2014-2015年昆明市175件市售海产品中诺如病毒污染状况检测

目的 调查昆明市售海产品中诺如病毒的污染状况,为市民消费海产品提供建议,为昆明市售海产品食用安全性提供依据。方法 2014年7月至2015年7月,采集市售海产品175件,应用real-time RT-PCR法分别检测诺如病毒的ＧⅠ和ＧⅡ两个亚型,并对不同类型、不同季节、不同产地市售海产品中诺如病毒的污染情况进行比较。结果 175份市售海产品中诺如病毒总检出率为1.14%（2/175）,从基因分型看,2份阳性样品均为GⅡ型。结论 2014年-2015年昆明市售海产品中检出GⅡ型诺如病毒,存在通过食用海产品感染的风险。     

环介导等温扩增技术检测副溶血性弧菌的优势

目的 建立一种利用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术快速检测副溶血性弧菌的方法.方法 采用LAMP技术扩增副溶血性弧菌,并与实时聚合酶链反应(Real-time PCR)检测法和Vitek 32自动微生物分析鉴定方法作对比.结果 LAMP技术与Real-time PCR检测法检测结果一致,12株副溶血性弧菌得到阳性扩增结果,1株创伤弧菌得到阴性扩增结果;Vitek 32自动微生物分析鉴定方法结果为12株副溶血性弧菌和1株创伤弧菌.结论 利用LAMP技术扩增副溶血性弧菌比Real-time PCR检测法和Vitek 32自动微生物分析鉴定方法有一定优势,LAMP技术为副溶血性弧菌的检测提供了新的手段.     

昆明地区2018-2020年腹泻患者中艰难梭菌感染特征分析

目的对2018-2020年昆明地区腹泻患者中艰难梭菌感染特征进行分析, 为后续监测和防治提供数据支持。方法收集2018-2020年云南省4家哨点医院腹泻患者粪便标本共388份, 使用实时荧光定量PCR方法进行艰难梭菌粪便毒素基因检测, 对结果阳性的粪便标本进行菌株的分离, 用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定菌株。提取分离菌株的基因组DNA进行多位点序列分型(MLST)。分析毒素阳性和菌株分离阳性与患者的临床特征以及艰难梭菌阳性与其他病原共感染的情况。结果 388份粪便标本中, 艰难梭菌内参tpi基因阳性标本47份, 总阳性率为12.11%。其中, 非产毒艰难梭菌4份(8.51%), 产毒艰难梭菌43份(91.49%)。47份阳性标本分离得到18株艰难梭菌, 阳性标本的分离率为38.30%。其中tcdA、tcdB、tcdC、tcdR和tcdE基因均为阳性的菌株14株。18株艰难梭菌的二元毒素均为阴性。所有分离菌株的MLST结果共形成10种序列型(ST), 其中ST37型5株(27.78%);ST129、ST3、ST54和ST2型各2株;ST35、ST532、ST48、ST27和ST3...     

昆明市2009～2010年甲型H1N1流感病毒网络实验室的监测结果分析

目的 对昆明市流感监测地区的流感样病例咽拭子进行监测,以掌握2009～2010年昆明市甲型H1N1流感流行情况.方法 提取标本中的病毒核酸,采用荧光定量PCR方法进行甲型H1N1分型.结果 1377份流感样标本中,检出A型流感病毒622份,甲型H1N1 519份占总采样数的37.7％,以2009年10月～2010年1月为流行高峰,各年龄段人群均易感,30岁以下患者占84.4％.结论 甲型H1N1在监测时间内,主要集中在2009年,流行季节为秋冬季,侵袭的人群以30岁以下年龄段为主.     

云南省昆明地区2021年柯萨奇病毒A10型VP1区基因特征分析

目的 对云南省昆明地区2021年手足口病（hand,foot and mouth disease,HFMD）患儿粪便样本中提取的柯萨奇病毒A10型（coxsackievirus A10,CVA10）VP1区基因特征进行分析。方法 从2021年昆明地区各县市区送检的手足口病患儿粪便标本中直接提取病毒RNA,先用肠道病毒EV U/EV-A71/CVA16三重核酸检测试剂盒和CVA6/CVA10病毒双通道核酸检测试剂盒进行核酸检测,检出的CVA10病毒再用486/488和487/489引物分两段扩增CVA10 VP1区全序并测序,用Sequencher 4.8软件对序列进行拼接和编辑,得到CVA10 VP1区全序列。将测得的序列与文献中的序列进行比对,用Mega 5.2软件构建系统进化树,进行基因特征及分子流行病学分析。结果 2021年从852份手足口病患儿粪便标本中共检测到331株肠道病毒（enterovirus,EV）,总阳性检出率为38.85%(331/852),其中,23株（6.95%,23/331）为CVA10。VP1区基因分析结果表明,23株CVA10病毒株均为基因型E,是昆明地...     

黄韧带肥厚致胸椎椎管狭窄症2例报告

以黄韧带肥厚为主要原因引起的胸椎椎管狭窄症极为少见,过去可能是检查手段馈乏,致使此病漏诊,现经CT及MRI检查后,发现2例。1典型病例1.1病例1患者,女,45岁。两腿麻木,渐重20天,近1周卧床不起,小便不能自解,既往有胸腰背痛数年。检查:两侧乳头以下2寸感觉消失,腹壁反射消失,两下肢肌力Ⅱ～Ⅲ级,膝反射减弱,跟腱反射消失。胸椎MRI示T9～10、T10～11椎管后方结节状低密度影,硬脊膜压迫明显。诊断:下胸椎椎管狭窄症。术中见黄韧带肥达10mm,硬脊膜明显压迹。术后1天两下肢自觉轻松,麻木减轻,肌力增强。术后1月复查已能行走,大小便能自解,麻…     

昆明市市售生鲜海产品中致泻性弧菌污染状况研究

目的了解昆明市市售生鲜海产品中致泻性弧菌污染状况,为相关食品安全监管提供科学依据,为安全食用生鲜海产品提供参考。方法选择昆明市内有代表性的生鲜海产品市场和海鲜酒楼,采集贝类、鱼类、虾类和养殖水共178件样本,检测致泻性弧菌。结果昆明市市售生鲜海产品中副溶血性弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌和霍乱弧菌(非O1非O139群)的检出率分别为37.1%、3.9%、17.4%、0.6%;未检测出其他类型的致泻性弧菌。夏秋季和冬春季致泻性弧菌的检出率分别为63.6%(68/107)、冬春季为54.5%(30/55),差异无统计学意义(χ2=1.23,P0.05)。海鲜酒楼致泻性弧菌检出率为90.0%(9/10),明显高于生鲜市场57.1%(96/168),差异有统计学意义(χ2=4.21,P0.05)。结论昆明市市售生鲜海产品中致泻性弧菌的检出率较高,应加强对生鲜海产品销售和加工市场的食品安全监管,加强安全食用生鲜海产品的宣传,减少食物中毒事件的发生。     

BD MAX全自动工作站在肠道病毒检测中的优势

目的 比较常规检测方法与BD MAX全自动工作站在手足口病病原学检测中的差异,探讨应用BD MAX全自动工作站检测肠道病毒的可行性。 方法 收集2017年1月—2020年9月昆明市临床诊断为手足口病病例的标本,随机选择136份,以实验室常规采用的实时荧光PCR检测方法和BD MAX全自动工作站方法,对结果进行Cohen′s kappa一致性分析;用无酶水对检测试剂盒提供的U/CA16/EV71假病毒阳性对照做10倍梯度稀释,记录各稀释度检测结果;随机取两份阳性标本,分别用两种方法平行重复检测10次,计算 Ct值的平均值和变异系数,进行重复性分析。 结果 两种方法对肠道病毒U/CA16/EV71的检测结果一致性好,Cohen′s kappa值为0.889,95%置信区间（95%CI）为0.803~0.976;两种方法检测CA16的敏感性一致,常规方法检测EV71和U的敏感性略高于BD MAX方法;在CA16标本的检测中,常规检测方法变异系数CV（通用型）=1.07%、 CV CA16=0.62%,BD MAX方法CV（通用型）=1.63%、CV CA16=2.19%;在EV71标本的检测中,常规检测方法变异系数CV（通用型）=1.28%、 CV EV71=1.20%,BD MAX方法CV（通用型）=2.37%、CV EV71=1.73%。 结论 BD MAX全自动工作站检测结果较为准确,敏感性、重复性好,人工操作少,便于标准化推广,且耗时短,在小批量标本的病原检测及暴发疫情或应急检测中具备较好优势。