DNA芯片联合检测耐利福平与异烟肼结核分枝杆菌及其临床应用

目的 开发快速检测耐利福平与异烟肼结核分枝杆菌rpoB、katG、inhA基因突变的DNA芯片.方法 根据结核分枝杆菌rpoB、katG、inhA基因序列设计探针并制作基因芯片,从临床样品中分离出结核分枝杆菌的基因组DNA,PCR扩增含有上述几个基因突变位点的特异DNA片段,并事先在PCR引物的5′端作生物素标记,然后与膜条芯片上的检测特异突变位点的寡核苷酸探针进行杂交,通过生物素-链霉亲和素-过氧化物酶体系显色,直接观察突变情况,以此来判断耐药结果 .结果 35个利福平和异烟肼单耐药或多药耐药的结核分枝杆菌中有82.9%用芯片法检出的结果 与药敏培养法一致;其中利福平耐药样品突变检出率为100.0%;有20.0%异烟肼耐药的样品芯片未检出突变,可能是突变发生在芯片检测位点范围之外.结论 用DNA芯片检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性,具有较高的特异性和敏感性,可用于临床结核分枝杆菌耐药性检测.     

"AB液法"检测粪便隐血试验

目的 建立一种利用乙肝两对半ELISA试剂盒中的底物A液、B液来检测粪便隐血试验的新的实用的方法。方法 采用“AB液法”和滤纸法对临床100例患者进行对比试验，用单抗法做确证试验，并做AB液法的灵敏度试验。结果 在100例患者的对比试验中，AB液法与滤纸法均为阳性有43例，有7例标本AB液法检测结果为阳性，但滤纸法为阴性，使用单抗法验证此7例标本，结果均为阳性。AB液法可以检出粪便中含量为0．78μg/ml的Hb。结论 “AB液法”经济实用、操作简单、灵敏度高、特异性强、检测快速、显色稳定、结果易于判断、试剂稳定易保存，适合于粪便隐血的常规检查及应急检查，不失为一种临床上实用的粪便隐血试验。