在Eca109细胞中Lrig1对Survivin和Caspase-9的调控研究

目的采用多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(Lrig1)过表达的方式,确定在食管鳞癌细胞(Eca109细胞)中是否存在Lrig1对Survivin和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-9)的调控。方法使用重组质粒GV-219-Lrig1转染Eca109细胞使其过表达Lrig1;采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法和蛋白质印迹法分别检测细胞中Lrig1、Survivin和Caspase-9的信使核糖核酸(m RNA)及蛋白的表达水平,使用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果重组质粒GV-219-Lrig1转染Eca109细胞24 h后,在m RNA水平,Lrig1表达量显著增高(P0.01),而Survivin和Caspase-9无明显变化(P0.05);在蛋白水平,Lrig1和Cleaved-Caspase-9表达量都显著增加(P0.05),而Survivin表达量无明显变化(P0.05);流式细胞仪检测结果显示,与GV-219(NC组)相比,重组质粒GV-219-Lrig1转染的Eca109细胞24 h细胞晚期凋亡率增加1.6%。结论在Eca109细胞中,过表达Lrig1使其在转录和蛋白水平的表达量显著增加,可明显增加Cleaved-Caspase-9的蛋白水平。但对Survivin的表达没有影响。其调控机制尚待进一步研究。