平与对照组的比较差异均有统计学意义(P<0.01),化疗后与对照组的比较差异均有统计学意义(P<0.01),化疗前后比较差异亦有统计学意义(P<0.01)。化疗后,症状缓解29例、部分缓解3例、未缓解3例。结论化疗可以增强白血病患儿红细胞免疫功能。 相似文献