肺结核患者血清外泌体中差异表达的微小RNAs及其功能分析

目的:探究肺结核患者血清外泌体中差异表达的微小RNAs(miRNAs)及其功能。方法:分子排阻法和超滤离心法提取纯化实验组及对照组血清外泌体,粒径检测、透射电镜和Western blot进行鉴定,miRNeasy Micro Kit提取外泌体总RNA;Illumina HiSeq2500高通量测序检测miRNAs表达谱;生物信息学分析实验组和对照组差异表达的miRNAs并预测其靶基因及其靶基因潜在功能。结果:分子排阻和超滤离心获得的微囊泡直径为30～100 nm、形态完整、球形、大小较为均一,表达蛋白TSG101、HSP70、CD63、Calnexin无表达。高通量测序分析显示,实验组显著差异表达的miRNAs共63个,其中32个上调表达,31个下调表达。GO富集分析显示差异表达的miRNAs靶基因生物学过程方面主要富集于细胞组织代谢,细胞组分方面主要富集于细胞器和细胞质,分子功能方面主要富集于催化活性、核酸结合转录因子活性。KEGG富集分析显示差异表达的miRNAs可显著富集于肾素-血管紧张素系统(RAS)、转化生长因子(TGF)、环腺苷酸单磷酸-蛋白激酶A(cGMP-PKG)等信号...     

Bcl-2/Bax基因在辛伐他汀诱导K562细胞凋亡时的表达变化

目的观察辛伐他汀诱导K562细胞凋亡时Bcl-2/Bax变化,探讨Bcl-2/Bax与细胞凋亡之间关系。方法 20μmol/L辛伐他汀处理K562细胞24、48和72h;流式细胞技术检测细胞凋亡率;免疫组织化学法检测细胞色素C,RT-PCR技术检测Bcl-2/Bax基因。结果 20μmol/L辛伐他汀作用K562细胞24、48和72h,细胞凋亡率变化分别是（6.1±0.4）%,（14.2±0.4）%,（30.7±0.6）%;胞浆内细胞色素C显著高于对照组（P〈0.05）;抑凋亡基因Bcl-2显著降低,促凋亡基因Bax显著升高（P〈0.05）。结论辛伐他汀能诱导K562细胞凋亡,Bcl-2/Bax比值降低可能是辛伐他汀诱导K562细胞凋亡机制之一。     

15例新型冠状病毒肺炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化及临床意义

目的 分析新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者外周血白细胞分类及T淋巴细胞亚群的变化特征.方法 以收治的11例COVID-19确诊病例轻型/普通型患者(轻型/普通型COVID-19组)、4例重型/危重型患者(重型/危重型COVID-19组)、27例疑似病例(疑似组),22名健康体检者(对照组)为观察对象,回顾性分析...     

辛伐他汀诱导K562细胞凋亡及对细胞内活性氧和Ca2+动态变化的影响

目的研究辛伐他汀诱导人红白血病细胞株K562细胞凋亡及细胞内活性氧与Ca2+水平的变化,以探讨凋亡机制.方法20 μmol·L-1辛伐他汀处理K562细胞,24 h 后光镜观察细胞形态;流式细胞术检测细胞凋亡率、活性氧和细胞内游离Ca2+水平.结果20 μmol·L-1辛伐他汀作用K562细胞 48 h 后出现核固缩、核碎裂和凋亡小体等形态学改变;AnnexinV-FITC/PI检测细胞早期凋亡率,处理组凋亡率高于对照组,随药物作用时间延长逐渐增大,具有时间依赖性.荧光染料2',7'-二氯荧光乙酰乙酸(2',7'-dichloro fluorescein diacetate, DCFH-DA)检测K562细胞内活性氧,不同时间处理组与对照组比较活性氧均升高,峰值时间为 24 h,与对照组比较发生显著改变.荧光染料Fluo-3AM检测K562细胞内游离Ca2+浓度,不同时间细胞内游离Ca2+浓度均升高,峰值时间为 12 h,与对照组比较发生显著变化.结论辛伐他汀诱导K562细胞凋亡的可能机制是通过提高细胞内活性氧及游离Ca2+水平,从而导致细胞凋亡.     

矿物粉尘与大肠埃希菌相互作用机制的研究

目的研究来自全国各地的4种天然及4种人工矿物粉尘与大肠埃希菌作用的机制。方法分析天然矿物粉尘物理组成及8种粉尘主要化学成分，观察矿物粉尘与大肠埃希菌作用16h后测定大肠埃希菌数量、培养基pH值、培养基14种主要元素及葡萄糖（GLU）、丙酮酸含量以及β半乳糖苷酶的活力变化。结果4种天然矿物粉尘物理组成基本一致，8种矿物粉尘所含化学成分不同；与细菌作用后元素溶出也不完全相同；含钙（ca）高的水泥粉尘以及来含镁（Mg）高的水镁石能使大肠埃希菌数量、丙酮酸含量和B半乳糖苷酶的活力增高并增加大肠埃希菌对GLU的利用。结论含Ca或Mg高的碱性矿物粉尘可能促进大肠埃希菌的生长代谢。     

自然降尘与人体两种正常细菌的近尺寸作用分析

目的分析不同地区5种自然降尘与大肠埃希菌、表皮葡萄球菌的近尺寸作用。方法选取5种不同性质的大气粉尘(FC-1#、FC-2#、FC-15#、FC-18#、FC-21#),对其特性、粒径及粒度参数、主要化学成分进行分析,观察其与大肠埃希菌、表皮葡萄球菌相互作用后各培养液的细菌数、p H值、葡萄糖(GLU)消耗及Mn、Pb、Fe、Si等元素变化,以及细菌形态。结果 FC-1#含有较多的Ca O;FC-2#、FC-15#、FC-18#、FC-21#含有较高Si O2;FC-1#、FC-15#烧失量(LOI)高于其他降尘。自然降尘颗粒直径为0.3~1μm。大肠埃希菌、表皮葡萄球菌与5种自然降尘相互作用后,与未作用者比较,FC-1#、FC-21#菌落数均增加,GLU消耗均降低,p H值均增加,P<0.05或<0.01。大肠埃希菌与FC-1#作用后Fe、Ca、Ni、Si、Al溶出增加,与FC-2#作用后仅Al溶出增加,与FC-15#作用后Fe、Ca溶出增加,与FC-18#、FC-21#作用后Ca溶出增加,P<0.05或<0.01;表皮葡萄球菌与FC-1#作用后Ca、Mg、Ni、Si、Al溶出增加,与FC-2#作用后仅Al溶出增加,与FC-15#作用后Ca、Al溶出增加,与FC-18#作用后Ca、Mg溶出增加,与FC-21#作用后Ca溶出增加,P均<0.01。细菌形态结果表明,降尘颗粒的形状不规则性增加了其与细菌间的膜界结合程度。结论 Ca含量高的碱性自然降尘对大肠埃希菌、表皮葡萄球菌的生长有促进作用;自然降尘颗粒越小,越容易与菌体结合。     

一氧化氮信号在辛伐他汀诱导K562细胞凋亡过程的作用

目的:观察一氧化氮(Nitric oxide,NO)信号在辛伐他汀(Simvastain)诱导K562细胞凋亡过程中变化,推测一氧化氮信号与K562细胞凋亡之间关系.方法:20μmol/L辛伐他汀处理K562细胞24、48和72 h;流式细胞技术检测细胞凋亡率;比色法测定K562细胞内总一氧化氮浓度;RT-PCR检测诱导型一氧化氮合成酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)基因;一氧化氮抑制剂和20μmol/L辛伐他汀共同培养,观察不同时间细胞凋亡率.结果:与对照组比较,24、48 h和72h处理组细胞凋亡率增加6.1%±0.4%,14.2%±0.4%,30.7%±0.6%,差异具有显著性;不同时间处理诱导性一氧化氮基因均显著上调;处理组细胞内总一氧化氮浓度增加为(0.3±0.1)mg/ml,(2.8±0.2)mg/ml.(3.8±0.4)mg/ml,与对照组比较显著升高;一氧化氮抑制剂能显著降低处理组细胞凋亡率.结论:辛伐他汀能诱导K562细胞凋亡,细胞内升高的一氧化氮浓度可能是辛伐他汀诱导K562细胞凋亡的信号机制之一.     

绵阳市肺结核流行病学调查研究

目的了解绵阳市疑似肺结核患者的痰涂片和痰培养中结核分枝杆菌的阳性检出率情况。方法收集经胸片复查后疑似活动性肺结核患者的痰进行涂片和培养,并对检测出的结果进行比较分析。结果在747份痰直接涂片标本中,男性阳性率为0.67%,女性阳性率为0.27%,阳性检出率为0.94%,但差异无统计学意义(P0.05);而596份酸性罗氏培养基中,男性阳性率为3.85%,女性阳性率为0.34%,痰培养阳性检出率为4.19%,差异有统计学意义(P0.05)。结论绵阳市肺结核患病率低于全国,男性患病率高于女性。     

7680例输血前传染性标志物的检测分析

目的了解血源性疾病的传播情况,提醒医务人员加强自我保护意识。方法对7680例输血患者的输血前标本采用时间分辨免疫荧光法进行乙型肝炎病毒表面抗原的检测;酶联免疫吸附法检测丙型肝炎病毒抗体与艾滋病病毒抗体;血清凝集法检测梅毒抗体。结果 4项检测指标中HBsAg感染率居首位,阳性率为8.98%;HCV感染率为0.65%,HIV感染率为0.20%;本次检测梅毒的阳性率为1.25%。男性乙型肝炎表面抗原感染率高于女性(P<0.05),其他3项检测结果性别之间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论受血者进行输血前4项指标检测对预防和减少因输血引起的医疗纠纷具有重要临床意义。     

矿物尘粒对大肠埃希菌作用的体外研究

目的 研究来自全国各地的含硅矿物尘粒对大肠埃希菌生长、代谢产物、酶及形态的影响，从而探讨矿物尘粒对大肠埃希菌作用的机制。方法 分析矿物尘粒主要物理组成及化学成分，测定大肠埃希菌数量、培养基pH值、钙离子（Ca^2＋）、镁离子（Mg^2＋）、葡萄糖（GLU）、丙酮酸的含量、β-半乳糖苷酶的活力，扫描电镜观察大肠埃希菌的形态变化。结果 矿物尘粒物理组成基本一致，化学成分各不相同；含Ca^2＋或Mg^2＋高的矿物尘粒能使大肠埃希菌数量、丙酮酸含量增加，使β-半乳糖苷酶的活力增强，并能增加大肠埃希菌对GLU的利用；各矿物尘粒均可引起大肠埃希菌形态的变化。结论 含Ca^2＋或Mg^2＋高的矿物尘粒能促进大肠埃希菌的生长代谢。