阪崎肠杆菌环介导恒温扩增方法检测

探索快速简便易行的阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)检测方法,可以减少和控制由其引起的食品污染和中毒事件[1].环介导恒温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是2000年由Notomi等发明的一种新颖的恒温核酸扩增方法,其利用4条特异性引物来识别靶基因的6个特定区域,具有很高的特异性和灵敏度,反应在恒温下进行,快速简便,省却了PCR所需的温度循环,并且扩增产物量大,肉眼、电泳、浊度仪均可进行检测[2].     

志贺菌依赖解旋酶DNA恒温扩增技术建立

目的利用依赖解旋酶DNA恒温扩增技术(HDA),建立一种快速检测志贺菌(Shigella)的新方法。方法根据志贺菌的ipaH基因序列设计特异性引物,优化反应体系和反应条件;并对方法进行特异性和灵敏度评价。结果对21株实验菌株检测,3株志贺菌均为阳性,其余18株非志贺菌均为阴性,灵敏度为5.1×103cfu/mL,与普通PCR方法检测结果相当。结论 HDA法检测志贺菌具有特异、灵敏及仪器要求低等特点,具有广阔的应用前景。     

微生物快速检测方法的主成分分析

微生物检测操作繁琐,费时费力,快速检测方法应运而生并已获得广泛应用[1-3].但是,各种微生物快速检测方法基于不同的原理,适于不同的检测范围,价格不一,性能差别很大.     

进出口水产品中霍乱弧菌的检测与分析

目的监测并分析进出口水产品中的霍乱弧菌。方法采用传统两步增菌,平板划线,分离可疑单菌落,VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定仪、普通PCR、实时荧光定量PCR和血清凝集试验确认分离菌株。结果从水产品样品分离的菌株全自动微生物鉴定仪鉴定结果相似度达97%,普通PCR和实时荧光定量PCR检测为霍乱弧菌,ctx毒素基因检测为阴性,血清凝集试验为非O1非O139群霍乱弧菌。结论从水产品中检出霍乱弧菌非流行株,但仍需要加强主动监测,预防疫情的暴发。     

投影寻踪模型对微生物常用检测方法的评价

近年来出现了很多微生物快速检测方法〔1-3〕。用多种指标构成的多维数据可以对不同的微生物快速检测方法进行综合评价。尽管多维数据提供了丰富的信息,但针对不同的指标,这些方法的排序并非完全相同,因此对不同方法的优劣做出综合判断比较困难〔4〕。     

LAMP方法检测霍乱弧菌的研究

目的建立一种快速检测霍乱弧菌的方法。方法利用霍乱弧菌的hlyA基因设计特异性引物,建立LAMP检测方法,以及优化反应体系,并进行LAMP的特异性和灵敏度实验,同时与普通PCR和荧光定量PCR进行比较。结果成功建立霍乱弧菌的LAMP检测方法,得到最优的反应体系,在特异性实验中,霍乱弧菌均呈阳性,而副溶血弧菌、溶藻孤菌、最小孤菌、1梅氏孤菌等均为阴性;在灵敏度实验中,霍乱弧菌的最低检测限为6.2pg／tube,是普通PCR的1000倍。比荧光定量PCR低一个数量级。结论LAMP方法具有很高的特异性和灵敏度,可用于霍乱孤菌的检测。     

入境船舶压载水中细菌调查的多维尺度分析

[目的]保护我国的海洋生态环境卫生,防止因船舶压载水的输入造成外来海洋生物、细菌和病毒的入侵,对我国的生态环境和人体健康构成威胁。[方法]对烟台、日照和青岛3地港口的共74艘入境船舶进行压载水的细菌种类调查,采用经典多维尺度分析 （classical multidimensional scaling）方法将压载水中检出的50种（或属）的细菌进行降维处理,使74个样本的数据在二维平面中表达,直观地表明了各样本之间的相似性。[结果]3地港口入境船舶压载水中共检出50种（属）细菌,且多数为致病菌或条件致病菌。船舶压载水水样经多维尺度分析显示：多数样本聚类在一起少数样本离群。这种离群与入境港口无关。美国波士顿压载水水样中的细菌构成与来自太平洋沿岸国家的其它压载水水样存在显著差异。[结论]调查分析结果为研究压载水的潜在危害和外来物种入侵提供了参考信息,提出了定量分析结合图示化方法分析水样细菌的一种思路。