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目的 建立一种无需前增菌快速检测牡蛎中单核细胞增生李斯特菌的PCR方法。方法 利用β-环糊精和膨润土包被活性炭处理牡蛎样品,去除聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)反应抑制因子,以单核细胞增生李斯特菌特异基因inlB为靶基因,建立无需样品前增菌的PCR快速检测方法。同时验证该方法的特异性、灵敏度及实用性参数,并评估该方法所用试剂在冷冻保存后的稳定性与实用性。结果 建立的PCR方法对130株目标菌和63株非目标菌的检测特异性为100%,灵敏度达10 CFU/25 g。该方法无需前增菌,4 h即可完成检测。PCR方法和国标方法对实际样品中单核细胞增生李斯特菌的检出率(均为13%)和活菌检测率(均为100%)一致,即符合率100%。此外,该方法所用试剂在-20℃冷冻条件下可稳定保存至少1年。结论 建立的PCR方法特异性强、灵敏度高,可快速、准确检测出牡蛎中的单核细胞增生李斯特菌。 相似文献
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