CTnI对先天性心脏病患儿围手术期心肌损伤的评估意义

肌钙蛋白是肌肉组织收缩的调节蛋白，主要存在于骨骼肌和心肌中。心肌肌钙蛋白Ⅰ(CTnI)是仅存在于心肌的结构蛋白，利用单克隆抗CTnI抗体、结合碱性磷酸酶的CTnI抗体和4-甲氧基-4-(3-苯磷酸盐)螺-(1，2-二螺[4，4]二氧已烷3，2’金刚烷)(AMPPD)发光剂检测血清CTnI含量，对于心肌的损伤比其他心肌酶类更具有高敏感性和高特异性，且持续时间长。我们通过动态监测先天性心脏病患儿围手术期术前、术后血清CK、CK—MB、CTnI的变化，以评估不同类型手术对心肌的可能损伤。     

CLINICAL SIGNIFICANCE OF THE DETECTION OF MINIMAL RESIDUAL DISEASE IN CHILDHOOD B-ALL BY FLOW CYTOMETRY

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APO2.7在凋亡和坏死的HL-60细胞中的表达

目的研究单克隆抗体APO2.7识别的一种线粒体膜蛋白质在凋亡和坏死的HL-60细胞中的表达情况.方法依托泊甙(VP16)和热处理分别诱导HL-60细胞产生凋亡和坏死,用荧光显微镜检查、DNA片段化和PI摄取试验进行鉴定,利用流式细胞仪分析其APO2.7的动态表达.结果凋亡细胞的APO2.7表达率在0、2、4、8、16、24h分别为(2.5±0.56)%、(4.4±0.61)%、(6.5±0.70)%、(6.2±0.17)%、(25.8±0.56)%和(15.7±0.26)%.而坏死细胞却分别是(4.5±0.72)%、(62.8±0.26)%、(87.8±0.41)%、(93.5±0.95)%、(94.8±0.53)%和(89.3±0.85)%.二者均在16h达到峰值.结论提示APO2.7可能不是凋亡测定的特定标志而是在细胞死亡(凋亡和坏死)过程中发挥作用.     

免疫分型在单株丙球蛋白血症中的应用评估

目的探讨免疫分型、血清免疫球蛋白的定量检测在单株丙球蛋白血症诊断中的价值。方法收集118例单株丙球蛋白血症患者进行血清蛋白电泳(SPE)、免疫固定电泳(IF)、免疫球蛋白(Ig)定量及血清轻链(κ、λ)检测。针对免疫分型阳性、Ig定量阴性患者进行分析。结果免疫分型阳性、Ig定量阴性患者56例,其中游离轻链型6例(κ轻链型2例,λ轻链型4例),未分泌型1例;免疫分型阳性、Ig定量阳性的患者62例。结论 IF技术对单株丙球蛋白血症的诊断及分型具有重要意义,可以结合血清Ig及轻链的定量检测等其他实验室诊断。     

循环KRAS突变检测在结直肠癌患者新辅助治疗疗效中的临床价值探讨

目的探讨外周血循环肿瘤DNA(ctDNA)中原癌基因(KRAS)突变丰度变化对评估KRAS突变的局部晚期(cT3N1-2M0或cT4N0-2M0)结直肠癌患者新辅助治疗疗效的临床应用价值。方法选取53例组织活检被诊断为KRAS突变且接受了新辅助治疗的局部晚期结直肠癌患者,利用微滴式数字聚合酶链反应(ddPCR)检测其接受新辅助治疗前、后外周血中ctDNA KRAS突变丰度,收集胸、腹、盆腔电子计算机断层扫描(CT)结果,检测血清癌胚抗原(CEA)及糖类抗原19-9(CA19-9)含量。结果 53例局部晚期结直肠癌患者接受新辅助治疗前、后外周血ctDNA KRAS突变频率(MAF)不同,差异有统计学意义(P0.05);以MAF差值(治疗前MAF-治疗后MAF)为因变量,用最小显著性差异法(LSD)做MAF差值与影像学和病理学评效的比较分析,差异有统计学意义(P0.05);血清CEA和CA19-9变化差值(均为治疗前-治疗后)与影像学和病理学评效的比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论外周血ctDNA KRAS突变丰度作为一种新的分子评效手段可有效补充传统的治疗评价标准,在反映局部晚期结直肠癌对新辅助治疗的效果中具有重要的临床意义。     

CD4+CD25+调节性T细胞在肿瘤中的表达

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）是新近发现的T淋巴细胞亚群,发挥免疫抑制功能,可通过多种途径抑制效应细胞的抗肿瘤免疫,在多种肿瘤中特异性增高。     

淋巴细胞功能相关抗原-3(CD58)在儿童期急性B淋巴细胞白血病近期疗效判断中的应用

本研究评估CD58在急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)近期疗效判断中的价值。应用四色流式细胞分析技术观察135例儿童期B-ALL患者CD58分子的表达特点;建立用CD58/CD10/CD34/CD19抗体组合检测B-ALLMRD的方案;结合CD58的表达情况和MRD监测结果分析CD58在B-ALL中的预后价值。结果表明135例B-ALL的平均CD58MFI为113.08±63.33,15例正常骨髓的CD19+CD10+细胞的平均CD58MFI为14.68±5.26,两者差异显著(P<0.01);51.9%(70/135)B-ALL患者的CD58分子强表达,可以用CD58为指标进行MRD检测;CD58/CD10/CD34/CD19抗体组合的有效频率仅次于TdT/CD10/CD34/CD19,为51.9%;CD58高表达组的MRD阳性率显著低于CD58低表达组(P<0.05)。结论CD58可以作为B-ALLMRD检测的指标,此结果丰富了MRD检测的组合;CD58的高表达可以作为B-ALL预后较好的指标。     

儿童急性白血病细胞视网膜母细胞瘤蛋白的表达及临床意义

本研究检测视网膜母细胞瘤蛋白（retinoblastoma protein，pRb）在不同类型儿童急性白血病细胞中的表达，并探讨其表达水平与细胞周期、危险度、微小残留病（minimal residual disease，MRD）监测、预后等临床诊断治疗监测指标的关系。对89例初发小儿急性白血病患者（包括25例AML，10例T-ALL，54例B-ALL）及7例正常对照骨髓标本，采用流式细胞术（FCM）分别检测治疗前后视网膜母细胞瘤蛋白的表达情况．并对部分病例进行细胞周期分析。结果表明：①流式细胞术检测pRb的表达准确直观；②在各种类型的急性白血病中pRb的高水平表达具有普遍性，同一患儿白血病细胞pRb的表达明显高于非白血病细胞，在不同类型的急性白血病中pRb均有缺失表达；③pRb的表达水平与白血病细胞的细胞循环周期可能存在一定的相关性，pRb表达阳性的B-ALL中处于G1期的白血病细胞数显著高于pRb表达阴性的病例（92％ vs 77％）；④B-ALL中，MRD阳性组pRb的表达量明显低于阴性组，且差值有统计学意义（P〈0．05），并且治疗前后非白血病细胞的pRb表达水平是稳定的；⑤pRb的表达量与B—ALL早期治疗预后之间存在一定相关性，B-ALL预后不良组pRb的表达量低于预后良好组（P〈0．05）。结论：pRb在儿童急性白血病细胞中存在高水平表达或缺失等异常形式的表达差异，pRb的表达与白血病细胞的细胞周期、MRD监测、早期治疗反应的预后评价等存在相关性，对于B-ALL的治疗监测及预后评估具有指导意义。     

遗传性凝血因子Ⅺ缺陷症一例家系基因缺陷研究

目的 分析1例遗传性凝血因子Ⅺ(FⅪ)缺陷症家系表型和分子遗传学特征,对凝血因子基因(F11)进行基因缺陷研究.方法 通过检测先证者及家系成员的活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、FⅪ促凝活性(FⅪ:C)和FⅪ抗原(FⅪ:Ag)等进行临床表型诊断,应用PCR对先证者F11基因15个外显子及其侧翼序列进行扩增,对PCR产物进行直接测序.对先证者及其父母、100名健康对照者DNA相应区域进行PCR扩增,内切酶BssSI酶切,以排除基因多态性并确认突变位点.应用分析软件SignalP对信号肽切割点及位置进行预测.结果 先证者APTT为69.5 s,PT为12.3 s,FⅪ:C为2.6%,FⅪ:AS为2.5%,交叉反应物质(CRM)为阴性;健康对照组APTT为35 s,PT为13 s,FⅪ:C为100%,FⅪ:Ag为100%.测序发现,先证者F11基因外显子区共有4处与GenBank AY191837序列不同的位点,其中外显子2的G3733C杂合变异导致编码信号肽的氨基酸G-1R替换,该突变同时导入1个新的BssSI酶切位点.100名健康对照者的BssSI酶切结果排除了该变异为F11基因多态性.外显子8的C16642T杂合突变导致1个终止密码(Q263Term)产生.结论 F11基因G-1R和Q263Term双重杂合突变是导致先证者遗传性凝血因子Ⅺ缺陷症的分子发病机制.     

胃肠道癌患者外周血CD8＋T细胞功能相关标志物的检测及意义

目的　探讨胃肠道癌患者外周血T细胞亚群和CD8 T细胞CD2 8共刺激分子等功能相关性标志物的表达及意义。方法　用三色或四色荧光标记流式细胞术检测 2 7例胃肠道癌患者及 16例正常对照的外周血淋巴细胞。结果　与正常对照组相比 ,肿瘤患者外周血T细胞标志如CD3 、CD4 、CD8 表达水平及CD4 /CD8 比值差异无显著性 ;CD8 CD2 8-T细胞显著增加 (P <0 .0 1) ,而CD8 CD2 8 T细胞显著降低 (P <0 .0 5 )。表达HLA DR的活化CD8 T细胞显著增加 (P <0 .0 1) ,分泌IFN γ的CD8 T细胞 (Tc1)明显增多 (P <0 .0 1) ,而分泌IL 4的CD8 T细胞 (Tc2 )则正常人和肿瘤患者均很低。患者CD8 T细胞CD2 8及IFN γ的表达变化与肿瘤分期无关。结论　胃肠道癌患者中CD8 T细胞存在系统性活化的表现 ,其机制可能与CD2 8/B7以外的信号传递有关。胃肠道癌患者体内Tc1细胞的增加与肿瘤的分期缺乏明确关系。