临床标本中假丝酵母菌属的检出率及耐药性分析

目的 了解医院假丝酵母菌属感染的临床分布及耐药率.方法 以萨布罗培养基分离真菌,用API 20 CAUX假丝酵母菌属鉴定板和ATB 3 Fungus假丝酵母菌属药敏板进行假丝酵母菌属的鉴定和药敏检测.结果 共分离假丝酵母菌属189株,检出率为9.6％,以白色假丝酵母菌的检出率居首位,占76.2％,其次为热带假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌,分别占8.5％、6.3％、5.3％;189株假丝酵母菌属所致的临床感染,主要为肺部感染,痰标本中共检出114株,占60.3％,其次为清洁中段尿、粪便,分别占15.3％、9.0％;189株假丝酵母菌属对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、伏立康唑的敏感率较高.结论 必须重视假丝酵母菌属的培养鉴定和药敏试验,以指导临床合理使用抗真菌药物.     

2256例血培养标本病原菌分布及耐药性分析

败血症是临床上严重危及患者生命的感染性疾病.此时血培养的初步结果和合理的经验用药对能否及时救治败血症患者尤为重要.为了解我院血液感染病原菌菌群分布及主要致病菌的耐药特征,指导临床合理使用抗菌药物,我们归纳了本院2007年至2009年9月住院患者血培养中病原菌的相关资料,并进行统计学分析.     

单唾液酸神经节苷脂对2,5-己二酮诱导的PC12细胞凋亡的影响

目的研究单唾液酸神经节苷脂(GM1)对2,5-己二酮(2,5-HD)诱导PC12细胞凋亡的保护作用,并探讨其作用机制。方法以PC12细胞为神经元的细胞模型,2,5-HD、GM1及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)抑制剂LY294002单独或联合处理细胞,MTT法检测细胞存活率,Giemsa染色法观察细胞形态,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,免疫印迹检测蛋白激酶B(Akt)和磷酸化-Akt(P-Akt)蛋白的表达。结果GM1可以有效地改善凋亡引起的细胞形态学改变,提高细胞存活率(P<0.05),最高可提高36.35%;降低DNA断裂程度,减少凋亡率(P<0.001),最明显可降低69.36%。GM1能够促进Akt磷酸化,LY294002可以阻断这种作用。结论GM1对2,5-HD诱导的PC12细胞凋亡有保护作用。该保护作用可能是通过启动PI3-K信号通路,激活Akt及其下游信号而产生的。     

GM1对PC12细胞缺氧缺糖损伤中HO-1表达的影响及PI-3K/Akt通路在此过程中的作用

目的:探讨PC12细胞缺氧缺糖损伤中,单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)对血红素加氧酶(HO-1)表达的影响,并研究PI-3K/Akt通路在此过程中的作用。方法:用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)消除培养基中的氧合并培养基质缺糖制造PC12细胞缺氧缺糖损伤(OGD)模型,用RT-PCR和Western blot方法检测不同剂量(25-100μmol/L)GM1和PI-3K抑制剂LY294002对缺氧缺糖损伤时PC12细胞HO-1mRNA及蛋白表达的影响。结果:与对照组和单纯缺氧缺糖组相比,GM1可显著上调缺氧缺糖PC12细胞的HO-1mRNA和蛋白表达,且两者呈明显的剂量依赖关系;PC12细胞经LY294002预处理后,GM1上调HO-1mRNA和蛋白表达的作用均受到抑制。结论:GM1可上调缺氧缺糖损伤时PC12细胞HO-1mRNA和蛋白表达,PI-3K/Akt通路在此过程中发挥了一定的信号转导作用。     

NGF和神经节苷脂GM1对2,5-己二酮中毒性PC12细胞的协同保护作用

目的：研究神经生长因子（Nerve Growth Factor，NGF）和神经节苷脂GM1（Ganglioside GM1）对2，5-己二酮（2，5-HD）中毒的保护作用。方法：将细胞随机分为对照组和实验组，对照组于正常培养基生长，实验组以2，5-HD、NGF和GM，处理。采用Giemsa染色法在倒置显微镜下观察细胞形态，MTT法检测细胞存活率，流式细胞计数法检测细胞凋亡率。结果：2，5-HD处理后，细胞损伤存活率降低（P〈0．01），凋亡率上升（P〈0．01）；以NGF和GM1预处理的细胞显示出明显的抗损伤性，细胞存活率提高（P〈0．05），凋亡率下降（P〈0．05），且在联合时较单独应用效果更显著（P〈0．01）。结论：2，5-HD抑制PCI2细胞存活和增殖，诱导细损伤和凋亡。NGF和GM1对2，5-HD中毒性PC12细胞显示出协同保护作用。     

神经生长因子对β-淀粉样蛋白诱导PC12细胞凋亡的保护作用

目的:研究神经生长因子(NGF)对β淀粉样蛋白(Aβ)诱导鼠肾上腺嗜咯瘤细胞(PC12)凋亡的作用,从而探讨NGF对阿尔茨海默病的治疗作用。方法:以PC12细胞为神经元的细胞模型,将Aβ和NGF+Aβ分别加入培养的PC12细胞中,采用MTT法观察细胞存活率,相差显微镜观察细胞形态改变,hochest33258观察细胞核变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,比较两组间差异。结果:Aβ组细胞存活率随作用时间延长而下降(P<0.01),胞体变小,轴突退化变形,可见特征性的凋亡细胞核,并检测到典型的凋亡峰;而NGF+Aβ组细胞存活率明显增高,凋亡率明显减少(P<0.01)。结论:一定浓度的Aβ2535能诱导PC12细胞凋亡,NGF对Aβ诱导的PC12细胞凋亡具有保护作用。     

274株呼吸道假丝酵母菌感染的菌种鉴定及耐药性分析

目的了解本院呼吸道假丝酵母菌的菌种分布及药敏结果,为临床治疗假丝酵母菌感染提供依据。方法采用科玛嘉显色培养基及法国生物-梅里埃的API 20 C AUX假丝酵母菌鉴定板和ATB 3 Fungus假丝酵母菌药敏板进行假丝酵母菌的鉴定和药敏检测。结果呼吸道假丝酵母菌感染以白色假丝酵母菌为主（74.8）%;其次为热带假丝酵母菌（13.5%）、光滑假丝酵母菌（8.8%）。药敏结果显示对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、伏立康唑的敏感率较高。结论假丝酵母菌的菌株鉴定和药敏试验为临床合理使用抗真菌药物提供了可靠依据。     

弥漫性大B细胞淋巴瘤患者血清和细胞中miR-21的表达及其临床意义

目的 探讨微小RNA-21(miR-21)在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞系和患者血清中的表达及其在DLBCL早期诊断、基因分型及预后判断中的意义.方法 用实时荧光定量聚合酶链反应( FQ-PCR)从细胞水平检测9种DLBCL细胞系(OCI-Ly1、OCI-Ly3、OCI-Ly4、OCI-Ly7、OCI-Ly8、OCI-Ly10、OCI-Ly18、OCI-Ly19和HBL)中miR-21的表达,及临床确诊的62例DLBCL患者(DLBCL组)、50名健康体检者(健康对照组)血清miR-21表达水平;同时,随访62例DLBCL患者无复发生存期(RFS),应用Kaplan-Meier生存曲线分析62例DLBCL患者血清miR-21表达与预后的关系.结果 健康对照组B淋巴细胞miR-21的相对表达量为1.04±0.02,9种DLBCL细胞系miR-21 相对表达量依次为2.30±0.35、237.97±56.19、5.27±0.83、3.40±0.30、11.22±2.70、133.55±16.78、6.63±0.24、4.91±0.37、81.59±6.64,9种DLBCL细胞系的miR-21表达水平均高于健康对照组(t值分别为7.3、13.7、2 1.0、6.2、8.8、13.6、6.5、39.5、18.1,P均＜0.01);且ABC亚型细胞系(OCI-Ly3、OCI-Ly10、HBL)显著高于GCB亚型细胞系(OCI-Ly1、OCI-Ly4、OCI-Ly7、OCI-Ly8、OCI-Ly18、OCI-Ly19;t=11.18,P＜0.01).DLBCL组血清中miR-21的表达量为21.38( 10.26 ～45.21),健康对照组为1.87(1.05 ～3.97),DLBCL组血清miR-21的表达显著高于健康对照组(U=168,P=0.000).DLBCL患者中GCB亚型miR-21的表达为18.30(7.32～33.46),ABC亚型miR-21的表达为28.68( 14.92～98.44),ABC亚型miR-21的表达高于GCB亚型(U=336,P=0.043).此外,GCB型Ⅰ+Ⅱ期患者血清miR-21表达为24.75( 16.08 ～50.38),而Ⅲ+Ⅳ期为11.96(4.10～21.05);ABC型Ⅰ+Ⅱ期患者血清miR-21表达为47.49( 25.65～295.41),而Ⅲ+Ⅳ期为16.66(5.35～44.30),Ⅰ+Ⅱ期明显高于Ⅲ+Ⅳ期(GCB型U=62,P=0.013;ABC型U=53,P=0.014).随访DLBCL患者的RFS,miR-21高表达患者预后明显好于miR-21低表达患者(U=259,P=0.035).结论 DLBCL患者血清miR-21高表达,且与DLBCL临床分级分期、基因型和预后判断密切相关,miR-21有可能成为DLBCL早期诊断、基因分型及预后判断的新分子标志.     

假丝酵母菌性阴道炎的菌种鉴定及耐药性分析

目的 了解假丝酵母菌性阴道炎患者临床感染假丝酵母菌属的特点及其耐药现状,为临床抗真菌药物治疗提供参考依据.方法 按常规方法 以萨布罗培养基分离真菌,用法国生物梅里埃公司生产的API 20 C AUX假丝酵母菌鉴定板和ATB 3 Fungus假丝酵母菌药敏板进行假丝酵母菌属鉴定和药敏检测.结果 自593例假丝酵母菌性阴道炎患者的阴道分泌物中检出5种假丝酵母菌,以白色假丝酵母菌占首位,达到479株(80.8%),其次为热带假丝酵母菌51株(8.6%)、光滑假丝酵母菌38株(6.4%)、克柔假丝酵母菌16株(2.7%)、近平滑假丝酵母菌9株(1.5%),白色假丝酵母菌对临床常用的5种抗真菌药物5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑的敏感性均较好,>85.0%,非白色假丝酵母菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、伏立康唑的敏感性较好达>90.0%,而对氟康唑和伊曲康唑的敏感率较差均<75.0%.结论 假丝酵母菌性阴道炎感染以白色假丝酵母菌为主,白色假丝酵母菌与非白色假丝酵母菌对氟康唑和伊曲康唑的敏感性差异较大,应重视假丝酵母菌属的培养、鉴定和药敏试验,以指导临床合理选择抗真菌药物.     

血培养常见病原菌菌群分布及耐药性分析

目的了解武汉市中心医院2007年7月至2009年9月血培养病原菌菌群分布及常见致病菌的耐药情况,为临床合理应用抗菌药物提供参考。方法采用美国BD公司BACTEC9050全自动血培养仪进行培养检测,分离出的致病菌用法国生物梅里埃公司API鉴定系统进行鉴定,药敏试验采用纸片扩散法,以2007版美国临床实验室标准化研究所标准对药敏试验结果进行判定,运用WHONET5.4软件进行分析。结果 2256例标本共分离出病原菌269株,血培养阳性率11.9%,检出革兰阳性菌129株(47.96%);革兰阴性菌116株(43.12%);真菌24株(8.92%)。主要致病革兰阳性菌对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺100%敏感,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南100%敏感,铜绿假单胞菌和不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦较敏感。结论武汉市中心医院败血症的病原菌以条件致病菌为主,革兰阳性病原菌的分离率略高于革兰阴性菌,以葡萄球菌居多。病原菌的耐药情况严重,应及时监测病原菌变化及耐药趋势,指导临床用药。