玳玳果黄酮降脂提取物体内组织分布规律及特征研究

目的：建立UPLC-MS/MS分析方法同时测定玳玳果黄酮降脂提取物效应组分新橙皮苷和柚皮苷在大鼠10种脏器组织中含量，分布规律及特征。方法：采用UPLC-MS/MS技术建立提取物效应组分新橙皮苷及柚皮苷在大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、小肠、脂质、肌肉组织中的定量分析方法；大鼠给药后分别于0.33，0.67，1，4，8 h的5个时间点，分别摘取以上10种脏器组织，测定脏器组织及血液中效应组分的质量浓度，采用DAS（V 2.0）药动学软件对各样本的药物浓度-时间数据进行房室拟合，并计算不同组织效应组分的药-时曲线下面积（AUC）及平均滞留时间（MRT）。结果：所建立的UPLC-MS/MS定量分析方法具备良好的专属性、标准曲线及线性范围良好、方法准确度与精密度、定量下限均符合有关规定；玳玳果黄酮降脂提取物效应组分在血液中的分布符合一室模型，除肾脏及脑组织外，其余脏器中提取物效应组分的房室特征多为静脉注射的二室模型，柚皮苷在肾脏中的拟合结果为非静脉注射的二室模型，新橙皮苷在脑组织拟合结果为静脉注射的三室模型，给药后8 h各组织中效应组分新橙皮苷及柚皮苷AUC值大小顺序均为小肠 > 胃 > 肾 > 脂质 ≈ 脾脏 > 肺 > 肌肉 > 肝 > 心 > 脑，效应组分在各脏器中均无明显蓄积；效应组分在血液、肾脏、肝脏中的滞留时间较长，MRT均大于2 h，脂质最短，MRT不足1 h；各脏器中新橙皮苷的药-时曲线下面积约是柚皮苷的3倍，而心、肝、肾中则是3.5，2.1和3.4倍。结论：玳玳果黄酮降脂提取物效应组分在大鼠组织中分布迅速，达峰时间早于血液；效应组分在肠道内消除缓慢，给药8 h后在各脏器中的含量均显著下降且无特异的蓄积部位。研究结果揭示玳玳果黄酮降脂提取物效应组分在大鼠体内的分布特征及规律，为进一步理解玳玳果黄酮降脂提取物在体内的作用靶点及机制奠定了基础。     

三叶青藤茎叶药材饮片质量控制研究

目的 建立三叶青藤茎叶药材饮片质量控制方法.方法 采用薄层色谱法鉴别药材饮片;建立其砷盐、重金属杂质限量检查法以及水分、总灰分、酸不溶性灰分检测法;测定其浸出物含量;以异荭草苷为指标性成分,采用NaNO2-Al(NO3)3-NaO H比色法,在500 nm检测波长、优化显色反应条件,控制三叶青藤茎叶药材饮片中总黄酮含量.结果 3批三叶青藤茎叶药材饮片薄层色谱在对照物出现斑点的相应位置显相同颜色荧光斑点,且各成分分离良好;4批三叶青藤茎叶药材饮片水分测定结果为4.05%~6.77%,总灰分6.06%~7.25%,酸不溶性灰分0.64%~1.65%,水溶性浸出物16.00%~27.09%,醇溶性浸出物15.42%~27.07%,砷盐杂质限量<1 ppm,重金属杂质限量<10 ppm;建立的比色法在7.73~61.82μg/mL范围内线性关系良好,回归方程A=1.50×10-2 C-1.78×10-2(r=0.9996),4批三叶青藤茎叶药材饮片总黄酮含量20.83~21.50 mg/g.结论 所建立的薄层色谱鉴别、水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物及总黄酮含量测定法可作为三叶青藤茎叶药材饮片内控质量标准的参考依据.     

玳玳果降脂提取物中大孔吸附树脂有机残留量的顶空气相色谱分析研究

目的 建立检测玳玳果降脂提取物中大孔吸附树脂6种有机残留物含量的顶空气相色谱法. 方法运用顶空气相色谱法,采用DB-WAX石英毛细管色谱柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)、FID检测器、程序升温、不分流进样建立玳玳果降脂提取物中大孔吸附树脂6种有机残留物苯、甲苯、二甲苯、二乙烯苯、苯乙烯、正己烷含量测定法. 结果 建立的玳玳果降脂提取物中大孔吸附树脂6种有机残留物顶空气相色谱法,峰面积与浓度间均呈良好的线性关系(r=0.9943~0.9988),平均回收率及各组分检出量均符合规定. 结论 建立的玳玳果降脂提取物大孔吸附树脂有机残留量顶空气相色谱测定法,能实现同时测定苯、甲苯、二甲苯、二乙烯苯、苯乙烯、正己烷6种有机残留物含量,该方法准确度高、精密度、重复性好.     

叶下珠薄层色谱鉴别及福林酚法测定总多酚含量研究

目的:建立闽产叶下珠的薄层色谱鉴别法,考察比较叶下珠中总多酚含量测定法,优化测定条件。方法:采用聚酰胺薄层色谱法,选取叶下珠主成分没食子酸、柯里拉京、鞣花酸和芦丁为对照品,以冰醋酸-乙醇-乙酸乙酯-甲酸(8∶6∶2∶0.5)为展开剂,取出,晾干,喷以5%氯化铁乙醇溶液、晾干、显色。以峰形、灵敏度、显色稳定性以及准确度等为评价指标,考察普鲁士蓝法(PB法)与福林酚法(FC法)测定叶下珠中总多酚含量的方法适宜性,选定采用FC法作为叶下珠中总多酚的含量测定方法。通过单因素考察和L_9(3~4)正交试验,优化福林酚试剂的用量、碳酸钠溶液的浓度、显色时间和显色温度。结果:主成分斑点分离良好,供试品色谱中,在与对照品色谱相应位置上,显示相同颜色的斑点。测定叶下珠中总多酚含量的FC法最佳测定条件为1.0 m L样品提取液中加2.0 m L福林酚试剂,放置5 min,加3.0m L10%碳酸钠溶液,加水稀释至10 m L,摇匀,25℃显色1 h,760 nm波长处测定吸光度。结论:所建立的聚酰胺薄层色谱法及优选的总多酚含量测定福林酚法稳定可靠,可作为闽产叶下珠药材品质评价的方法。     

玳玳果黄酮降脂提取物4个效应组分的含量测定研究

目的 建立HPLC法同时测定玳玳果黄酮降脂提取物4个效应组分新橙皮苷、柚皮苷、橙皮内酯水合物、枳属苷的含量。 方法 采用高效液相色谱法,色谱柱Lichrocart C₁₈ 柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.2%醋酸水溶液为流动相; 程序洗脱; 检测波长284 nm; 流速1.0 mL/min; 柱温30 ℃; 进样量10 μL。外标法同时测定提取物效应组分新橙皮苷、柚皮苷、橙皮内酯水合物、枳属苷的含量。 结果 玳玳果黄酮降脂提取物新橙皮苷、柚皮苷、橙皮内酯水合物、枳属苷的质量浓度分别在76.365～1 491.482 μg/mL(r=0.999 4),49.155～1 024.283 μg/mL(r=0.999 7),5.134～61.151 μg/mL(r=0.999 5),1.771～40.962 μg/mL(r=0.999 8)范围内呈良好的线性关系; 平均回收率(n=6)分别为100.3%,102.2%,97.98%及95.16%; 相对标准偏差分别为1.50%,1.79%,1.70%及2.42%。结论 所建立的HPLC法同时测定提取物4个效应组分群含量的方法,可用于多指标定量监控玳玳果黄酮降脂提取物的质量。     

玳玳果黄酮降脂提取物体内效应组分排泄动力学研究

目的 建立同时测定大鼠尿液及粪便中提取物效应组分新橙皮苷和柚皮苷含量方法,研究大鼠口服玳玳果黄酮降脂提取物后的尿药排泄动力学及排泄特征。方法 采用UPLC-MS/MS建立效应组分新橙皮苷及柚皮苷在大鼠尿液及粪便的定量分析方法,计算口服玳玳果黄酮降脂提取物后不同时间点新橙皮苷及柚皮苷在尿液及粪便中的排泄率,并以亏量法计算尿液中的消除半衰期及消除速率常数,评价大鼠口服玳玳果黄酮降脂提取物后尿药排泄动力学及排泄特征。结果 所建立的UPLC-MS/MS定量分析方法专属性良好、标准曲线及线性范围良好,方法准确度与精密度、定量下限均符合有关规定,该方法能够满足大鼠尿液及粪便中效应组分的定量检测需要;口服72 h后,大鼠尿液中新橙皮苷、柚皮苷的平均累计排泄率分别为（1.76±0.76）‰和（1.39±0.57）‰;大鼠粪便中新橙皮苷、柚皮苷的平均累计排泄率分别为（52.45±6.30）%和（51.57±4.80）%;口服后效应组分新橙皮苷及柚皮苷在尿液及粪便中的排泄量分别在24~36 h和4~8 h达到峰值;72 h后仍有药物经尿液排泄,给药后24 h粪便累计排泄率便达坪值;亏量法计算得新橙皮苷消除速率常数为（0.080±0.021）·h^-1,消除半衰期为（9.41±3.22）h,柚皮苷消除速率常数为（0.077±0.017）·h^-1,消除半衰期为（9.51±2.97）h,新橙皮苷及柚皮苷的动力学参数间差异无统计学意义。结论 口服给药后效应组分原形即通过粪便较快地排出体外,粪便排泄是效应组分排出体外的主要途径,新橙皮苷及柚皮苷经尿液排泄的特征无明显差异。     

闽产三叶青地上部分提取物体内抗炎镇痛作用研究

目的 研究闽产三叶青地上部分提取物体内抗炎镇痛作用。方法 分别采用低、中、高剂量的闽产三叶青地上部分提取物,抗炎作用实验以二甲苯致小鼠耳肿胀急性炎症模型并以醋酸泼尼松为阳性药、角叉菜胶致大鼠足肿胀急性炎症模型并以醋酸地塞米松为阳性药、大鼠棉球肉芽组织增生慢性炎症模型并以醋酸地塞米松为阳性药,镇痛作用实验以化学刺激法（扭体法）及热刺激法（热板法）并以罗通定为阳性药。结果 与模型组比较,闽产三叶青地上部分提取物中、高剂量组及粗提物组对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用（依次为P < 0.05,P < 0.01,P < 0.05）,耳肿胀抑制率分别为22.86%,38.79%,20.62%;提取物中、高剂量组及粗提物组对角叉菜胶致大鼠足肿胀急性炎症有明显的抑制作用（P < 0.05或P < 0.01）;提取物低、中、高剂量组及粗提物组均能显著减少大鼠棉球肉芽组织增生慢性炎症模型中大鼠肉芽肿的重量（依次为P < 0.05,P < 0.01,P < 0.01,P < 0.01）,其抑制率分别为28.12%,46.41%,59.58%,44.50%。与模型组比较,在60,90 min,提取物高剂量组能有效提高小鼠的痛阈值延长率（P < 0.05,P < 0.01）,痛阈值延长率最高达65.58%;提取物中、高剂量组及粗提物组能有效抑制醋酸致痛的小鼠扭体次数（依次为P < 0.05,P < 0.01,P < 0.05）,小鼠扭体潜伏期明显延长（依次为P < 0.05,P < 0.01,P < 0.05）,扭体次数明显减少（依次为P < 0.05,P < 0.01,P < 0.05）,镇痛抑制率最高达51.80%。结论 闽产三叶青地上部分提取物具有明显的体内抗炎镇痛作用。     

玳玳果降脂提取物急性毒性试验研究

目的观察玳玳果降脂提取物小鼠急性毒性,初步评价其用药安全性。方法取40只体质量24~29 g昆明种小鼠,随机分成给药组与空白组各20只,雌雄各半,选用最大耐受量(MTD)法试验。给药组按玳玳果降脂提取物可以灌胃的最大浓度(0.8 018 g/m L)及小鼠可承受的最大体积(0.4 m L/10 g)一次性口服灌胃,空白组蒸馏水(0.4 m L/10 g)灌胃。灌胃给药1次,连续观察14 d,记录小鼠的毒性反应、死亡情况。结果无法得出玳玳果降脂提取物LD50;给药后连续观察14 d,小鼠未见中毒反应,无动物死亡;给药14 d后解剖小鼠,肉眼未见脏器异常;脏器指数评价,2组比较无显著性差异(P>0.05)。结论小鼠灌胃给药最大耐受剂量为32.07 g/kg,相当于临床成人日用量的285.07倍,提示玳玳果降脂提取物口服毒性小,临床剂量下用药安全     

3种屏南产菝葜、重楼、黄精药材的品质分析

目的鉴别屏南产菝葜、重楼、黄精3种药材,检测黄精药材多糖含量,评价3种药材的品质。方法根据《中华人民共和国药典2015年版（一部）》相关规定对3种药材进行薄层色谱鉴别以及黄精药材含量测定。结果屏南菝葜药材供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;屏南重楼供试品色谱中,与对照药材色谱的相应位置在主成分含量上表现出差异;屏南黄精供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;建立了黄精多糖含量的UV测定方法,以无水葡萄糖为对照品在3.3420.05μg/m L范围内线性关系良好,回归方程为A=4.47×10-2C-5.64×10-2（r=0.999 2）。结论建立了3种薄层色谱鉴别方法以及黄精多糖含量测定的分析方法,为3种药材的品质评价及质量分析提供了实验依据。     

闽产薏苡种皮油的提取工艺研究

目的优化闽产薏苡种皮油正己烷最佳提取工艺。方法以薏苡种皮油提取率为评价指标,通过单因素与正交试验考察原料粉碎度、料液比、提取时间、提取温度对薏苡种皮油提取率的影响。结果最佳提取条件为原料粉碎度60目,料液比1∶8,提取时间120min,提取温度65℃。经验证,3批薏苡种皮油的提取率分别为14.27%、14.67%、13.40%。结论闽产薏苡种皮油的最佳提取工艺简便可行,结果稳定。