分泌型凋亡素真核表达载体的构建及对肝癌细胞HepG2凋亡的影响

目的 构建含有NT4和HA2-TAT的分泌型VP3真核表达载体,并观察其表达对人肝癌细胞HepG2和小鼠成纤维细胞NIH3T3的影响.方法 构建了含鸡贫血病毒VP3基因和NT4、HA2-TAT基因的分泌型真核表达载体--NT4-Apoptin-HA2-TAT重组腺相关病毒载体.体外转染人肝癌细胞HepG2和小鼠成纤维细胞NIH3T3,用MTT法和流式细胞学,检测凋亡素融合基因诱导细胞凋亡的效果.结果 携带融合基因的重组腺相关病毒感染人肝癌HepG2细胞48 h后,显示了很强的诱导肿瘤细胞凋亡的能力.而对小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞无明显凋亡作用.结论 分泌型NT4-Apoptin-HA2-TAT重组腺相关病毒载体转染细胞后能够被正常分泌、穿膜并特异性诱导肿瘤细胞凋亡,为肿瘤的基因治疗提供了新的思路.     

左氟沙星、氯霉素、红霉素的体外抗菌效应比较

目的 为研制开发更好的外用抗感染制剂提供科学的参考依据。方法 检测了6种186株常见临床感染茵对左氟沙星、氯霉素、红霉素的敏感性。结果 左氟沙星、氯霉素、红霉素对6种临床分离细菌MIC范围为0．0625—8．0μg／ml。0．125—128μg／ml，0．125—256μg／ml；MIC50为0．52μg／ml，26μg／ml，98μg／ml，MIC90为5．6μg／ml，108μg／ml，208μg／ml。结论左氟沙星的体外抗菌活性较氯霉素、红霉素强，氯霉素的体外抗菌活性较红霉素强。     

par-4 SAC基因的克隆及序列测定

目的:利用基因工程技术对 par-4 SAC 进行基因克隆并测定其序列,为进一步诱导肿瘤细胞靶向性凋亡的基因治疗奠定基础.方法:采用非对称互补引物/模板法,制备两端含有酶切位点的 par-4 SAC 的 cDNA,PCR产物克隆入 pGEM-T Easy 载体并转化感受态大肠杆菌 E.coli DH5α菌株,随机挑取数个菌落,筛选鉴定并测序.结果:经酶切鉴定、测序分析,表明所插入的基因片断为 par-4 SAC 基因,与设计完全相同.结论:应用非对称互补引物/模板法克隆 par-4 SAC 基因是成功及可行的.     

重组腺相关病毒rAAV-NT4-ADNF-9的构建及其对体外培养的大鼠耳蜗组织的转染

目的:包装携载神经营养素(NT4)与活性依赖性神经营养因子-9(ADNF-9)融合基因的重组腺相关病毒rAAV-NT4-ADNF-9,并观察该重组病毒对体外培养的耳蜗组织的转染。方法:使用pSSHG-CMV-NT4-ADNF-9,pGF140和pAAV/Ad 3种质粒共转染293包装细胞,制备ADNF-9重组腺相关病毒(recomb inate adeno-assoc iated virus,rAAV),应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度;体外分离培养新生SD大鼠的耳蜗毛细胞;将重组病毒感染体外培养的新生SD大鼠耳蜗毛细胞,于24 h后提取组织行反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)以检测rAAV-NT4-ADNF-9对耳蜗的转染。结果:应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度为2×1013cfu/m l,表明成功地构建了重组AAV载体。成功分离培养新生SD大鼠的耳蜗毛细胞后,经RT-PCR反应,琼脂糖凝胶电泳检测结果显示NT4-ADNF-9在耳蜗组织得到了表达。结论:构建的重组病毒rAAV-NT4-ADNF-9,在体外可成功转染耳蜗组织,用于基因治疗的研究。     

鸭乙肝病毒基因探针和表面抗原抗体检测系统已制备成功

白求恩医科大学肝病研究所名誉所长叶维法教授继1982年与日美两国协作,在我国肝癌高发区江苏启东县和广西扶绥县的家鸭中检出鸭乙肝病毒(DHBV)感染后,该所于1986年制备了检测DHBV-D NA的基因探针,并建立了检测DHBV感染的表面抗原抗体系统。用以上手段已对300余只流行区和非流行区的家鸭,进行了DHBV感染与肝病的相关关系的研究,并分析了DHBV     

麻杏石甘汤加味治疗小儿支气管肺炎40例

目的:观察麻杏石甘汤加味治疗小儿支气管肺炎的临床疗效。方法:将肺炎患儿80例随机分为治疗组和对照组,在抗感染、祛痰等常规治疗完全相同的基础上,治疗组加用麻杏石甘汤加味治疗。结果:治疗组发热消退和治愈率均优于对照组(P<0.01)。结论:麻杏石甘汤加味治疗小儿支气管肺炎疗效显著,无不良反应。     

椎间孔镜治疗人类免疫缺陷病毒感染腰椎间盘突出症患者的疗效及预后:非随机、对照、2年随访临床研究

背景:与传统手术如椎间盘融合术相比,椎间孔镜手术治疗腰椎间盘突出症具有手术创伤小、视野清晰、出血量少的优点.但以此手术治疗人类免疫缺陷病毒(HIV)感染患者的椎间盘突出症,治疗后的效果和预后情况如何?作者对此经验较少.目的:观察椎间孔镜治疗HIV感染腰椎间盘突出症患者的疗效及预后差异.方法:方案设计为前瞻性、单中心、非...     

马鞍山市蟑螂群落结构及密度监测结果分析

目的掌握马鞍山市蟑螂种群结构和季节消长规律,为防治工作提供依据。方法采用粘捕盒法,对捕获的蟑螂进行种类鉴定,计算蟑螂构成比和密度,分析蟑螂种群结构、重点场所密度和季节消长规律。结果2011年马鞍山城区共捕获蟑螂3 565只,室内蟑螂平均密度为1.65只/盒,德国小蠊、美洲大蠊、黑胸大蠊的构成比分别为94.51%、5.41%、0.08%。危害严重的场所捕获蟑螂比例分别为餐饮业(87.04%)、农贸市场(11.28%)和宾馆(1.09%),其中餐饮业和农贸市场以德国小蠊为主,分别占94.84%、91.79%。室内蟑螂密度受气温影响较大,与气温呈现极显著正相关关系(R=0.69,P<0.01)。结论马鞍山市全年平均气温较高,在灭蟑环境压力去除后蟑螂密度能够短期内快速恢复。因此,在餐饮、农贸市场等重点场所灭蟑工作需保持长期性、制度化和综合防治策略。     

气体信使硫化氢在大鼠肾血管性高血压中的调节作用

目的探讨硫化氢体系在肾血管性高血压形成及发展中的变化和作用。方法成年的雄性Wistar大鼠28只,随机分为对照组7只、双肾一夹组(two-kidney,one-clip,2KIC组)7只、2KIC+硫氢化钠(硫氢化钠为外源性硫化氢供者)组8只、假手术组6只,其中2KIC+硫氢化钠组每天腹腔注射硫氢化钠(56μmol/kg),对照组、2KIC组及假手术组注射相同剂量的生理盐水。相同条件饲养4周,4周后处死,检测血浆硫化氢水平,双肾硫化氢合酶的活性,血管紧张素Ⅱ,左心与全心重量比,光学显微镜下观察肾的显微结构变化。结果术后4周,2KIC组尾动脉压显著高于假手术组及2KIC+硫氢化钠组;2KIC组的血管紧张素Ⅱ显著高于假手术组和对照组;左心室与全心重量比值2KIC组高于对照组和假手术组;肾内硫化氢合酶的活性及血浆中硫化氢的含量2KIC组显著低于假手术组及对照组,2KIC+硫氢化钠组高于2KIC组。结论肾血管性高血压大鼠硫化氢体系受到严重抑制,可能是肾性高血压形成的重要因素,外源性的给予硫化氢供者有助于缓解高血压的形成。