人肝癌特异性EB病毒载体—p^EBAF介导hGM—CSF基因的转移及表达

目的：探索人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（hGM-CSF)基因在肝癌细胞中特异性表达的新途径。方法：构建p^EBAF/hGM-CSF基因克隆,用脂质体转染法将它分别导入分泌甲胎蛋白（AFP）的肝癌细胞株HepG2和不分泌APF的细胞株SMMC7721,构建两围基因的细胞克隆HepG2/hGM-CSF,SMMC7721/hGM-CSF,用MTT比色法测定细胞上清中hGM-CSF活性。结果：HepG2/hGM-CSF细胞上清hGM-CSF活性平均为46．5ng/ml/10^6/24h,SMMC7721细胞上清中无明显hGM-CSF活性。结：载体p^EBAF介导的hGM-CSF基因能在分泌AFP的肝细胞中获得特异性表达。     

全反式维甲酸联合三氧化二砷治疗初发急性早幼粒白血病的初步疗效观察

目的观察全反式维甲酸(ATRA)联合三氧化二砷(As2O3)治疗急性早幼粒白血病(APL)的疗效和不良反应。方法ATRA20~40mg/d,分2~3次服用;As2O3(0.1%溶液)10mL加入5%葡萄糖溶液500mL中静脉点滴,持续4~6h,1次/天,联合治疗初发APL。根据外周血白细胞计数、肝功能变化适当调整ATRA和As2O3的剂量。观察CR率、获得CR所需的时间、不良反应及近期缓解时间。结果16例初发APL患者早期死亡1例,15例获CR,CR率93.7%,获得CR的平均时间为(25.7±5.2)天。62.5%患者在治疗开始后出现白细胞升高,调整ATRA后均恢复。50%患者出现肝功能异常,经调整剂量及应用保肝药后均坚持应用As2O3至疗程结束。至今15例获CR的患者仍处于CR状态(2~26个月)。结论ATRA联合As2O3治疗初发APL疗效好,不良反应少,而且能缩短达CR的时间。     

成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞体外定向诱导分化为胰岛样细胞观察

目的:体外定向诱导成人脂肪源Flk1 CD31-CD34-细胞向胰岛样细胞分化.方法:首先将成人脂肪源Flk1 CD31-CD34-细胞培养在含适当浓度的B27、bFGF及EGF等因子的培养基(诱导液1)中诱导6 d,接着更换诱导培养基,用含适当浓度的β细胞调节素、尼克酰胺等高糖无血清培养基(诱导液2)诱导细胞向胰岛样细胞分化,诱导前后用RT-PCR法检测细胞nestin、神经元素3(ngn3)、胰岛素启动因子1(IPF-1)、胰岛素、胰高血糖素基因的表达;免疫组织化学法检测nestin、胰岛素、胰高血糖素、生长抑素抗原的表达;放射免疫分析法检测细胞胰岛素分泌情况.结果:成人脂肪源Flk1 CD31-CD34-细胞经诱导液1诱导6 d后可分化成nestin 的祖细胞;继续用诱导液2诱导6 d后变圆的细胞逐渐增多,并聚集成团,免疫荧光结果证实经2阶段诱导后的细胞表达胰岛素、胰高血糖素、生长抑素等内分泌激素,放射免疫分析结果表明诱导的胰岛样细胞团可以分泌胰岛素.结论:成人脂肪源Flk1 CD31-CD34-细胞具有胰腺干、祖细胞的固有特征,极有可能作为种子细胞用以糖尿病的细胞治疗.     

非清髓异基因外周造血干细胞移植治疗白血病疗效观察

目的 探讨非清髓性异基因外周血造血干细胞移植(NAPBSCT)治疗年龄较大的白血病患者安全性和疗效.方法 采用NAPBSCT治疗6例45～65 岁白血病患者,其中急性淋巴细胞白血病1例,淋巴瘤细胞白血病2例,急性粒细胞白血病1例,慢性粒白血病2例.以FAC为预处理方案,氟拉达宾(Flud)50mg/d(-6d～-2d)(以造血干细胞输注当日为0d,输注前为"-",输注后为" "),抗淋巴细胞免疫球蛋白(ALG)15mg/(kg·d)(-6～-2d),环磷酰胺(CTX)30mg/(kg·d)(-4～-3d).于 30 d进行第1次供者淋巴细胞输注,每4周1次,共6次.输注的供体淋巴细胞数由5×104 /kg逐渐增加至1.5×108 /kg.结果 1例患者于移植后56天死于急性移植物抗宿主病(aGVHD),1例患者于移植后81天死于肺部真菌感染,其余4例患者目前均存活,最长的1例已存活达35个月.6例患者在移植早期均形成混合性嵌合体和血液学部分缓解,供体淋巴细胞输注后有3例患者形成供体型完全嵌合体,并达到血液学完全缓解.结论 非清髓性外周血造血干细胞移植治疗年龄较大的白血病患者较为安全且疗效较好.     

国产两性霉素B治疗恶性血液病并发肺部真菌感染38例临床观察

目的:探讨国产两性霉素B对恶性血液病并发肺部真菌感染的疗效和安全性。方法:对河南省肿瘤医院血液科2001年12月~2005年12月期间经微生物学和临床资料证实的38例肺部真菌感染患者,随机分为2组(传统给药组即逐步加量组和改良给药组即起始足量组)接受国产两性霉素B治疗,观察2组疗效及不良反应。结果:38例应用国产两性霉素B患者中有3例因严重药物不良反应停药,其余35例患者比较显示改良给药组达显效时间短于传统给药组,2组间总体疗效及不良反应差异无统计学意义。结论:一开始即给足够剂量的国产两性霉素B治疗恶性血液病并发肺部真菌感染达显效时间短于逐渐加药的给药方法,其不良反应及总体疗效与后者差异无统计学意义。     

异基因造血干细胞移植治疗有侵袭性真菌感染史的急性白血病3例并文献复习

目的：探讨有侵袭性真菌感染史的急性白血病患者进行异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）的可行性。方法：3例急性白血病患者移植前均有真菌感染病史,2例肺部真菌感染,1例肺部及肝脾真菌感染,经抗真菌治疗病情好转后行异基因HSCT。所选供者均为HLAA、B、DR位点全相合的同胞兄弟姐妹,使用改良BU／CY预处理方案,用MTX加CsA预防急性移植物抗宿主病,移植0d开始使用抗真菌药预防真菌感染。结果：随访1年半,3例患者无白血病复发,1例出现肺部真菌感染,抗真菌治疗后好转。余2例真菌感染病灶均稳定。结论：通过控制真菌感染的易感因素及再次预防,有真菌感染史的急性白血病进行HSCT是可行的。     

有丝分裂原激酶MEKK2调节白细胞介素2生成的研究

目的 探讨有丝分裂原激酶MEKK2对IL-2生成的影响。方法 用MEKK2和JNK激酶活性测定、荧光素酶报告基因检测、逆转录-聚合酶链反应及Western blot等方法，检测在PHA／抗CD28抗体刺激Jurkat细胞后MEKK2对IL-2转录和翻译的影响结果经PHA／抗CD28抗体刺激后，亲本Jurkat细胞AP1和IL-2启动子荧光素酶报告基因活性分别增加4倍和5倍。而MEKK2功能域灭活的Jurkat细胞AP1和IL-2启动子荧光素酶报告基因活性仅各增加1倍。经PHA／抗CD28抗体刺激后，亲本Jurkat细胞IL-2 mRNA的转录和IL-2蛋白的表达明显增加，而MEKK2功能域灭活的Jurkat细胞IL-2 mRNA的转录和IL-2蛋白的表达无明显增加。结论 MEKK2在IL-2的生成过程中起重要的调节作用，MEKK2可以作为药物作用的靶点，从而筛选有效药物抑制免疫反应，提高移植物抗宿主病和自身免疫性疾病治疗的疗效。     

人脂肪源间充质干细胞治疗ABO血型不合造血干细胞移植后的顽固性单纯红细胞再生障碍性贫血2例

回顾性分析2004-04/2006-02河南省血液病研究所收治的2例接受异基因造血干细胞移植后并发单纯红细胞再生障碍性贫血的患者,病例1为一处于第2次完全缓解期的25岁女性急性淋巴细胞白血病患者;病例2为一处于第2次完全缓解状态的16岁女性急性髓细胞白血病患者。均经中心静脉输入脂肪源间充质干细胞进行治疗,剂量为1.0×106/kg。结果2例接受脂肪源间充质干细胞治疗的患者病情很快得以缓解,且均无明显不良反应出现。提示应用脂肪源间充质干细胞治疗ABO血型不合造血干细胞移植后出现的顽固性单纯红细胞再生障碍性贫血有一定的疗效。     

亚叶酸钙/氟尿嘧啶、顺铂3种方案治疗晚期胃肠道腺癌

目的 :观察两种剂量的亚叶酸钙 (CF 2 0mg/m2 ,2 0 0mg/m2 )、两种给药方法的氟尿嘧啶 (5 FU ,持续灌注和每天静滴 2小时 )与顺铂 (DDP 2 0mg/m2 )组成 3种方案分别治疗晚期胃肠道腺癌的临床疗效及不良反应。方法 :将 1999年 1月～ 2 0 0 0年 11月住院治疗的晚期胃肠道腺癌 36例患者随机分为A、B两组 ,回顾性分析 1997年 4月～ 1998年 12月住院治疗的 2 9例同种患者作为对照组C组。A组 :CF 2 0 0mg/m2 ,静滴 2小时 ,每天 1次 ,连用 5天 ;5 FU 3g/m2 ,持续静脉灌注 5天 (加入Baxter泵内 ) ,DDP 2 0mg/m2 ,静滴 2小时 ,每天 1次 ,连用 5天。B组 :CF 2 0mg/m2 ,用法同A组 ;5 FU、DDP剂量与方法同A组。C组 :CF 2 0 0mg/m2 ,用法同A、B组 ;5 FU 6 0 0mg/ (m2 ·d) ,用法同CF ;DDP方法同A、B组。以上方案每 3周为 1周期 ,连续 3个周期后评价疗效及不良反应。结果 :A组 (n =2 0 )胃癌 8例、大肠癌 12例 ,有效率 (CR +PR)分别为 5 0 %(4 / 8)、41.7%(5 / 12 ) ;B组 (n =16 )胃癌7例、大肠癌 9例 ,有效率 (CR +PR)分别为 42 .9%(3/ 7)、44 .4%(4 / 9) ;C组 (n =2 9)胃癌 14例、大肠癌 15例 ,有效率 (CR +PR)分别为 35 .7%(5 / 14)、40 %(6 / 15 )。毒副反应 :A、B两组血液毒性、胃肠道反应及肾、膀胱毒性相近     

异基因脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞小鼠移植后嵌合体形成及免疫耐受检测

目的:探讨器官移植中脂肪源Flk1 CD31-CD34-细胞诱导免疫耐受的可能性.方法:20只C57BL/6小鼠经致死量射线照射后随机等分为2组,实验组移植C57BL/6小鼠骨髓细胞和BALB/c小鼠脂肪源Flk1 CD31-CD34-细胞,对照组仅移植C57BL/6小鼠骨髓细胞,以CM-DiI荧光染料示踪脂肪源Flk1 CD31-CD34-细胞的体内分布情况,并以PCR方法检测Y染色体的存在以进一步鉴定.以皮肤移植实验观察脂肪源Flk1 CD31-CD34-细胞移植小鼠对供体来源组织器官移植物的反应性,以未移植Flk1 CD31-CD34-细胞小鼠为对照.结果:脂肪源Flk1 CD31-CD34-细胞可进入并较长期(30 d)存在于异基因小鼠免疫器官内;在细胞移植组小鼠脾脏组织中可检测到供体来源T细胞占受体脾细胞的6.68%;脂肪源Flk1 CD31-CD34-细胞移植组小鼠供体来源皮肤移植物存活＞90 d,未处理组为8～9 d.结论:异基因脂肪源Flk1 CD31-CD34-细胞移植后可形成稳定嵌和体,并诱导特异性免疫耐受的产生.