青海省海南藏族自治州鼠疫疫源地鼠疫菌规律成簇的间隔短回文重复基因分型研究

目的 研究青海省海南藏族自治州（简称“海南州”）鼠疫疫源地鼠疫菌的规律成簇的间隔短回文重复（clustered regularly interspaced short palindromic repeats, CRISPR）基因型及其地区分布，为该疫源地的鼠疫防控工作提供科学依据。方法 1954—2009年海南州鼠疫疫源地内不同宿主动物和媒介昆虫体内分离的36株代表性鼠疫菌株为实验对象，采用传统的十二烷基磺酸钠裂解和苯酚-氯仿法提取鼠疫菌DNA。应用3对CRISPR引物（YPa、YPb、YPc）分别对被试菌株DNA进行PCR扩增、测序和分析，确定海南州鼠疫疫源地鼠疫菌的CRISPR基因型。结果 36株鼠疫菌中共发现17种非重复间区序列（spacer），其中YPa 9种、YPb 5种、YPc 3种。所有鼠疫菌株被分为5个CRISPR基因簇（Cb2、Cb4’、Ca7、Ca7’、Ca35’）,6个基因型（G1、G9、G22、G22-a1’、G26-a1’、G26-a1’a4-），其中G26-a1’型为主要基因型，分布于共和县、贵德县、兴海县；其次是G22型，分布于共和县、贵德县。结论 海南州...     

左氧氟沙星和莫西沙星对鼠疫耶尔森菌最低抑菌浓度的测定

目的 根据美国临床和实验室标准协会（CLSI）药敏试验方法中的琼脂稀释法,测定美国食品和药物监督管理局( FDA)批准治疗鼠疫的2种药左氧氟沙星和莫西沙星对鼠疫耶尔森菌的最低抑菌浓度,确定鼠疫菌对这2种药物的敏感性及MIC90（可抑制90%细菌生长的药物浓度）,掌握这2种药物对鼠疫菌的抑菌浓度,为鼠疫的临床治疗提供基线数据。方法 利用琼脂平板稀释法测定左氧氟沙星和莫西沙星这2种抗生素分别对1 010株鼠疫菌的最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）。结果 所测的1 010株鼠疫菌中未发现对左氧氟沙星和莫西沙星具有单个或2种抗菌药物抗性的鼠疫菌株,其最低抗菌药物浓度MIC50分别为0.06和0.12 μg/ml,MIC90均为0.25 μg/ml。结论 利用琼脂稀释法测定左氧氟沙星和莫西沙星对鼠疫耶尔森菌最低抑菌浓度,有效的评价了鼠疫耶尔森菌对氟喹诺酮类代表药物左氧氟沙星和莫西沙星的敏感性,实验数据支持我国在鼠疫临床治疗中可以采用左氧氟沙星和莫西沙星为治疗药物。     

档案管理在青海省人间布鲁氏菌病防治中的应用

依据1956年至今积累的青海省人间布病防治档案,建立青海省布病地理信息系统和布病防治资料数据库。根据地理信息系统和布病防治资料数据库的建立,充分利用布病防治档案,不仅为布病防控能力的提升提供了数据支持,而且可以通过对历年布病数据的分析提高布病档案材料的利用率,加强了布病防治资料的安全管理,为更好地进行布病防治提供数据信息支持和预警预报。     

基于TaqMan-MGB荧光探针的实时荧光PCR法检测玉树藏族自治州鼠疫耶尔森菌rpsL基因耐药突变

鼠疫是由鼠疫耶尔森菌(以下简称鼠疫菌)引起的一种烈性传染病, 发病急、传播快且病死率极高。历史上发生过3次鼠疫大流行, 导致上亿人口死亡。近20年来全球鼠疫疫情呈上升趋势, 2000 - 2018年, 世界卫生组织(WHO)共收到来自美洲、非洲和亚洲21个国家报告的2万多起鼠疫病例[1]。我国动物间鼠疫一直较为活跃, 且除个别年份外, 几乎每年都有人间鼠疫发生。2019年11月, 北京市首先出现2例内蒙古自治区输入性肺鼠疫病例, 随后内蒙古自治区又报道2例腺鼠疫病例, 提示这一甲类传染病仍对人们的生命安全具有极大的潜在威胁[2,3,4]。链霉素是WHO鼠疫手册[5]和我国《鼠疫诊疗方案(试行)》(卫办应急发[2011]第18号)[6]中治疗鼠疫的首选药物。但值得注意的是, 2021年Dai等[7]发现国内1株鼠疫菌因编码核糖体蛋白S12的rpsL基因第128 bp位点的碱基发生了突变, 从而产生了对链霉素的高度耐药性。为此, 本研究应用基于TaqMan-MGB荧光探针的实时荧光PCR法(简称MGB荧光探针法), 选取鼠疫流行较为严重的玉树藏族自治州(以下简称玉树州)鼠疫自然疫源地内分离...     

左氧氟沙星和莫西沙星治疗豚鼠实验感染鼠疫的研究

目的 观察左氧氟沙星和莫西沙星治疗豚鼠实验感染鼠疫的疗效。方法 参照《中华人民共和国国家药典》成人剂量,用施新猷的动物折算系数法换算成豚鼠每日每千克体重用药剂量[左氧氟沙星40 mg/(kg·d),莫西沙星32 mg/(kg·d)],用灭菌生理盐水稀释成水剂后,以皮下注射法治疗鼠疫菌141株感染24 h后的实验动物。连续用药9 d后停药,经医学观察9 d后处死,自然死亡及处死动物解剖取脏器进行鼠疫细菌学检验。结果 左氧氟沙星和莫西沙星治疗组实验动物全部存活,存活率均为100%;存活动物处死后,解剖取脏器进行细菌学检验,结果均为阴性。对照组动物于感染后3~5 d全部死亡,并从各脏器中分离到鼠疫菌,均为特异性死亡。结论 左氧氟沙星和莫西沙星对豚鼠实验感染鼠疫的治疗效果均有效,特殊情况下可替代链霉素用于鼠疫的预防和治疗。     

我国喜马拉雅旱獭鼠与南方家鼠鼠疫疫源地鼠疫菌遗传特征研究

目的 了解喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地与南方家鼠鼠疫疫源地鼠疫菌表型及其遗传特征，为掌握两块鼠疫疫源地鼠疫菌病原学特征提供参考依据。方法 选取我国喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地和南方家鼠鼠疫疫源地内分离的412株鼠疫菌，对其进行糖醇酵解实验、毒力因子鉴定、DFR分型和CRISPR分型研究。结果 两块鼠疫疫源地鼠疫菌生化型呈明显的地区性分布特征，喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地鼠疫菌被分为5个生化型；南方家鼠鼠疫疫源地鼠疫菌生化特性较为稳定，只有1个生化型。两块疫源地分离的鼠疫菌绝大多数能产生毒力因子Fl和PstI，其中喜马拉雅旱獭疫源地70.53%(201/285)菌株为VW阳性，Pgm阳性菌株占75.09%(214/285),Pgm阴性菌株占20.00%(57/285),Pgm混合型菌株占5.26%(15/285)；南方家鼠鼠疫疫源地37.80%(48/127)菌株为VW阳性，Pgm阳性菌株占29.13%(37/127),Pgm阴性菌株占58.27%(74/127),Pgm混合型菌株占12.60%(16/127)。DFR分型发现喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地鼠疫菌包括22种基因型，其主要基因型为5、7、8、10、1...     

青海省天峻县鼠疫病原学分析及流行病学意义

目的探讨天峻县鼠疫菌生物学特性及流行病学意义,为鼠疫防治提供科学依据。方法选择1957-2009年从天峻县境内不同宿主分离到的34株鼠疫菌为研究对象,开展生化试验、毒力测定、毒力因子鉴定、质粒分析、差异片段(different region genotyping,DFR)分型研究。结果34株鼠疫菌的生物型为古典型,生化型为青藏高原型,基因型主要为8、5型;鼠疫菌菌株均携带分子质量为6×106、45×106、65×106的3种质粒;31株鼠疫菌具备4个毒力因子,占91.18%(31/34),毒力检测结果显示均为强毒菌。结论天峻县分离的鼠疫菌具有青藏高原喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地病原特性,属强毒菌,如动物间疫情扩散波及人类,后果将不堪设想,因此该地区鼠疫防控工作不容松懈。     

昆明柏的化学成分研究

昆明柏Sabina gaussenii(Cheng)又称滇刺柏,柏科圆柏属植物,为我国特有树种,产于云南昆明、西畴等地[1]。作为裸子植物系统化学研究的一部分,也为寻找新的生物活性成分,本研究对昆明柏枝叶的醇提取物的化学成分进行了较系统的研究,从中分离鉴定了7个化合物,分别是柳杉酚(sugiol     

青藏高原鼠疫自然疫源地鼠疫菌CRISPR基因分型研究

目的探讨青藏高原鼠疫自然疫源地鼠疫菌规律间隔成簇短回文重复序列(CRISPR)的基因型及其地区分布。方法选取青海省地方病预防控制所保存的1954-2011年在不同地区宿主、媒介体内分离的1 004株鼠疫菌作为实验对象, 采用传统的苯酚-氯仿混合抽提法提取鼠疫菌DNA。分别对3个CRISPR位点(YPa、YPb和YPc)进行PCR扩增、测序, 将所测得CRISPR序列与文献最新报道的CRISPRDictionary数据库进行检索比对, 以鉴定间区序列(spacer);对CRISPR各位点新发现的spacer, 在美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库进行Blast序列比对, 推测基因序列来源。根据CRISPR spacer阵列的多态性对青藏高原鼠疫菌进行基因分型。结果 1 004株鼠疫菌共发现53种spacer, 其中新发现6种, 分别为a105、a106、a107、b51、b52、c14;1 004株鼠疫菌被分成44个不同的CRISPR基因型, 10大类群, 新发现基因型15种, 喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地鼠疫菌CRISPR基因型以G26-a1′、G7、G22、G24-a1′、G2...     

青海省喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地宿主媒介标本档案建立与管理

目的为更好地利用青海省喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地宿主媒介标本档案,为今后鼠疫防治和鼠疫流行的预测预警提供方便、快捷、科学而准确的档案资料。方法采集的兽类一般制作成简剥制标本,一部分制作成生态造型标本;采集的蚤、螨、吸虱均制作成玻片封片标本。所有标本均登记采集信息,建立标本档案后保存。结果青海省地方病预防控制所共保存青海省喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地相关标本30 420件,包括兽类标本6目26科45属110种,蚤类标本6科43属174种,蜱类标本12种,吸虱类标本16科18属68种,螨类标本12科35属123种。结论通过收集、制作、保存大量鼠疫疫源地内与鼠疫流行相关的宿主媒介标本,为开展鼠疫疫源地调查、研究和动物鼠疫监测基础工作提供科学依据。