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目的以凋亡抑制蛋白家族成员Survivin为目的基因,对采用电穿孔转染悬浮培养的小鼠原代淋巴细胞的各种参数进行选择,以提高转染效率。方法通过选择不同的电压、温度、细胞状态等转染参数,采用不同参数组合将化学合成靶向Survivin的siRNA导入悬浮培养的小鼠原代淋巴细胞,用倒置显微镜观察细胞计数,台盼兰拒染试验来评估siRNA的转染率和细胞存活率。结果小鼠原代淋巴细胞在350 V,40μs条件下,可获得最大转染率,约为31%;良好的细胞状态以及低温条件等参数均可获得更好的转染效果。结论电穿孔转染法是一种高效的基因转染方法 ,通过选择经优化的针对悬浮细胞的转染参数,可以获得较高的转染率。 相似文献
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食管破裂与穿孔的诊断和治疗 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 总结食管破裂与穿孔的诊治经验,从而提高对该病的诊断和治疗水平.方法 分析我科从2001年3月至2006年6月共收治的食管破裂与穿孔12例的临床资料.其中自发性食管破裂4例,食管异物所致6例,医源性损伤2例.手术治疗11例,食管修补6例,食管部分切除、胃代食管1例,胸腔闭式引流和纵隔引流4例(其中同时应用全覆膜抗反流食管内支架2例).单纯胸腔闭式引流者1例.结果 12例全部治愈,仅有1例食管部分切除、胃代食管术的患者术后出现吻合口轻度狭窄,但可正常进食.结论 尽早手术闭合瘘口和治疗食管原发病是治疗的关键.进行胸腔穿刺、上消化道造影等检查可帮助诊断. 相似文献
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人工血管重建术治疗腹主动脉瘤 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 总结人工血管重建术治疗肾动脉平面以下腹主动脉瘤的临床经验.方法 对38例肾动脉平面以下的腹主动脉瘤行人工血管重建手术,其中9例采用直桶形人工血管,29例采用"人"字形分叉人工血管.分别采用保留后壁或完全切断瘤颈的方法吻合近心端,对于远心端根据病情分别吻合在腹主动脉末端、髂总动脉或髂外动脉.重建髂内动脉8支,结扎髂内动脉3支.依据术中测压结果重建肠系膜下动脉11支,缝扎21支.结果 术后死亡1例,于手术后6d发生结肠破裂,14d死于感染性休克;二次开腹止血1例,37例患者痊愈出院,并分别随访3个月~2.5年,1例于术后2年死于心肌梗死.其余患者预后良好,无人工血管内血栓形成、吻合口假性动脉瘤和移植血管感染等中、远期并发症发生.结论 人工血管重建术是腹主动脉瘤最彻底、有效的治疗方法,正确选择手术适应证、良好的手术设计、手术技巧以及重视并发症的防治是保证手术成功的重要因素. 相似文献
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