CD41-42突变型β地中海贫血重组载体pEGFP-C2-CD41-42的构建及其稳定转染HeLa细胞模型的建立

目的：构建CD41-42突变型β地中海贫血重组载体pEGFP-C2-CD41-42和HeLaCD41-42细胞模型,为β地中海贫血CD41-42突变型细胞、小鼠模型建立及进一步基因治疗提供依据。方法：在β地中海贫血CD41-42突变的纯合子患者外周血中提取DNA,PCR法扩增含有βCD41-42的β-珠蛋白基因片段。将PCR产物βCD41-42珠蛋白基因克隆到pEGFP-C2载体中,用脂质体2000将pEGFP-C2-βCD41-42质粒转染HeLa细胞,观察转染后βCD41-42在HeLa细胞中荧光表达情况。RT-PCR法检测βCD41-42在HeLa细胞中的表达。结果:重组质粒pEGFP-C2-βCD41-42转染HeLa细胞24 h后细胞发出绿色荧光,G418筛选后,有大量荧光表达。RT-PCR扩增得到227 bp的特异性条带,而稳定转染pEGFP-C2空质粒的HeLa细胞中不表达特异性条带。结论: 成功构建β地中海贫血pEGFP-C2-βCD41-42突变基因重组载体,并成功构建HeLaCD41-42细胞模型。     

模拟教学法与妇产科见习

模拟医学教育是目前国际医学教育界正在推行的一种全新教育模式,在很多发达国家,已广泛开展借助各类仿真模型、综合模拟病人救治系统以及虚拟教学培训系统培训临床操作技能。妇产科学临床见习因其特殊性、教学资源缺乏、患者不配合等因素,使临床见习面临极大困难,妇产科模型及模拟人以其完备的功能、人性化的使用方式、时间上的方便性、使用上的可调节性和可重复性、允许出错但对病人无任何风险等优势为妇产科临床见习提供了很大的帮助,成为新的医疗形势下临床实践性教学的新途径[1]。1目前妇产科见习课的困难和问题1.1教学资源短缺:由于妇产科临床操作主要在女性生殖器官局部进行,其解剖部位和疾病种类都具有显著的特殊性,患者一般不愿意让学生检查,尽管教师努力加强与患者沟通,有些患者仍然无法接受甚至对带教老师都具有排斥心理。近几年来,很多妇产科见习课都无法在临床实践完成,只能通过课堂讲解、挂图、幻灯、多媒体课件、教学录像等方法提高教学效果。另外,学生数量多,医院病人相对数量较少,教学资源的供需失衡,学生临床实习机会更少。1.2抽象知识难以理解:由于妇产科学的特殊性,即使可以做到在病人身上示教、练习、操作,由于知识的抽象性,学生仍无法完全领会实习内...     

β-地中海贫血CD41-42型突变基因重组载体的构建

目的:构建β-地中海贫血CD41-42突变基因和基因调控区HS2、HS3全基因片段的真核表达重组载体,为β-地中海贫血CD41-42突变基因治疗的细胞模型奠定基础.方法:设计合成β-地中海贫血CD41-42突变纯合子患者的DNA特异性引物,扩增基因座控制区(LCR)和CD41-42突变基因,插入载体peDNA3.1-中,筛选阳性重组体,通过酶切分析及PCR进行鉴定.结果:扩增出2.1 kb CD41-42突变基因及5.5 kb LCR片段,酶切及测序结果证明重组载体构建成功,测序结果和引入方向正确.结论:成功构建了含人β-地中海贫血CD41-42基因的重组载体.     

抗逆转录病毒药物暴露对子代造血及免疫系统和生长发育的潜在影响

ARV已经改变HIV流行的自然史。ARV暴露对孕妇、胎儿和婴儿的潜在风险依赖于暴露的时间、数量和药物的类型。潜在的不利影响还需要进一步和长期监测，因为他们很可能是罕见的、在童年以后发生。现在有迫切需要更好地了解对于HIV未感染儿童长期暴露在HIV和ARV的后果，以有助于改善监测和管理潜在的不利影响。本文回顾现有的文献，描述宫内、产时、产后ARV暴露可能会对孩子造血系统和免疫系统潜在的影响。     

妇产科临床见习中存在的问题及对策

妇产科学是一门专业性、实践性很强的临床学科,临床见习是培养合格医生的一个关键环节,是由学生到医生角色转变的桥梁。临床见习教学质量的好坏,直接影响着学生对妇产科理论知识与临床技能的学习和掌握。而现代社会随着医患关系紧张,人民群众维权意识的增强,临床实践技能训练的机会越来越少,严重影响学生对知识与临床技能的学习和掌握。如何培养高质量的临床医生,值得每一位从事妇产科临床教学的工作者深思。     

地中海贫血的分子机制及基因治疗的新进展

β-地中海贫血是由于β-珠蛋白链合成障碍导致β-珠蛋白生产减少的遗传性疾病。目前国内外对地中海贫血治疗分为产前诊断、规范性长期输血和去铁治疗〔1〕、HLA相合的造血干细胞移植〔2〕和脾切除术等。输血治疗存在铁负荷导致的并发症,骨髓移植则一直无法摆脱免疫排斥和移植抗宿主病的并发症,而造血干细胞具有重建个体造血系统的全能性和自我更新的能力,理论上将正常的β-珠蛋白基因导入造     

妊娠糖尿病对疾病及母婴结局的影响分析

目的:观察妊娠合并糖尿病对疾病及母婴健康的影响。方法:回顾性分析410例妊娠期高血压的孕妇临床资料,根据妊娠期间血糖控制好坏分为观察组与对照组。观察患者妊娠以及新生儿情况。结果:观察组孕妇在妊娠期高血压综合征、羊水过多、胎膜早破、感染发生等妊娠并发症情况方面均明显低于对照组(P<0.01)。新生儿低血糖、巨大儿、宫内窘迫、头颅B超异常发生率,观察组亦低于对照组(P<0.01)。结论:血糖水平能够直接影响孕妇妊娠并发症以及新生儿疾病,因此早期进行降糖治疗十分重要。     

子痫前期血清诱发血管内皮细胞凋亡机制的实验研究

目的：探讨子痫前期患者血清对体外生长血管内皮细胞凋亡情况的影响及发生机制.方法：对血管内皮细胞进行体外培养,分别加入正常孕妇血清和重度子痫前期患者血清,采用流式细胞术检测血管内皮细胞凋亡率、半胱天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）活性,并在培养体系中加入阳离子染料JC-1后检测血管内皮细胞线粒体跨膜电位变化.结果：①子痫前期血清组诱导血管内皮细胞早期凋亡阳性率与晚期细胞凋亡阳性率分别为（10.8±3.2）％与（6.8±1.8）％,明显高于正常孕妇血清组的早期凋亡阳性率与晚期细胞凋亡阳性率（4.2±1.7）％与（3.3±1.1）％（P＜0.05）;②子痫前期血清组诱导血管内皮细胞Caspase-3阳性率为（8.3±1.2）％,明显高于正常孕妇血清组诱导血管内皮细胞Caspase-3阳性率（3.6±1.1）％（P＜0.05）：③子痫前期血清组诱导血管内皮细胞其线粒体损伤率为（8.9±2.1）％,明显高于正常孕妇血清组诱导血管内皮细胞的线粒体损伤率（3.0±0.8）％（P＜0.05）.结论：子痫前期患者血清可促进体外生长血管内皮细胞的凋亡,Caspase-3和线粒体凋亡在子痫前期患者血清促血管内皮细胞凋亡中可能起重要作用.     

两种不同HAART方案对HIV母婴传播及孕妇、新生儿免疫和造血功能影响的对比研究

目的:研究高效抗逆转录病毒治疗(HAART)方案预防HIV母婴传播的安全性和有效性,探讨两种不同HAART方案对妊娠结局,以及孕妇和胎儿造血、免疫功能的影响。方法:将71例HIV感染孕妇按HAART方案分为含齐多夫定组(AZT组)40例、不含AZT组31例。选取40例健康孕妇为对照组。HIV阳性孕妇自妊娠14周开始抗病毒治疗,AZT组的HAART方案为AZT+拉米夫定(3TC)联合克力芝(LPV/r)或依非那仑(EFV)或奈韦拉平(NVP),不含AZT组为替诺福韦(TDF)+3TC联合LPV/r或EFV或NVP。采集抗病毒开始治疗时和分娩前孕妇肘静脉血、脐带血,测定血细胞参数和CD4~+、CD8~+T淋巴细胞。收集并分析孕妇和新生儿的基本信息,婴儿出生后4~6周及4个月进行HIV-1-DNA核酸测定。结果:分娩前,与正常对照组比较,AZT组孕妇的RBC、Hb、HCT、N降低,MCV、MCH、RDW增高(P0.05)。与不含AZT组比较,AZT组的RBC、L降低,MCV、MCH、RDW增高(P0.05)。各组间WBC和PLT比较无统计学差异(P0.05)。3组孕妇的轻度贫血发生率比较,差异无统计学意义(P0.05);AZT组孕妇的中度贫血发生率高于其他两组(P0.05)。与对照组比较,AZT组新生儿脐带血中RBC、Hb、HCT、N显著降低,MCV、MCH、RDW、L、PLT显著增高(P0.05)。两HAART组相比,AZT组新生儿脐带血中RBC、Hb、HCT显著降低,但MCV、RDW显著增高(P0.05)。各组间WBC无统计学差异(P0.05)。HAART暴露的两组新生儿轻度贫血发生率较对照组高(P0.05);AZT组新生儿轻度、中度贫血较不含AZT组更多见(P0.05)。结论:长疗程HAART治疗后,HIV母婴传播率0.3%,孕期HAART治疗安全、有效。孕期采用长疗程含AZT的HAART方案有助于孕妇的免疫重建;孕期含AZT的HAART暴露导致孕妇及新生儿巨幼红细胞性贫血和中性粒细胞减少,新生儿血小板增多。