细胞内钙信号的变化调节血管平滑肌细胞增殖

目的探讨细胞内钙信号的变化对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖作用的影响及其对细胞内信号转导机制的变化。方法以培养的大鼠VSMC为模型,用雷尼丁(RY)剌激VSMC内贮Ca2 释放入胞浆,用3H亮氨酸及3H胸腺嘧啶掺入量作为反应VSMC增殖的指标,加入不同的细胞内信号转导阻断剂,观察对RY效应的影响。结果与对照组相比,RY浓度依赖性地促进细胞内游离钙浓度的增高,差异显著(P<0.05或0.01)。RY剌激组蛋白核酸合成速率明显增高,与对照组相比差异显著(P<0.01);尼卡地平(Nicardipine),蛋白激酶C抑制剂(H7),钙调素激酶(CaMPK)抑制剂(W7)和丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂(PD98059)能明显抑制RY介导的VSMC蛋白核酸合成速率增高,与RY剌激组相比差异显著(P<0.01)。结论细胞内钙信号的变化明显促进VSMC增殖,但其效应可能通过Ca2 、PKC、MAPK来介导。钙离子拮抗剂可抑制血管平滑肌细胞增殖。     

α1—酸性糖蛋白柱拆分沙美特罗对映体

目的：建立沙美特罗对映体拆分方法。方法：以α1－酸性糖蛋白（α1－AGP）为固定相,考察了流动相pH、有机改性剂及流速对分离的影响。结果：以10mmol.L^-1醋酸钠（pH4.0)-异丙醇（98：2）为流动相,流速为0．9mL.min^-1,在α1－AGP柱上拆分了沙美特罗。结论：流动相pH和有机改性剂的量是优化分离带天电荷对映体的分离的重要因素。同时可以在一定的流速范围内通过调节流速来提高柱效、改善分离。     

细胞内钙调控对心肌成纤维细胞增殖的作用

目的:探讨不同来源的细胞内Ca2+([Ca2+]i)对心肌成纤维细胞(fibroblasts,PBs)丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)介导的增殖反应的作用。方法:以培养的大鼠FBs为模型,用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激FBs细胞外Ca2+跨膜内流、三磷酸肌醇(IP3)刺激胞内Ca2+释放,应用钙荧光指剂Fura-2/AM动态观测心肌细胞[ca2+]i浓度,γ-32P-ATP掺入法和免疫印迹(westen blot)测MAPK活性及蛋白含量,氚-亮氨酸(3H-Leu)、氚-胸腺嘧定(3H-TdR)掺入量作为FBs增殖的指标。结果:AngⅡ、IP3均能显著增加FBs[Ca2+]j浓度、MAPK活性及蛋白含量,并提高3H-Leu、3H-TdR掺入量,与对照组FBs相比差异显著,P<0.01。结论:激活[Ca2+]i使MAPK活性及含量明显增加而促进FBs的增殖,FBs的增殖与[ca2+]i浓度增加有关,与[Ca2+]i的来源无关。     

丙泊酚与氯胺酮在小型猪血管介入手术麻醉中的应用

目的 探讨小型猪在血管介入手术中的理想麻醉方法.方法 将经皮肾交感神经射频消融术的贵州小型猪16只随机分为丙泊酚麻醉组和氯胺酮麻醉组,每组8只,在麻醉过程中记录诱导时间、麻醉维持时间和苏醒时间,并对动物的心率、血压、呼吸、体温进行监测.结果 丙泊酚麻醉组诱导时间（2.83±0.59） min,麻醉维持时间（89.13±6.20）min,苏醒时间（29.88±4.82）min;氯胺酮麻醉组诱导时间（4.84±0.72） min,麻醉维持时间（76.50±6.12）min,苏醒时间（43.38±4.21）min.丙泊酚麻醉组对小型猪各项生理指标的影响小于氯胺酮麻醉组（均P＜0.05）.结论 丙泊酚和氯胺酮均可在小型猪血管介入手术中达到满意的麻醉效果,而丙泊酚略优于氯胺酮.     

结肠癌合并急性梗阻行Ⅰ期切除吻合术64例诊治体会

结肠癌伴急性肠梗阻是结肠癌较常见的并发症,占全部结肠癌病例的8%～21%,手术解除其梗阻非常重要.由于老年患者多,并发症多,给手术增加了很大的风险和难度.回顾分析2007年1月至2008年12月本院收治结直肠癌并急性肠梗阻实施Ⅰ期切除吻合术64例,疗效满意.     

高血压病心血管重构和功能异常调控研究

探讨高血压心血管功能异常和重构的调控机制,寻找抗高血压的关键靶点,提出更合理的治疗策略有十分重要意义。第三军医大学祝之明和祝善俊教授等从80年代初就围绕高血压病血管和心脏结构和功能的调控机制及其对降压药物的反应。开展了系列研究,其中部分工作获国家自然科学基金资助,并取得了重要进展。 1.观察到高血压病患者存在多种形式的细胞膜离子转运异常,高血压病以膜离子转运异常形式可分为钠泵抑制和非抑制型(哇巴因抵抗现象),前者与钠泵抑制因子有关,后者主要表现为细胞钙代谢异常。钠泵抑制因子的主要作用机制与激活钙     

超临界流体色谱法分离分析格列美脲中顺式异构体杂质

目的 建立一种超临界流体色谱方法分离降糖药物格列美脲及其顺式异构体杂质.方法 采用ACQUITY UPC2 Trefoil CEL1色谱柱(3.O mm×150 mm,2.5 μm),以超临界二氧化碳-甲醇(82∶18,V/V)为流动相,背压为13.8 MPa,进样量为4μL,柱温为40℃,流速为1.5 mL· min...     

三磷酸肌醇受体/钙调神经磷酸酶信号通路激活致心肌肥厚的研究

目的 研究激活心肌细胞三磷酸肌醇受体（IP3R）是否触发钙调神经磷酸酶（CaN)介导的心肌肥厚信号通路。方法 培养Wistar乳鼠心肌细胞检测心肌细胞蛋白和核酸合成，细胞内钙变化，CaN，活化T细胞核因子3（NFAT3）及锌指转录因子（GATA4），胚胎基因（α-actin,β-MHC）及即刻早期基因（c-fos,c-myc)表达。结果 给予IP3能时间和剂量依赖性也增加心肌细胞蛋白和核酸合成，能明显致心肌细胞内钙增加；IP3刺激心肌细胞IP3受体，能明显激活心肌细胞CaN/NFAT3/GATA4信号通路，促使心肌细胞的早期即刻基因和胚胎基因表达。结论 激活IP3R介导的CaN/NFAT3/GATA4信号通路能显地促使心肌细胞肥大，这条信号通路不同于已知的G蛋白偶联受体介导的心肌肥厚信号转导途径。     

RP-HPLC法测定β-司他夫定的有关物质

目的:建立了β-司他夫定原料有关物质的RP-HPLC测定方法和水解破坏制备系统适用性试验溶液方法。方法:采用Agilent 1100型高效液相色谱仪,使用SUPELCOSIL LC-18-DB(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以0.01 mol·L-1醋酸铵溶液-乙腈(96.5∶3.5)和0.01 mol·L-1醋酸铵溶液-乙腈(75∶25)为流动相,梯度洗脱,检测波长254 nm,柱温25℃。结果:β-司他夫定和4种已知杂质及其他未知杂质均能达到有效分离;经水解破坏产生的α-司他夫定与β-司他夫定的分离度均达2.8;β-司他夫定、胸腺嘧啶、β-胸苷与5-O’-苯甲酰-司他夫定线性范围分别为0.51~26μg·m L-1(r=1.000)、0.13~27μg·m L-1(r=1.000)、0.50~25μg·m L-1(r=1.000)、1.7~6.3μg·m L-1(r=1.000),已知杂质胸腺嘧啶、β-胸苷与5-O’-苯甲酰-司他夫定的平均加样回收率(n=9)分别为102.8%(RSD=1.5%)、100.6%(RSD=0.9%)、101.9%(RSD=2.1%);β-司他夫定与3种已知杂质的最小检出量均在2.5 ng以下;经水解破坏制备的系统适用性溶液的重复性良好;供试品溶液在4℃下的30 h内基本稳定。结论:本方法灵敏、准确、可靠,专属性强,可用于β-司他夫定原料的有关物质测定。