大蒜素对恶性肿瘤患者淋巴细胞免疫功能的影响

目的：探讨大蒜素对恶性肿瘤患者淋巴细胞免疫功能的影响。方法：恶性肿瘤患者每人每次口服大蒜素30mg,每日3次，连续服用，半年取其他化、放疗，用硷性磷酸酶－抗硷性磷酸酶（APAAP）法检测30例恶性肿瘤患者服用大蒜素前、后1、2、3月及30例正常对照组的淋巴细胞免疫功能。结果：恶性肿瘤患者淋巴细胞免疫功能显著低于对照组（P＜0．05），服用大蒜素后淋巴细胞免疫功能接近或高于对照组。结论：大蒜素能提高恶性肿瘤患者的淋巴细胞免疫功能。     

人HLA半相合混合脐血在SCID小鼠移植的实验研究

目的：探讨不同供者来源脐血混合移植的可行性和植入特性。方法：分别将两份人HLA半相合混合脐血或单份脐血输入经亚致量照射后的严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠，观察两组脐血在SCID小鼠体内的植入状况及多系造血重建特性。结果：混合脐血和单份脐血移植均可在受鼠体内植入，形成供－受混合嵌合体，并能重建多系造血，存活率和植入率无统计学意义（P＞0．05）。用多聚酶链反应－序列特异性寡核苷酸（PCR－SSO）探针检测人HLA－DQB1基因发现，HLA半相合混合脐血移植可有1份或2份脐血植入，其中造血祖细胞含量和体外克隆形成能力高者，更易于植入，造血重建特性与单一脐血移植比较无统计学意义。结论：HLA半相合人混合脐血可同时在SCID小鼠体内植入，形成来自供－受三者的多嵌合状态，并能重建造血及免疫功能。     

血管内皮生长因子促进小鼠胚胎干细胞的造血分化

目的：研究血管内皮生长因子(VEGF)体外促进小鼠胚胎干细胞系ES-D3向造血分化的能力。方法：先将ES-D3形成拟胚体，将拟胚体细胞转入含不同浓度的VEGF和VEGF+SCF的培养基中。实验分6组，分别为VEGF 5 μg/L组、VEGF 10 μg/L组、VEGF 20 μg/L组、VEGF 5 μg/L＋SCF组、VEGF 10 μg/L＋SCF组、VEGF 20 μg/L＋SCF组，同时设不加因子的自发分化对照组。RT-PCR检测造血转录基因GATA-2和早期造血细胞基因c-kit和β-H1的表达，流式细胞仪检测CD34+细胞，甲基纤维素半固体培养法检测生成造血集落的能力。结果：经过1周的诱导培养，实验组生成的细胞可以表达GATA-2、c-kit和β-H1，CD34＋细胞的比例也升高，并可形成造血祖细胞的集落。从诱导生成CD34＋细胞的比例和生成的集落数量看，VEGF联合SCF组的诱导效率要高于VEGF单用组和对照组，其中以VEGF 20 μg/L＋SCF组和VEGF 10 μg/L＋SCF组的诱导效率最高。结论：VEGF能够促进ESC的早期造血分化，尤以与SCF合用时，其诱导效率更高。     

血管内皮生长因子促进小鼠胚胎干细胞生成CD34+细胞的研究

目的：研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)体外促进小鼠胚胎干细胞系ESD3生成CD34+细胞的能力。方法将ESD3形成拟胚体，将拟胚体细胞转入含不同浓度的VEGF和VEGF+干细胞因子（stem cell factor, SCF)的培养基中。实验分6组，分别为VEGF 5 μg/L组、VEGF 10 μg/L 组、VEGF 20 μg/L组、VEGF 5 μg/L＋SCF组、VEGF 10 μg/L＋SCF组、VEGF 20 μg/L＋SCF组，同时设不加因子的自发分化对照组。RTPCR检测CD34 mRNA的表达，流式细胞仪检测CD34+细胞的比例，甲基纤维素半固体培养法检测生成造血集落的能力。结果：经过1周的诱导培养，实验组生成的细胞可以表达CD34 mRNA，CD34＋细胞的比例也升高，并可形成造血祖细胞的集落。从CD34 mRNA的表达水平、诱导生成CD34＋细胞的比例和生成的集落数量看，VEGF 20 μg/L＋SCF组和VEGF 10 μg/L＋SCF组的诱导效率最高。结论：VEGF能够促进ESC生成CD34＋细胞，尤以与SCF合用时，其诱导效率更高。     

消化系统易癌变疾病与癌症患者红细胞免疫功能变化及临床意义

消化系统易癌变疾病与癌症患者红细胞免疫功能变化及临床意义山东医科大学第二附属医院（２５００３３）林森蒋卫东山东医科大学附属医院赵宪时庆我们检测了部分消化系统易癌变疾病及癌症患者的红细胞Ｃ３ｂ受体花环率（ＲＣＲ）与免疫复合物花环率（ＲＩＣＲ），以探讨...     

健康人红细胞免疫功能的检测

我们检测了济南地区30例健康人(男19例,女11例;年龄27～65岁)的红细胞C_3b受体花环率(RCR)、红细胞免疫复合物花环率(RICR)、血清红细胞C_3b受体花环促进率(RFER)和抑制率(RFIR)。     

四氯化碳诱导兔肝硬化模型的动态研究

目的:探索简便、经济的兔肝硬化造模方法, 并观察造模过程中的肝脏功能和组织病理学变化．方法:兔24R,随机分为2组,实验组20只给予乙醇灌服,并SC CCl4,正常对照组4只给予正常饮水并以等量橄榄油代替CCl4 sc．每2 wk采集血样和小块肝组织,进行生化指标检测和肝脏 Masson三色胶原染色病理学观察．结果:随着四氯化碳处理时间的延长,肝纤维化程度逐渐加重．与对照组相比,实验组8 wk 后ALT值和AST值(ALT,1867．1±200．1 nkat／L vs 883．5±116．7 nkat／L,P=0．01;AST,983．5± 116．7 nkat／L vs 650．1±133．4 nkat／L,P=0．03) 均显著升高,而GGT值(100．1±33．3 nkat／L vs 366．7±50．1 nkat／L,P=0．01)显著降低;实验 8 wk末观察到肝硬化的典型病理表现,可观察到假小叶的形成．结论:联合应用CCl4和乙醇可成功诱导兔肝硬化,该方法动物死亡率低、造模快、成功率高．     

腰神经根慢性损伤后背根神经节电生理与细胞内钙离子浓度变化的研究

目的　探讨受损背根神经节 (DRG)神经元异位自发放电与细胞内Ca2 浓度改变的关系。方法　纯种成年新西兰大白兔 3 2只 ,随机分为正常组、损伤 10d组、损伤 3 0d组、损伤 90d组 ,建立模拟腰椎间盘突出的兔腰神经根慢性损伤模型 ,于损伤后 10d、3 0d、90d应用在体电生理技术记录损伤DRG异位电活动的改变 ,应用激光共聚焦扫描显微镜技术结合荧光染色法检测受损DRG神经元细胞内Ca2 荧光强度变化。结果　①兔腰神经根慢性损伤后 ,受损DRG神经元异位自发放电频率和幅度随损伤时间延长而逐渐下降 ,损伤各组与正常组相比 ,DRG放电频率、放电幅度均显著增高 (P <0 .0 5 ) ;②兔腰神经根慢性损伤后受损DRG细胞内Ca2 浓度呈现不同程度的增高 ,随着损伤时间的延长 ,Ca2 浓度有下降趋势。结论　Ca2 与受损神经元的异位电活动的发生及变化相关 ,Ca2 浓度升高可导致受损神经元异位电活动的发生及传播。     

单细胞PCR用于HLA配型的研究

目的研究用筑巢式多重PCR技术对单细胞进行HLA配型，分析影响单细胞PCR扩增的因素。方法首先分别采用不同的细胞裂解方法制备单细胞DNA模板，然后采用多重PCR分别扩增HLA—A，B基因的第2、3外显子和第2内含子区域，HLA—DRB1基因的第2外显子区域，最后根据大量DNA的常规HLA分型结果对单细胞第1轮扩增产物进行第2轮筑巢式序列特异性引物PCR（PCR-SSP）分型。结果酶解法制备单细胞DNA模板效率最高，第1轮扩增成功率为93．3％，而碱裂法和冻融法分别为83．3％和73．3％；采用酶解法制备单细胞DNA模板进行第2轮PCR—SSP分型验证，20份标本扩增成功率为95％，有3份标本只扩增出一条染色体，等位基因脱扣发生率为15％，全部操作可在6h内完成。结论筑巢式多重PCR技术对单细胞HLA分型具有较高的扩增效率，操作时间短，可望应用于妊娠前诊断。