RNA结合蛋白HuR在胃癌中的表达和临床意义

目的使用免疫组方法检测RNA结合蛋白HuR在75例胃癌组织中的表达情况,分析Hu R在胃癌的发生、发展及淋巴结转移中相关性。方法采用免疫组织化学染色MaxVision/HRP法检测75例胃癌组织中胞浆、胞核HuR的表达水平,并与临床病理参数相比较,分析两者之间的相关性。在多因素分析中,鉴定影响生存的独立变量使用Cox回归模型。不同变量对预后的影响使用风险比+95%可信区间表示。结果 75例胃癌组织中,HuR胞浆阳性表达率、HuR胞核阳性表达率分别为65.3%(49/75)和85.3%(64/75)。胞浆HuR表达阳性与胃癌肿瘤大小(P=0.014)、淋巴结转移(P=0.002)、TNM分期(P=0.027)、远处转移(P=0.016)均有相关性,但与其他临床特征无相关性(P 0.05),如性别、年龄、肿瘤浸润深度。胞核HuR表达与胃癌所有的临床病理特征均无相关性(P 0.05);多因素COX模型结果显示,HuR胞浆阳性(HR=1.854,;95%CI=1.018～3.875;P=0.044)、肿瘤大小(HR=1.303;95%CI=1.256～3.404;P=0.012)、TNM分期(HR=3.607;95%CI=1.729～7.526;P=0.001)是影响GC患者预后的独立因素。结论胃癌组织中胞浆Hu R表达与肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移均有显著正相关,提示HuR可能参与了胃癌发生、发展及转移过程。     

显微手术治疗精索静脉曲张疗效和安全性的系统评价

目的系统评价精索静脉曲张显微结扎术（MV）与Palomo术治疗男性精索静脉曲张的疗效与安全性。方法计算机检索MEDLINE（1985—2008．10）、EMbase（1990～2008．10）、中国生物医学文献光盘数据库（1979～2008．6）、中国生物医学期刊文献数据库（CMCC,1979～2008．10）、CNKI数字图书馆（1990～2008．10）,手工检索《中华男科学》等4种相关杂志。纳入MV和Palomo术治疗精索静脉曲张的随机对照试验（RCT）,并追踪已纳入文献的参考文献。两位评价员独立进行文献筛查、质量评价和资料提取,并交叉核对,意见不一致则通过讨论或向专家咨询解决。采用RevMan4．3．1软件进行Meta分析。结果共初检出22篇文献,最后纳入7个RCT（1389例）进行分析。Meta分析结果显示：MV组精子活率[RR=1．21,95％CI（1．09,1．34）,P=0．0005]和密度[RR=1．35,95％CI（1．20,1．51）,P〈0．00001]提高率均高于Palomo组,MV组术后自然孕率高于Palomo组[RR=1．34,95％CI（1．08,1．66）,P=0．008],而MV组单侧手术时间较Palomo组长[WMD=23．01min,95％CI（16．86,29．16）,P〈0．00001],双侧手术时间亦较Palomo组长[WMD=34．05rain,95％CI（4．9,63．21）,P=0．02]。两组术后恢复时间差异无统计学意义。MV组术后复发率低于Palomo[RR=0．17,95％CI（0．10,0．31）,P〈0．00001],且MV组术后鞘膜积液发生率低于Palomo组[RR=0．10,95％CI（O．05,0．23）,P〈0．0000130两组切口感染率、阴囊血肿及疼痛发生率差异无统计学意义（P〉0．1）。结论本研究结果显示,与传统Palomo术相比,显微结扎术具有患者术后精液改善率高,术后自然孕率高,术后复发率和鞘膜积液发生率低的特点;但手术时间更长。远期疗效有待高质量大样本长期随访的RCT进一步验证。     

前列腺癌细胞DU145同步化诱导的DNA损伤反应通路和PI3K/Akt通路对凋亡抑制因子基因API2(BIRC3)mRNA表达的影响

目的探讨在前列腺癌细胞DU145同步化培养后引起的DNA损伤反应通路和PI3K/AKT通路对凋亡抑制因子(IAP)基因API2(BIRC3)mRNA表达的影响,同时分析API2基因所在染色体是否存在特异性的异常。方法采用无血清的饥饿培养法使细胞同步在G0期;分别用含羞草碱(mimosine)、胸腺嘧啶(thymidine)和噻氨酯哒唑(nocodazole)使细胞同步在G1期、S期和G2/M期并引起DNA损伤反应,同时加入PI3K的特异性抑制剂ly294002以阻止PI3K/AKT通路。通过RT-PCR半定量法检测API2 mRNA在各个细胞周期相的表达情况。通过细胞遗传学的常规G式显带法,分析凋亡抑制因子基因所在的染色体是否存在特异性的异常。结果 mimosine同步化的G0/G1期细胞达到了78.04%,thymidine同步化的S期细胞达到62.19%,nocodazole同步化的G2/M 60.5%。API2基因位于染色体11q22-q23,存在易位,如t(11;12)(q;q)。API2mRNA的表达,非同步化的ly294002组分别与同步化的mimosine+ly294002组、nocodazole+ly294002组和thymidine+ly294002组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论前列腺癌细胞株DU145存在某些染色体的结构和数目异常,这些异常可能影响某些基因的表达。药物的同步化激活了DNA损伤反应通路和生存信号通路,再通过PI3K/Akt通路,而不是通过P53通路,在细胞周期的某个时相调控API2(BIRC3)mRNA的表达。     

PI3K/AKT抑制剂对前列腺增生的影响及机制研究

目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB或PI3K/AKT)信号通路抑制剂对前列腺增生的影响及机制。方法:选用鼠龄12周的雄性SD大鼠48只,随机分为4组:假手术对照组;BPH模型组;LY294002 50 mg组和LY294002 100 mg组,每组12只。大鼠去势后肌注丙酸睾酮10 mg/(kg.d)连续30 d建模,LY294002 50 mg组和100 mg组同时肌注LY294002 50 mg/kg和100 mg/kg,隔日1次。给药30 d后,切除各组大鼠前列腺组织,称取前列腺重量,切片观察前列腺组织细胞结构变化。免疫组化法检测K i-67、凋亡相关蛋白Bc l-2与Bax的表达情况;核酸末端原位标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况。结果:各组大鼠前列腺湿重(mg)和前列腺指数:假手术对照组:551±10.8,1.61±0.05;模型组:687±13.8,2.15±0.12;LY294002 50 mg组:623±23.5,1.95±0.11,与模型组相比,差异有显著性(P<0.05);LY294002 100 mg组:561±12.6,1.71±0.18,与模型组相比,差异具有极显著性(P<0.01)。凋亡相关蛋白Bax与Bc l-2的表达:假手术对照组:16.7%,16.7%;模型组:16.7%,58.3%;LY294002 50 mg组:33.3%,33.3%,与模型组相比,差异有显著性(P<0.05);LY294002 100 mg组:50.0%,25.0%,与模型组相比,差异极有显著性(P<0.01)。增殖和凋亡指数(%):假手术对照组:上皮组织14.2±6.4,6.5±1.8,间质组织7.6±2.6,2.5±0.3;模型组:上皮组织50.9±12.8,2.7±1.4,间质组织16.5±5.7,1.3±0.8;LY294002 50 mg组:上皮组织32.0±13.8,6.2±2.5,间质组织12.1±3.8,1.6±1.1;与模型组相比,差异有显著性(P<0.05);LY294002 100 mg组:上皮组织17.8±14.7,7.4±3.6,间质组织9.5±3.4,2.2±1.3;与模型组相比,差异有显著性(P<0.05)或极显著性(P<0.01)。结论:前列腺增生动物模型前列腺细胞增殖增加和凋亡的相对减少参与了BPH的发生发展过程。PI3K/AKT介导的信号通路在前列腺增生的发生发展过程中起重要作用,阻断PI3K/AKT信号通路具有抑制前列腺增生的作用。     

一例21号环状染色体综合征的细胞遗传学和表型定位分析

目的通过对1例21号环状染色体综合征患者的细胞遗传学分析，探讨21号环状染色体的形成原因，临床表型与染色体区带的关系。方法应用染色体G带、C带、N带、高分辨显带和荧光原位杂交技术对21号环状染色体进行识别与定位。结果患儿双亲核型正常，患儿核型为46，XY，r（21）[91]／46，XY，r（21；21）（p11q22．3；p11q22．3）[5]／45，XY，-21[4]。结论21号环状染色体综合征的临床表现与21q末端缺失的多少相关，男性性别发育异常可能与21q22．3片段的缺失相关。     

前列腺癌细胞DU145同步化诱导的DNA损伤反应通路和P13KAkt通路对凋亡抑制因子基因Apollon（BIRC6）mRNA表达的影响

【目的】探讨在前列腺癌细胞DU145同步化培养后引起的DNA损伤反应通路和P13K／AKT通路对凋亡抑制因子（IAP）基因Apollon／BIRC6mRNA表达的影响。同时分析Apollon基因所在染色体是否存在特异性的异常。【方法】采用无血清的饥饿培养法使细胞同步在G。期;用含羞草碱、胸腺嘧啶和噻氨酯哒唑分别使细胞同步在G1期、S期和G2／M期并引起DNA损伤反应,同时加入P13K的特异性抑制剂ly294002以阻止P13K／AKT通路。利用RT—PCR半定量法检测ApollonITIRNA在各个细胞周期相的表达情况。细胞遗传学的常规G式显带法,分析凋亡抑制因子基因所在的染色体是否存在特异性的异常。【结果】含羞草碱同步化的G0／G1期细胞达到了78．04％,胸腺嘧啶同步化的S期细胞达到62．19％,噻氨酯哒唑同步化的G2／M60．5％。Apollon基因所在的染色体2D,存在缺失或者重复,如2p-,2p＋。ApollontuRNA的表达,同步化的G2／M、S期细胞组分别与非同步化细胞组比较差异有显著性（P〈0．01）,噻氨酯哒唑＋ly294002组与噻氨酯哒唑相比较差异有显著性（P〈0．01）。【结论】前列腺癌细胞株DU145存在某些染色体的结构和数目异常,可能影响某些基因的表达。药物的同步化激活了DNA损伤反应通路和生存信号通路,再通过P13K／Akt通路,在细胞周期的某个时相调控BIRC6／ApollonmRNA的表达。     

Hela细胞MPF对未成熟卵母细胞的体外促成熟作用分析

【目的】研究Hela细胞M期促进因子MPF对未成熟卵母细胞的体外促成熟作用的生物活性，并观察单个成熟卵母细胞的中期染色体。【方法】应用秋水仙胺将Hela细胞阻滞在有丝分裂的中期（meta—phase），从中提取MPF蛋白；体外培养基分为无激素组、有激素素组、注射组，将MPF提取物通过显微注射，分别导入3组培养基中的昆明小白鼠未成熟卵母细胞中，观察未成熟卵母细胞发生GVBD（生发泡破裂）、或者排出极体的数量，并对3组两两之间发生GVBD或者排出极体的情况，作统计分析；以及制备并观察成熟卵母细胞的中期相染色体。【结果】经过统计分析说明，发生GVBDD的情况，在注射组与无激素组之间差异有显著性（P〈0．05）；排出极体的情况，在注射组与无激素组之间，以及注射组与激素组之间差异有显著（P〈0．005，P〈0．05）。已经观察到了部分成熟卵母细胞的中期染色体。【结论】MPF提取物具有诱导小白鼠未成熟卵母细胞在体外提前恢复减数分裂的生物活性。     

丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号传导通路与膀胱肿瘤

肿瘤细胞的一个典型特征是增殖增强,其主要原因是由于细胞内信号传导通路活性增强所引起,而MAPK信号传导通路尤其重要。MAPK通路与从尿路上皮衍生而来的膀胱移行细胞癌(BTCC)的增殖作用直接有关。本文就MAPK信号通路对膀胱癌的发病原因、机理以及治疗等方面的作用的研究情况作一综述。     

前列腺癌细胞DU145同步化诱导的DNA损伤反应通路和PI3KAkt通路对凋亡抑制因子基因Apollon(BIRC6) mRNA表达的影响

[目的] 探讨在前列腺癌细胞DU145同步化培养后引起的DNA损伤反应通路和PI3K/AKT通路对凋亡抑制因子(IAP)基因Apollon/BIRC6 mRNA表达的影响.同时分析Apollon基因所在染色体是否存在特异性的异常.[方法]采用无血清的饥饿培养法使细胞同步在G0期;用含羞草碱、胸腺嘧啶和噻氨酯哒唑分别使细胞同步在G1期、S期和G2/M期并引起DNA损伤反应,同时加入PI3K的特异性抑制剂ly294002以阻止PI3K/AKT通路.利用RT-PCR半定量法检测Apollon mRNA在各个细胞周期相的表达情况.细胞遗传学的常规G式显带法,分析凋亡抑制因子基因所在的染色体是否存在特异性的异常.[结果]含羞草碱同步化的G0/G1期细胞达到了78.04%,胸腺嘧啶同步化的S期细胞达到62.19%,噻氨酯哒唑同步化的G2/M 60.5%.Apollon基因所在的染色体2p,存在缺失或者重复,如2p-,2p+.Apollon mRNA的表达, 同步化的G2/M、S期细胞组分别与非同步化细胞组比较差异有显著性(P<0.01),噻氨酯哒唑+ly294002组与噻氨酯哒唑相比较差异有显著性(P<0.01).[结论]前列腺癌细胞株DU145存在某些染色体的结构和数目异常,可能影响某些基因的表达.药物的同步化激活了DNA损伤反应通路和生存信号通路,再通过PI3K/Akt通路,在细胞周期的某个时相调控BIRC6/Apollon mRNA的表达.