SARS恢复期患者血液与排泄物中SARS-CoV RNA的检测

目的应用巢式逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)检测严重急性呼吸综合征(SAILS)恢复期患者血液与排泄物中的病毒RNA。方法对连续3次收集的23例确诊SARS恢复期(病程≥21天)患者的血、尿、痰、粪便标本进行核酸提取，设计特异性内外引物，使用巢式RT—PcR的方法进行病毒RNA检测。结果通过巢式RT—PCR，共检测到6份阳性标本，其中粪便标本中检测到4份，检出率为5．8％；痰标本中检测到2份，检出率为2．9％。在尿液和血液标本中未检测到病毒．RNA。结论个别SARS恢复期患者排泄物中有SARS病毒RNA存在，因此对恢复期患者的排泄物应慎重处理，对其引起SARS的再次传播的危险性需要进一步评估。     

电镜观察从非典型肺炎患者尸检标本中发现衣原体样和冠状病毒样颗粒(摘要)

目的　探索 2 0 0 2年末暴发于广东等地的非典型肺炎的病原。方法　对来自广东、山西、四川省和北京市的 7例非典型肺炎死亡病人的尸体解剖标本进行超薄切片电镜观察 ,将病人肺组织提取物接种于 2 93细胞 (人胚肾转化细胞系 ) ,分离病原 ,对病人组织中和分离的病原进行免疫学鉴定。结果　超薄切片电镜观察 ,在死亡患者的肺 (7例 )、脾 (2例 )、肝 (2例 )、肾 (3例 )和淋巴结 (1例 )中均观察到衣原体样包涵体和网质小体、中间体、原生小体颗粒的存在 ,并在 3例病人肺组织中同时见到了冠状病毒样颗粒和未知的基质样结构。用RT PCR方法从 2例病人肺组织中扩增出冠状病毒RNA聚合酶基因片段。将病人肺组织提取物接种于 2 93细胞进行培养 ,取第 2代细胞作电镜观察 ,也发现衣原体样颗粒和包涵体的存在。在病人组织和培养细胞中见到的衣原体样颗粒均不能与衣原体属特异性抗体和抗肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体抗体反应 ,提示可能为新的衣原体样因子。结论　在死亡病人组织和培养细胞中发现的衣原体样和冠状病毒样颗粒 ,可能是广东等地暴发的非典型肺炎的主要病原。     

基因芯片用于SARS早期诊断和病毒载量时相监测研究

目的：采用基因芯片技术对严重急性呼吸综合征(SARS)患者进行病毒载量时相监测，为SARS早期诊断提供参考指标。方法：4例确诊非重症SARS患者，在病程的3～30d中，间隔2-6d共7次连续采样。检测标本种类为血液和呼吸道分泌物(痰或鼻、咽拭子)。血标本26份，呼吸道分泌物标本24份．共计50份。对SARS—CoV复制酶(replicase)1A、刺蛋白(spike glycoprotein)和核衣壳蛋白(nucleocapsid protein)的编码序列区域进行检测和杂交。基因芯片有严格的反应内控体系和防止污染手段。结果：4例SARS患者在病程第4天第1次采样时，2例患儿呼吸道标本阳性，在病程9～18d第2、3次采样时，4例患者的所有标本检测均为强阳性或中等程度阳性。在病程18～23d、第4、5次采样时，所有标本均表现为阳性程度减弱或转为阴性。到病程的22—30d第6、7次采样检测时．4例患者的呼吸道分泌物和血标本已全部无病毒核酸检出。结论：基因芯片技术为SARS早期诊断和病毒载量时相监测提供了有参考意义的实验数据．