慢淋、慢淋伴幼淋细胞增多及毛细胞白血病的临床、形态学和免疫学表型分析

目的：探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)、慢淋伴幼淋细胞增多症(CLL／PL)及毛细胞白血病(HCL)免疫表型特点。方法：应用单克隆抗体(McAb)对45例淋巴细胞白血病进行免疫表型检测，并观察其形态学特点。结果：45例患者中，B—CLL42例(包括5例B-CLL／PL)，T—CLL2例，B细胞型毛细胞白血病(B—HCL)1例。男性患者与女性患者之比为2．3：1，B—CLL与T—CLL之比为20：1。B—CLL患者显示有T-淋系抗原CD5^ ，T—CLL可分别表达CD4^ CD8^-及CD8^ CD4^-，1例B—HCL显示典型的B-淋系抗原阳性，同时免疫电镜淋巴细胞为毛状突起。结论：B—CLL CD5、CDl9、CD20、HLA-DR较特异；B—CLL／PL CD20、CD22、SmIg有一定参考价值；B—HCL除B淋系抗原可表达阳性外，CD25^ 、CD5^-最有诊断鉴别意义;T—CLL可呈现多样性T-淋系免疫标记。免疫表型分析有助于区别T、B—CLL、幼淋及HCL．     

异基因外周血干细胞移植治疗重症再生障碍性贫血

目的 :探讨异基因外周血干细胞移植 (allo- PBSCT)治疗重症再生障碍性贫血的疗效。方法 :患者诊断为重症再生障碍性贫血 ,预处理方案为大剂量环磷酰胺 (CTX) 全身照射 (TBI) ,用粒细胞集落刺激因子 (G- CSF)连续 5 .5 d对供者进行外周血干细胞动员后分 2天采集单个核细胞 ,并于采集当日由静脉输给患者 ,移植后给予预防移植物抗宿主病 (GVHD)措施。 结果 :患者迅速恢复造血功能 ,于 0 d血小板≥ 2 0× 10 9/ L, 14d白细胞 >1.0× 10 9/ L。 14d骨髓增生活跃 ,性染色体核型转变为供者型 (46 ,XY) ,随访至今不变。结论 :allo- PBSCT是治疗重症再生障碍性贫血的有效手段。     

大鼠脂肪源干细胞的生物学特性及其对大鼠造血干/祖细胞体外扩增影响的研究

成体干细胞的研究目前以造血干细胞和骨髓间充质干细胞(BMSC)为主,但取材困难,获得率低等不利因素使其临床应用受限.继BMSC之后,脂肪源干细胞(ADSC)成为当今干细胞研究领域的又一热点,美国的ZUK及日本的Mizu-no等研究小组对此做了深入研究并取得了一定的进展.     

慢性淋巴细胞白血病中FISH的应用及与其他指标相关性的分析

目的：运用荧光原位杂交（FISH）技术检测慢性淋巴细胞白血病（CLL）细胞遗传学的异常与其他预后指标相关性的分析。方法回顾性分析47例已经确诊的患者进行间期荧光原位杂交技术检测。应用着丝粒探针CSP12（＋12）和序列特异性探针ATM（11q22．3）、RB1（13q14）、P53（17p13,1）进行间期荧光原位杂交检测。同时分析FISH检测出的遗传学异常与其他检测指标的相关性。结果47例患者中有8例（17．02％）患者通过常规染色体显带技术（CC）检测到细胞遗传学异常,10例未见中期分裂相,但应用FISH检测此类样本有6例发生染色体改变,余29例为正常核型。17p-有2例（4．25％）,13q-有19例（40．42％）,11q-有4例（8．5％）,12-三体有6例（12．77％）,复杂细胞学异常有5例（10．64％）,13q-合并11q-有2例,13q-合并12-三体有2例,17p-合并13q-有1例。将正常核型和13q-分到低危组,12-三体分到中危组,11q-、17p-和复杂细胞学异常分到高危组,CD38在高危组的分布较低危组高,IgVH在低危组的分布较高危组高,差异有统计学意义（P＝0．012vs．P＝0．013）。年龄、β2微球蛋白、ZAP-70、Rai分期在预后不同的染色体中分布无差异。结论（1）FISH技术在检测CLL染色体异常方面检出率较CC高;（2）FISH检测出的染色体异常与CD38、IgVH的分布具有一致性。     

慢性淋巴细胞白血病患者骨髓中CD200表达及与预后的关系

目的初步探讨慢性淋巴细胞性白血病(CLL)患者骨髓中CD200的表达及其与免疫表型、染色体核型的关系和与预后相关性。方法采用流式细胞术检测40例初诊CLL患者骨髓中CD200的数量。以CD19+CD200+表达低于50%为CD200low组(18例),大于或等于50%的为CD200high组(22例)。结果 CD200low组(18例)年龄、男性人数、初次白细胞(WBC)数量、初次淋巴细胞(LY)数量、初次LY%、淋巴结发生率显著低于CD200high组(22例)(P0.05);CD200low组初次血红蛋白(HB)量高于CD200high组(P0.05)。CD200low组CD19+、CD19+CD23+、CD19+CD160+抗原表达的平均百分数及Zeta链相关蛋白-70(ZAP-70)阳性率明显低于CD200high组(P0.05)。Binet分期中,CD200low组A期概率多于CD200high组,CD200high组大部分处于C期,差异有统计学意义(P0.05)。Rai分期中,CD200low组患者大部分处于Ⅰ期,CD200high组大部分处于Ⅲ期,差异有统计学意义(P0.05)。结论 CD200对诊断疾病、预后判断、实施个体化治疗、延长患者生存期等具有重要意义。     

新疆汉族HLA-DRB1基因多态性与再生障碍性贫血的相关性

目的探讨人类白细胞抗原(HLA)DRB1与再生障碍性贫血(AA)的相关性。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)DNA分型技术对43例新疆汉族AA患者(AA病例组)和200例新疆汉族人群作为健康对照者(健康对照组)进行HLA-DRB1基因分型,研究HLA-DRB1基因多态性与新疆汉族AA患者的相关性。结果 AA病例组和健康对照组的等位基因频率有相同之处,均表现为DRB1*15表达最高,同时DRB1*4、DRB1*7、DRB1*9、DRB1*12表达均较高,频率最低的均为DRB1*17;AA病例组中DRB1*8等位基因频率(13.73%)显著高于对照组(6.99%),差异有统计学意义(OR=2.202,P0.05);AA病例组DRB1*12、DRB1*14等位基因频率低于对照组,差异无统计学意义。其中AA病例组女性等位基因DRB1*12(5.41%vs 10.00%,OR=0.2079,P0.05)和AA病例组男性DRB1*14等位基因频率(2.11%)显著低于对照组(7.53%),差异有统计学意义(OR=0.1403,P0.05);AA病例组女性DRB1*15等位基因频率(27.45%)显著高于对照组(14.56%),差异有统计学意义(OR=2.433,P0.05)。结论 DRB1*08可能是AA患者的易感基因;DRB1*12可能是女性AA患者拮抗基因;DRB1*14可能是男性AA患者的拮抗基因;DRB1*15可能是女性AA患者的易感基因。     

转录因子SOX4在急性髓系白血病中的表达水平及临床意义

目的:研究SOX4基因在急性髓系白血病(AML)中的表达水平及其与临床特征和预后之间的相关性,以探讨其在急性髓系白血病中的作用。方法:采用实时定量PCR方法检测96例初发AML患者及26例健康对照组骨髓白细胞SOX4基因的表达水平,分析其与临床特征、预后之间的相关性。结果:96例AML患者中SOX4的表达水平明显高于健康对照组(P=0.001),在M1-M5各型患者中SOX4基因表达水平无明显差异(P=0.258)。SOX4基因表达水平在不同性别、不同民族的表达情况及化疗1个疗程后缓解与否等临床特征之间无明显差异(P值均 0.05)。AML患者SOX4基因表达水平与白细胞计数、血红蛋白水平、血小板计数、原始细胞比例、网织红细胞计数等实验室指标无明显相关性(P 0.05),其与患者的总生存率OS(P=0.003)及无事件生存率EFS(P=0.023)相关。结论:SOX4基因高表达影响患者的生存率(OS、EFS),推测有可能为AML患者不良预后因素之一。     

疝环充填式无张力修补术临床应用观察

在传统的腹股沟疝修补术中，较多术式均存在术后局部张力较高的问题，且术后复发率高达10％～15％。1993年欧美等西方国家开始采用疝环填充式无张力修补术修补腹股沟疝，较好的解决了上述问题。2000-2003年，我院采用此术式治疗腹股沟疝30例，并与采用传统术式治疗的32例进行了比较。现报告如下。     

异基因外周血干细胞移植供受者嵌合体形成的动态检测

目的：建立荧光标记的多重扩增短串联重复序列（STR）结合毛细管电泳定量检测异基因外周血干细胞移植（allo-PBSCT）供受者嵌合体的方法,并探讨嵌合体形成与免疫耐受及临床预后的关系。方法：采用PE9700扩增仪扩增15个STR位点：D8S1179、D21S11、D7S820、D3S1358、CSFIPO、TH01、D13S317、D16S539、D2S1338、D19S433、VwA、TPOX、D18S51、D5s818、FGA位点和1个性别位点Amelogenin,应用3130XL型DNA测序仪对35例异基因外周血干细胞移植患者上述位点进行基因型分析,并比较供受者移植前后的基因型,确定嵌合体的形成类型,以作为异基因造血干细胞移植中的植活证据,同时用无关个体的DNA混合实验进行可行性和准确性研究。结果：（1）其中32例在15个STR位点中均至少有两个可以区分供受者的有信息位点（有3例无移植前受者标本）,35例患者均在移植后1个月时STR位点及性别位点转为供者型,形成了完全供者嵌合体（CC）,且HLA单倍体相合的15例患者也达到了100％的供者植入,并在随访过程中持久不变。（2）扩增产物中供受者DNA含量的百分比同扩增前混合样本的比例呈显著直线相关（P〈0．01）,最小检出DNA百分比为5％。结论：（1）用基因分析仪对STR位点进行基因型检测具有快速、无污染和自动化高、可定量及灵敏度高等优点,用于检测allo—PBSCT植活状态是可靠的。（2）诱导免疫耐受的方法可以成功地诱导CC的形成。     

急性白血病的形态、细胞化学、免疫分型及MPO mRNA表达

目的:进一步了解急性白血病 ( AL)形态、细胞化学、免疫分型及髓过氧化物酶基因 ( MPO m RNA)表达。方法:采用细胞形态学、细胞化学染色、间接免疫荧光法和链亲和素 -胶体金原位杂交法对 137例 AL 患者进行分型。结果 :4 1例急性淋巴细胞性白血病 ( AL L)中有 5例表达髓系抗原 ,7例 MPO m RNA表达为阳性 ;91例急性髓系白血病 ( AML)中有 8例表达淋系抗原 ,所有髓系均不同程度的表达 MPO基因。 5例为 FAB不能分类的 AL( U AL) ,其中 1例表达淋系抗原 ,2例表达髓系抗原 ,3/ 5例 MPOm RNA为阳性。 结论 :联合分析 AL 形态学、细胞化学、免疫学及 MPO m RNA表达等特点 ,对于 AL 的诊断和指导治疗均有重要意义。此分型弥补了 FAB分类法的不足