大鼠肝再生过程中肝细胞caspase-3和caspase-8活性的变化

目的:研究大鼠肝再生过程中肝细胞caspase-3和caspase-8活性的变化规律.方法:雄性SD大鼠70%肝切除(PH),制作肝再生模型,制备肝匀浆液,经离心后用酶标仪分别测定肝再生过程中不同时期(共8个时间点),肝细胞的凋亡酶活性.结果:Caspase-3活性,与对照组相比,在PH后3、6、72、120 和168 h时显著性增高(P<0.001);而整个过程中Caspase-8的活性除了在PH后168 h时高于对照组外(P<0.05),其余时间点没有明显增高.结论:肝再生过程中肝细胞凋亡酶Caspase-3活性的升高可能主要是由内源性线粒体途径引起的.     

课题式教学在基因工程药物教学中的应用

基因工程药物课程内容庞杂,理论体系复杂且实践性强,单纯采用传统课堂讲授式教学难以达到理想的教学效果.介绍了在基因工程药物教学中引入课题式教学法以提高教学质量的一些做法,不仅可以使学生更加深刻地理解基因工程药物相关的概念、原理,还可以提高获取知识的兴趣和能力,培养科学研究的思维和创新意识,增强交流沟通、团队合作等多方面的综合素质.     

罗格列酮干预对老年SD大鼠氧自由基及相关生化指标的影响

目的:观察罗格列酮对衰老大鼠血液生化指标及氧自由基的影响,为将来抗衰老的实验研究提供一定的实验依据。方法:24个月龄(老年)自然衰老SD大鼠为模型,随机分为正常对照组、罗格列酮组、能量限制组,每组10只。罗格列酮组给予罗格列酮4 mg/(kg·d)灌胃,能量限制组给予正常对照组饮食的60%,第12周治疗结束时处死所有动物并检测各组大鼠的血液生化指标及超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(DA) 的酶活性。结果:各组大鼠血糖值(GLU)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)无明显差异,均在正常范围内。罗格列酮组血胆固醇(CH)较对照组出现下降,但无统计学差异。罗格列酮组及限食组血三酰甘油(TG)均较对照组出现了明显下降(P＜0.05)。罗格列酮组及限食组血液SOD及MDA酶活性均较对照组有明显改善。结论:罗格列酮具有调节老年大鼠体内脂质代谢紊乱、减轻氧化损伤的作用,可能起到抗衰老的作用。     

Stathmin调控及与疾病的关系

Stathmin是细胞内重要的细胞周期相关的微管作用蛋白。在有丝分裂间期,Stathmin以有活性的去磷酸化形式存在,抑制微管聚合。当细胞进入分裂期,Stathmin被磷酸化失活,微管聚合形成纺锤体,进而染色体分离、细胞分裂。Stathmin的表达和活性受多种转录因子和激酶/磷酸化酶的调控,其表达和活性异常与细胞增殖、神经系统发育及肿瘤等病理生理过程密切相关。     

大鼠肝再生早期线粒体介导的caspase 3激活的机制

目的:从线粒体介导的内源性途径分析大鼠肝再生早期肝细胞凋亡执行酶caspase-3激活的机制.方法:雄性SD大鼠35只,分成模型组15只(70%肝切除制作肝再生模型)、假手术组15只和正常对照组5只.模型组和假手术组根据时间分为术后3、6和24 h三个亚组,每个亚组5只.取各组大鼠肝组织,制备肝匀浆液.荧光法测肝组织凋亡酶caspase-3和caspase-9的活性;酶联免疫分析法测谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性;硝酸还原法测NO含量.结果:与假手术组相比,模型组凋亡酶caspase-3和caspase-9的活性在肝再生早期(术后3、6 h组)显著增高(P＜0.01);GSH-Px水平显著降低,NO分泌量显著增高(P＜0.01).结论:肝再生早期,肝组织处于氧化应激状态,线粒体介导的内源性途径参与凋亡执行酶的激活.     

研究生蛋白质组学理论及技术实验教学实践与体会

随着蛋白质组学技术在生命科学各个领域的广泛应用,为了提高研究生培养质量,国内已有多家高等医学院校开设了蛋白质组学专业课.结合教学实践,提出应用现代教学理念,通过建设网络教学平台、细化实验课考核指标、使用多媒体技术和加强双语教学等手段,提高教学效果.     

药学专业本科学员新药创新能力的培养

生物医药产业发展迅猛,竞争日趋激烈,对高等军事院校培养创新型人才提出了更高的要求。本文立足于第二军医大学药学院生化药学教研室培养新药创新人才的实践,就近年来教研室立足课堂、积极探索利用研究生教育资源培养本科学员新药创新能力等方面取得的经验进行总结,力求不断提高创新型军事人才培养水平。     

药学专业本科生教研室实习带教体会

药学专业本科生实习包括教研室实习、药厂实习及药房实习等。教研室实习主要围绕课题研究展开,如何培养实习生的创新能力,帮助其具备科研素养是教研室实习面临的重要课题。教研室实习涉及选题、开题、实验、论文撰写及答辩等多个环节,由于实习时间较短及实习工作量大等问题。笔者就近年来教研室在实习生培养方面的经验进行总结和思考。     

α-肾上腺素受体在脊髓损伤大鼠血管高反应性中的作用

目的研究高位脊髓横切（SCT）慢性期大鼠腹主动脉离体血管环对α-肾上腺紊受体（α—AR）激动剂的反应性及腹主动脉α1-AR、α2-AR各亚型mRNA的表达量，探讨其与腹主动脉高反应性的关系。方法取SCT4周后大鼠的腹主动脉，利用离体血管环张力测定技术，以血管环对梯度浓度去氧肾上腺素（Phe）和可乐定的收缩力，反映血管环对α1-AR、α2-AR激动剂的反应性；通过实时定量聚合酶链反应（PCR）测定腹主动脉α1A—AR、α1B-AR、α1D—AR、α2A—AR、α2B—AR和α2c—AR的mRNA表达量改变，并与假手术组比较。结果与假手术组比较，SCT4周组大鼠腹主动脉对可乐定反应性上升（P〈0．05或P〈0．01），对Phe反应性无明显改变；SCT组腹主动脉α1A—AR和α1D—AR的mRNA表达上调（P〈0．05或P〈0．01），而α1B—AR mRNA表达未见明显改变（P〉0．05），α2A—AR、α2B—AR和α2c—AR的mRNA表达均上调（P〈0．05或P〈0．01）。结论在SCT慢性期，腹主动脉高反应性的机制可能为血管对α2-AR激动剂敏感性上升，α2-AR mRNA表达上调。虽然α1-AR RNA表达上调，但离体血管对Phe收缩力无明显改变，α1—AR可能并不是引起SCT慢性期血管高反应性的原因。     

血小板活化因子乙酰水解酶融合蛋白的表达、纯化及鉴定

目的:获得血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)全长编码基因并在GST原核表达系统中表达.方法:通过RT-PCR方法,从正常人外周血单个核细胞(PBMC)中扩增出PAF-AH全长编码基因,将其克隆至大肠杆菌表达载体pGEX-4T-3,转化大肠杆菌BL21并诱导表达,采用GST蛋白纯化系统进行纯化.所得纯化蛋白以SDS-PAGE及Western印迹方法鉴定,并进行酶活性测定.结果:获得了PAF-AH基因,序列分析与GenBank数据库中序列一致.SDS-PAGE及Westem印迹结果显示,诱导表达出可溶性的融合蛋白,其相对分子质量与预期相符.纯化蛋白经Western印迹检测能够被特异性抗体所识别,具有免疫学活性;酶活性检测证实其具有特异的水解PAF的活性.结论:本实验在大肠杆菌表达系统中高效表达了有活性的PAF-AH蛋白.