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1.
凋亡素基因序列重组及其真核表达载体的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:提高凋亡素基因在肿瘤细胞中的表达效率,增强其诱导肿瘤细胞凋亡的生物学活性.方法:通过两次PCR,以pcDNA-VP3质粒为模板,扩增出带Kozak序列(真核核糖体结合位点)的凋亡素基因VP3.将其克隆到真核表达载体pRevTRE的多克隆位点,构建成凋亡素的真核表达载体pRevTRE-VP3,将该质粒分别以限制性内切酶BamHI和XhohI进行酶切鉴定,将初步鉴定显示可能克隆有目的基因的质粒进行测序鉴定.结果:测序结果表明,本研究合成的凋亡素基因与Noteborn报告的凋亡素基因序列一致,同源性为l 00%.在其起始密码子前添加了Ko zak序列的凋亡素基因已成功克隆到真核表达载体pRevTRE.结论:采用两次PCR法可提高表达效率的真核核糖体结合位点添加到凋亡素基因序列起始密码子前端,并构建成凋亡素真核表达载体. 相似文献
2.
Klippel-Trenaunay综合征(KTS)又名先天性静脉畸形骨肥大综合征,少数患者可累及尿路系统引起严重血尿,临床罕见.我院收治1例KTS累及膀胱引起血尿及失血性休克患者,现报告如下. 相似文献
3.
凋亡素原核表达载体的构建和表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 构建凋亡素原核表达系统,以制备抗原物质凋亡素融合蛋白。方法 通过PCR方法,以pcDNA-VP3质粒为模板,扩增出凋亡素VP3基因。将其克隆到原核表达载体pET-DsbA的多克隆位点,构建成凋亡素的高效原核表达栽体pET-DsbA-VP3,将该质粒转化到大肠杆菌E.coliBL21(DE3)plysS中,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside,IPTG)对其进行诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析目的蛋白。结果 转化有凋亡素原核表达载体pET-DsbA-VP3的大肠杆菌E.coliBL21(DE3)plysS经IPTG诱导后,聚丙烯酰胺凝胶电泳出现38300的目的蛋白条带。结论 凋亡素原核表达栽体pET-DsbA-VP3能高效表达出凋亡素融合蛋白。 相似文献
4.
5.
腹泻病儿致泻病原学及临床研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:为了解腹泻病儿的致泻病原学及临床特点。方法:取新鲜粪便做细菌培养,对纯培养或优势菌进行鉴定,病毒用RV-Ag ELLSA方法检查。结果:980例腹泻病儿中,查出病原504例(56.43%),检出病原体16种520株(53.06%),其中致泻菌403株,轮状病毒117株。结论:腹泻病儿中0-1岁婴幼占首位(67.14%)。各季度检出率差别不显著,以第3、4季度发病人数为多,病原菌以克雷伯氏菌为主,其次为HRV、枸橼酸杆菌。与抗生素的不合理使用,婴幼儿免疫力差有关。 相似文献
7.
目的:探讨小儿穿孔性阑尾炎致病细菌及药敏分析,为临床合理使用抗生素提供依据。方法:对郑州市儿童医院2010年7月至2011年7月小儿普外科收治的172例穿孔性阑尾炎术中抽取的脓液做细菌培养[1],其中163例脓标本培养阳性,均做细菌鉴定及药敏试验。结果:172例标本中163例检出细菌,阳性率为94.8%,其中混合感染5例,感染前3位的细菌依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌。大肠埃希菌对头孢噻肟、环丙沙星、舒普深、头孢曲松、头孢他啶的敏感率依次为73.3%、71.5%、97.3%、57.3%、80.1%。结论:小儿穿孔性阑尾炎的致病菌仍以大肠埃希菌为主,其中以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌较多见,对临床常用抗生素的耐药性逐年增高,应加强临床病原菌的耐药监测,合理使用抗生素,抗生素的选用应以脓液培养及药敏分析作为指导依据。 相似文献
8.
目的 了解河南省儿童医院2016—2018年临床分离菌株的分布及常用抗菌药物的耐药情况,为儿科临床合理用药提供依据。方法 选择2016—2018年所有临床分离菌株,采用Phoenix 100微生物分析仪和纸片扩散法进行药敏实验,按照历年CLSI标准判读药敏结果,用WHONET5.6软件进行耐药性分析。 结果 2016—2018年共收集临床非重复分离株21404株,其中革兰阳性菌7772株,占36.3%,革兰阴性菌13632株,占63.7%。无菌体液标本共分离出致病菌2312株,排在前三位的细菌为凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌。 3105株非脑脊液分离的肺炎链球菌中青霉素不敏感率为0.5%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)平均检出率分别为34.2%和72.0%;MRSA和MRCNS对绝大多数测试抗菌药物的耐药率均显著高于甲氧西林敏感株金黄色葡萄球菌(MSSA)和凝固酶阴性葡萄球菌(MSCNS)。对万古霉素和利奈唑胺不敏感的葡萄球菌未检出。检出耐万古霉素屎肠球菌1株,未发现对万古霉素不敏感的粪肠球菌。流感嗜血菌β-内酰胺酶阳性率为53.7%,除了对复方磺胺甲噁唑的耐药率高于80.0%外,对大多数抗菌药物比较敏感。 2016—2018年大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的检出率依次为70.4%、72.1%和66.6%,大肠埃希菌对碳青霉烯仍高度敏感,3年来其对碳青霉烯类药物的耐药率都低于10.0%。2016—2018年肺炎克雷伯菌产ESBL检出率依次为61.3%、75.6%和72.0%,对亚胺培南的耐药率为39.3%、32.7%和43.1%,对美罗培南的历年耐药率为40.4%、30.8%和43.2%。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为22.8%和19.6%。鲍曼不动杆菌对美罗培南和亚胺培南的耐药率均为60.5%。结论 多重耐药细菌在儿童中的形势严峻,威胁着儿科临床的抗感染治疗,应加强耐药监测和采取行之有效的感染控制措施。 相似文献
10.
目的用蛋白芯片的方法检测丙型肝炎病毒(HCV)分片段抗体。方法利用生物芯片技术和化学发光技术将高度纯化的抗原HCV Core、NS3、NS4、NS5以特定微阵列固定在固相载体上,用化学发光免疫法检测抗HCV Core、抗HCV NS3、抗HCV NS4和抗HCV NS5。结果174份血清中HCV抗体阳性87份,HCV抗体阴性87份,其中献血员33份,非丙型肝炎的其他肝病患者39份,非肝病者15份。87例雅培公司的AxSYM(微粒子发光)检测抗HCV阳性患者中,蛋白芯片检出阳性85份,阳性率为97.70%;在174份标本中,蛋白芯片检出阳性标本88份,其中抗HCV阳性87份,阳性率98.86%;抗HCV NS3检出49份,阳性率为55.68%;抗HCV NS4检出68份,阳性率为77.27%;抗HCV NS5检出37份,阳性率为42.05%;抗HCV Core检出69份,阳性率为78.41%。结论蛋白芯片显示较高的敏感性和特异性,具有临床实用价值。 相似文献