HRSV A2株细胞低温传代适应减毒指标的初步探索

[目的]分析人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,HRSV)经人二倍体KMB17细胞低温传代后培养特性的改变.[方法]将HRSV A2株病毒接种到人二倍体KMB17细胞进行低温培养传代,将不同代次的病毒经鼻腔接种豚鼠,于d 7、d 14分别取肺组织作病理切片检查、分离血清进行中和抗体检测,同时测定不同代次病毒的一步生长曲线及温度敏感性特征.[结果]豚鼠经鼻腔接种,接种原代病毒组d 14处死时体重明显较对照组轻,低温第6代组和11代组与对照组接近,3组病毒均引发豚鼠间质性肺炎.低温第6代组和11代组与原代病毒相比,一步生长曲线未发生明显改变,增殖高峰约为9-12 d.[结论]HRSV经鼻腔接种豚鼠能引起强烈的肺部感染,豚鼠可作为HRSV毒力评价的动物模型;HRSV在KMB17细胞上经低温传11代,未出现明显的减毒株特征,还需要进一步减毒.     

Wnt信号途径生物学活性研究概述

Wnt信号途径是细胞发育和调节生长的一个关键途径 ,通过与果蝇Wingless同源的Wnt基因编码Wnt蛋白 ,与膜上相应受体接合引起一系列相关蛋白反应 ,最终会激活MYC基因。在正常情况下对胚胎的发育和成人的部分组织形成和功能发挥起着重要作用。当该途径异常时 ,会导致癌症的发生。     

HCV不同标志物检测结果比较分析

目的分析丙型肝炎病毒抗原、抗体及核酸标志物实验室检测结果之间的关联性。方法用丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)、丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)扩增(PCR)荧光定量、丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-CAg)及丙型肝炎病毒抗原(HCV-Ag)检测试剂盒,分别检测血清或血浆样品中的HCV-Ab、HCV-RNA、HCV-CAg和HCV-Ag丙型肝炎病毒4种标志物,对检测结果之间的关联性进行分析。结果在1551份血清或血浆样品中,共检出HCV-Ab阳性样品565份(36.43%)、HCV-Ag(游离抗原)阳性样品48份(3.09%)、HCV-RNA阳性样品317份(20.44%)、HCV-CAg阳性样品25份(1.61%),HCV-Ab及HCV-RNA检出率明显高于抗原检出率(P<0.01),其阳性样品检出率按高低顺序依次为HCV-Ab、HCV-RNA、HCV-Ag和HCV-CAg。结论 4种标志物的检测可以联合运用,能有效降低HCV-Ab检测带来的漏检风险。     

HCV抗原ABS-ELISA检测方法的建立及初步评价

目的 建立新的HCV抗原生物素-亲和素-酶联免疫检测方法(ABS-ELISA).方法 将生物素-亲和素系统与酶联免疫技术相结合,建立用于丙型肝炎病毒抗原检测的方法,分析检测方法的灵敏度、特异度、稳定性及精确度等主要技术指标,并对应用效果进行评价.结果 建立的检测方法,对40余种肠道病毒样品均无交叉反应,在第二代HCV-RNA国家标准品的10份阴性标准品中,未检出HCV-Ag阳性样品,在10份HCV-RNA阳性标准品中,检出6份HCV-Ag阳性的样品,表现出良好的特异性；检测试剂CV平均值为6.28％,精密性好；在90份HCV抗体阳性样品中检测出HCV-RNA样品67份(74.44％),检出HCV游离抗原阳性样品30份(33.33％)、HCV总抗原阳性样品68份(75.56％),HCV游离抗原与HCV-RNA两个指标检出率差异有统计学意义(x2=22.443,P＜0.01),但HCV总抗原与HCV-RNA检测结果之间差异无统计学意义(x2=0.037,P＞0.05)；以HCV-RNA检测试剂为金标准,所建立的ABS-HCV抗原检测试剂总抗原检测结果的一致性、灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别为98.03％、80.60％、98.93％、79.41％、99.00％.结论 新建立的HCV抗原ABS-ELISA检测方法特异性好,其灵敏度与荧光定量PCR相近.