食管癌新型生物学标志物的筛选以及外周血mRNA初步验证*‘(1.,江苏徐州221000;2.江苏护理职业学院,江苏淮安223001;3.,江苏淮安223022)

摘要:目的 采用生物信息学和实时荧光定量PCR(qgRT-PCR)筛选并验证对食管癌(ESCA)发生和发展起关键作用的基因,以期寻找ESCA的新型生物学标志物。方法﹐检索TCCA数据库,利用韦恩图分析,初步确定ESCA样本中差异表达基因与对无病生存率(DFS)产生最显著影响的基因之间的交又基因。通过对重叠基因进行蛋白质-蛋白质互作(PPI)网络分析,并进行GO和KEGC功能分析,筛选出与ESCA发生,发展相关的关键潜在基因。利用qRT-PCR对ESCA患者外周血中关键基因mRNA 的表达水平进行定量分析并结合患者临床病理参数进行统计学分析,以评估其作为ESCA新型生物学标志物的潜在价值。结果在TCCA数据库中筛选出的ESCA差异表达基因与无病生存基因交叉后,发现存在明显差异表达的基因59个,其中39个基因上调,20个基因下调,且上述基因均明显影响患者的 DFS。经过PPI网络分析后,确定了15个核心互作的上调基因,而下调基因没有形成任何互作网络。进一步对这15个核心互作基因通过CO和KECC富集分析,发现纤维连接蛋白1(FN1)可能是ESCA筛查的潜在生物学标志物。qRT-PCR结果显示,与健康人对照组相比,ESCA患者外周血中FNVl mRNA的表达水平显著升高。结合患者的临床病理参数分析,发现分化程度差、临床病理分期高的ESCA患者外周血FNl mRNA水平明显升高,且证实FNl mRNA水平模型能够有效区分食管癌患者和健康人。结论FNI mRNA可作为ESCA潜在的非侵入性筛查生物学标志物。     

校企合作模式下理实一体化教学与传统教学效果比较

校企合作是学校和企业双方共同参与人才培养的过程,国外职业院校校企合作已经有百年的历史,从以往的经验可见校企合作模式对高等职业教育及企业的发展产生了深远的影响[1].校企合作、工学结合模式是以培养学生的全面素质、综合能力和就业竞争力为重点,利用学校和企业两种不同的教育环境和教育资源,将课堂教学与学生参加实际工作有机结合,来培养适合不同用人单位需要的应用型人才的教学模式.校企合作、工学结合办学是促进卫生职业教育持续健康发展,培养合格的医疗卫生单位需要的医学检验专门人才的有效途径,是卫生职业学校的办学趋势[2].     

基于能力为本位的基层卫生人员培训课程开发与应用

目的探讨提升基层卫生人员服务能力急需的培训课程,评价课程实施路径及实施效果。方法以医学教育课程开发六步法为指导,以能力为本位进行基层卫生人员培训课程开发与应用。通过问卷调查和半结构式访谈评估培训需求,确定课程目标及内容,采用线上线下混合式教学,应用线上测试、客观结构化临床考试(OSCE)进行课程评估及反馈。结果共有338名学员完成线上课程培训,课程内容综合评价成绩为(81.82~95.16分)。其中常见病与多发病诊疗模块成绩较好,疾病诊断、合理用药两个项目平均分分别是(92.16±8.46)分、(90.29±10.12)分;老年家床服务模块得分较低,老年人健康管理项目平均分(81.24±9.14)分。276名学员完成了线下实践技能的培训与考核,OSCE考核总分为(82.92±9.32)分。参加培训的338名学员普遍认为综合演练课程能够培养临床思维、团队协作能力,案例教学贴近临床,对基层工作有指导作用;OSCE能够综合考核应用能力、应急应对能力,对课程教学、考核、培训效果满意度较高。结论基于课程开发六步法设计的培训课程符合基层卫生人员工作需要,有助于提高基层诊疗水平和岗位胜任力,但也需要进一步优化和完善。     

厚朴酚超声提取条件优选

目的 优选厚朴中厚朴酚超声提取条件.方法 采用超声波法提取厚朴中的厚朴酚,研究提取溶剂、提取时间、超声功率、料液比单因素对提取率影响,在单因素试验结果的基础上进行正交设计,对厚朴中厚朴酚的超声提取条件进行优化.结果 乙酸乙酯为最佳提取溶剂,单因素确定最佳提取时间为60～80min,最佳提取功率为150～200W,最佳料液比1:15～1:25.单因素分析基础上,正交试验确定各因素对厚朴中厚朴酚的提取率的影响从大到小依次为料液比>超声功率>超声时间,最佳提取条件为以乙酸乙酯为提取溶剂,料液比l:25,超声功率175W提取时间70min,该条件下厚朴中厚朴酚的提取率为88.13%.结论 超声提取厚朴酚是一种操作简单、成本低廉、提取时间短、提取率较高的方法.     

2型糖尿病大鼠模型的建立

目的 探讨2型糖尿病动物模型建立的方法.方法 根据体重将35只Wistar大鼠随机分为对照组(10只)和糖尿病组(25只);糖尿病组喂高糖高脂饲料,对照组喂普通饲料,喂养1个月后,糖尿病组大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ) 25 mg/kg.bw,对照组注射相同剂量柠檬酸钠缓冲液,72 h后以随机血糖≥16.7 mmol/L确定为糖尿病模型.结果 STZ注射后72 h,与对照组相比糖尿病组大鼠血糖明显升高(P＜0.05),葡萄糖耐量,胰岛素耐受均异常,血清TG,TC,LDL-C显著升高(P＜0.05),同时伴有多饮、多食、多尿等糖尿病症状.结论 高糖高脂饲料联合小剂量腹腔注射STZ可致大鼠血糖明显上升,血脂紊乱等2型糖尿病症状.     

Beclin1表达与上皮性卵巢癌风险相关性的Meta分析

目的 探讨Beclin1在上皮性卵巢癌的表达及与其临床病理特征的相关性。方法 检索数据库,查找国内外公开发表关于Beclin1蛋白表达与上皮性卵巢癌及其不同临床病理特征相关性的病例-对照研究,采用RevMan 5.3软件对纳入研究进行Meta分析。结果 经筛检共纳入5个病例-对照研究,包括上皮性卵巢癌369例,交界性卵巢癌75例,卵巢良性肿瘤116例,正常卵巢组织67例。Meta分析结果显示:Beclin1蛋白在上皮性卵巢癌与正常卵巢组织[OR=0.09,95%CI（0.04,0.20）P<0.01],上皮性卵巢癌与卵巢良性肿瘤[OR=0.11,95%CI（0.06,0.20）P<0.01],上皮性卵巢癌与交界性卵巢癌[OR=0.20,95%CI（0.11,0.38）P<0.01]表达的比较,差异均有统计学意义;Beclin1蛋白在上皮性卵巢癌FIGO临床分期III~IV期与I~II期[OR=0.34,95%CI（0.21,0.55）P<0.01],伴淋巴结转移组与不伴淋巴结转移组[OR=0.47,95%CI（0.29,0.76）P<0.01]表达的比较,差异均有统计学意义。Beclin1蛋白在上皮性卵巢癌低中分化组与高分化组[OR=0.66,95%CI（0.26,1.72）P>0.05]的表达差异无统计学意义。结论 Beclin1表达与上皮性卵巢癌密切相关,由于受纳入研究数量和质量的限制,尚需进一步开展研究对结论加以验证。     

姜黄素对2型糖尿病大鼠肾脏和肝脏病理改变的影响

目的探讨姜黄素对2型糖尿病(T2DM)大鼠肾脏、肝脏病理变化的影响。方法将100只雄性Wistar大鼠随机分为两组:10只大鼠为空白对照组,90只大鼠为T2DM造模组,采用小剂量链脲佐菌素(30mg/kg BW)联合高糖高脂饲料诱导T2DM模型组。模型诱导成功后,符合T2DM标准的大鼠39只,随机分为4组:T2DM模型对照组、姜黄素低剂量组(50 mg/kg BW)、姜黄素中剂量组(150 mg/kg BW)和姜黄素高剂量组(250 mg/kg BW),给予干预。45天后,从各组大鼠中随机选取4只进行病理检测,观察T2DM大鼠肾脏和肝脏的病变进展情况。结果与对照组相比,T2DM模型组的大鼠血糖、血脂均明显升高(P<0.05)。与T2DM模型对照组比较,姜黄素干预各组T2DM大鼠肾脏和肝脏的病理改变均有不同程度的改善。结论姜黄素能够改善T2DM大鼠肝、肾组织的病理变化。     

慢性乙型肝炎血清LHBs与HBV DNA、HBeAg、ALT的相关性

目的探讨HBV表面大蛋白(LHBs)与HBV DNA、HBeAg、ALT的相关性及LHBs指标在慢性乙型肝炎(CHB)诊治中的临床意义。方法选择324例CHB患者,分别检测LHBs、HBV DNA、HBeAg、ALT。血清LHBs和HBeAg采用ELISA法,HBV DNA检测采用荧光定量PCR法。结果 324例CHB患者血清中,随着HBV DNA载量的升高,LHBs的浓度呈上升趋势,两者之间有良好的相关性(r=0.97,P<0.01),且LHBs的阳性率也逐步增加,不同组别间LHBs阳性率差异均有统计学意义(P<0.05);在171例HBeAg阴性血清中,LHBs和HBV DNA的阳性率分别为66.08%和61.99%(P>0.05);171例HBeAg阴性血清中,113例LHBs阳性与58例LHBs例阴性组血清ALT有统计学差异(P<0.05)。结论 LHBs是反映HBV感染者,特别是HBeAg阴件患者体内病毒复制程度敏感、可靠指标;检测CHB患者血清中LHBs对于了解乙型肝炎肝细胞损伤程度、抗病毒疗效和评估预后具有一定的临床价值。     

SPSS软件在高职护理事业预防医学试卷分析中的应用

目的 采用SPSS统计软件对2010年高职护理班预防医学期末考试试卷进行分析.方法 从成绩的一般统计描述,试卷的难度、可信度、有效度等方面进行分析.结果 采用该试卷,学生总体考试成绩较好,试卷结构合理,可信度和有效度均达到标准要求,试卷难度相对偏低.结论 本次期末考试所采用的试卷结构合理,可信度和有效度均较高,但难度相对偏低,需注意改进.