rhTRAIL对耐顺铂人肺腺癌细胞凋亡的影响

背景与目的TRAIL和TNF、Fas一样均属TNF蛋白超家族成员。研究表明,TNFα可用于克服某些肿瘤细胞的化疗耐药性,而一些化疗药物可上调死亡受体DR的表达,从而促进TRAIL诱导的细胞凋亡。本研究旨在探讨重组人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白rhTRAIL对耐顺铂人肺腺癌细胞凋亡的影响。方法常规体外培养耐顺铂人肺腺癌细胞株A549/DDP,应用MTT比色法、DPA法、流式细胞术和激酶法,检测rhTRAIL对耐顺铂人肺腺癌细胞株A549/DDP细胞增殖的抑制活性及其诱导细胞凋亡的效应。结果单用rhTRAIL时,低剂量rhTRAIL(6.25、12.5、25.0μg/L)对A549/DDP细胞的生长抑制率和各项凋亡指数(细胞凋亡率、DNA片段化比率和Caspase3活性)均无明显影响,P>0.05,但当rhTRAIL浓度在50μg/L时,细胞生长抑制率、细胞凋亡指数、DNA片段化比率和Caspase3活性均明显增高,各达68.6%、(27.13±0.66)%、(37.4±2.0)%和0.117±0.011(P<0.05)。当3mg/LDDP和rhTRAIL联用时,12.5μg/L的rhTRAIL即可使A549/DDP细胞生长抑制率、细胞凋亡指数、DNA片段化比率和Caspase3活性明显增高,各达30.4%、(19.39±0.54)%、(17.3±4.1)%和0.138±0.009(P<0.05)。结论单用较高剂量的rhTRAIL可以诱导耐顺铂人肺腺癌细胞A549/DDP细胞凋亡。低剂量顺铂可以增强rhTRAIL诱导A549/DDP细胞凋亡的效应。rhTRAIL可望成为耐药性肺癌治疗的一种重要的生物制剂。     

艾滋病合并组织胞浆菌病1例

1　病例资料患者男性 ,2 8岁 ,已婚。因持续性高热 1个月余入院 ,伴出汗 ,双膝关节疼痛 ,全身红色小结节 ,顶部可见有白色小水泡 ,无咳嗽咳痰及咯血 ,无盗汗。既往否认有冶游史及输注血及生物制品史 ,无静脉吸毒及非法卖血史。入院诊断 :发热原因待查 :(1)淋巴瘤 ,(2 )淋巴结核     

Survivin反义寡核苷酸治疗耐顺铂人肺腺癌细胞裸鼠移植瘤的实验研究

目的:探讨以存活素基因(survivin)为靶点反义基因治疗耐顺铂(CDDP)人肺腺癌移植瘤的可行性。方法:常规体外培养A549/CDDP细胞,采用皮下注射法建立移植瘤裸鼠动物模型。以脂质体包裹的survivin反义寡核苷酸(ASODN)直接移植瘤内注射,观察肿瘤生长情况,计算抑瘤率和肿瘤生长指数。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学分别检测survivinmRNA和蛋白的表达。结果:单用ASODN组的抑瘤率和肿瘤生长指数分别为35.4%和4.230±0.886,和空白对照组比较,抑瘤率较高,肿瘤生长减缓(P<0.05)。而ASODN联合CDDP组的抑瘤率和肿瘤生长指数则分别为63.7%和1.700±0.436,与CDDP组、Lip与CDDP联用组及单用ASODN组比较均有统计学差异(P<0.05)。RT-PCR半定量和免疫组织化学显示,ASODN组和ASODN联合CDDP组肿瘤组织中survivinmRNA及其蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论:Survivin反义寡核苷酸可以抑制耐顺铂人肺腺癌移植瘤的生长,可能主要与其特异性下调survivin基因表达有关。特异性靶向survivin反义寡核苷酸可用于肺癌顺铂耐药的辅助治疗,其临床实际应用有待进一步研究。     

靶向ERCC1 RNA干扰对人肺腺癌细胞顺铂耐药的逆转

目的:探讨利用RNA干扰技术切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-completion gene 1,ERCC1)逆转耐顺铂(cisplatin,CDDP)人肺腺癌细胞A549/CDDP的耐药性。方法:(1)常规体外培养A549/CDDP细胞,以脂质体包裹的ERCC1-siRNA转染细胞,转染浓度分别为100、200、300 nmol/L,并设空白转染、Lip转染对照组,观察转染效果。(2)采用免疫组化SABC法及RT-PCR法分别检测肿瘤细胞转染siRNA后ERCC1基因和蛋白的表达。(3)MTT法检测肿瘤细胞耐药指数,观察ERCC1靶向siRNA逆转A549/CDDP细胞顺铂耐药的效果。结果:(1)Lip组、siRNA-neg组转染效率分别为(56.38±9.82)%、(63.54±4.87)%,SiRNA-ERCC1①组、siRNA-ERCC1②组、siRNA-ERCC1③组转染效率分别为(43.62±6.08)%、(65.85±9.61)%和(78.93±4.86)%。(2)针对ERCC1的siRNA转染A549/CDDP后,细胞ERCC1 mRNA及蛋白表达均下调,siRNA-ERCC1(300 nmol/L)组效应最强,分别下降至(11.19±6.82)%和(20.88±6.57)%(P<0.01)。(3)A549/CDDP细胞转染后耐药倍数减为6.05、4.64、2.94,空载体对照组细胞的耐药倍数为9.6。结论:RNA干扰技术封闭ERCC1基因可较大程度逆转耐顺铂人肺腺癌细胞的耐药性,且呈一定的浓度依赖性;ERCC1基因可作为逆转肺癌耐药治疗的有效靶点。     

靶向ERCC1 RNA干扰对人肺腺癌细胞顺铂耐药的逆转

目的: 探讨利用RNA干扰技术切除修复交叉互补基因1（excision repair crosscompletion gene 1，ERCC1）逆转耐顺铂 (cisplatin,CDDP)人肺腺癌细胞A549/CDDP的耐药性。方法：(1) 常规体外培养A549/CDDP细胞，以脂质体包裹的ERCC1siRNA转染细胞，转染浓度分别为100、200     

重组人可溶性凋亡配体相关蛋白联合顺铂抑制肺癌裸鼠移植瘤的生长

目的:探讨重组人可溶性凋亡配体相关蛋白(rhTRAIL)和顺铂联用对抑制人肺腺癌细胞系A549裸鼠移植瘤的生长有无协同增效作用。方法:将24只荷人A549肺腺癌BALB/CA-nu裸鼠随机分成4组,(1)阴性对照组;(2)rhTRAIL组(1μg/mL,隔日1次×8次);(3)顺铂组(1.5mg/kg,每周2次×4次);(4)联合用药组(rhTRAIL1μg/mL,隔日1次×8次 顺铂1.5mg/kg,每周2次×4次)。分别测量瘤重、瘤体积,计算肿瘤生长指数和抑瘤率,并观察各组移植瘤组织的毒副作用和病理形态结构。结果:阴性对照组肿瘤生长指数为7.63±2.01,而rhTRAIL组和顺铂组分别为4.15±1.04和4.37±0.93,联合用药组则减低至1.69±0.37。rhTRAIL组、顺铂组的抑瘤率分别为36.8%和30.3%,联合用药组则增高达69.5%。rhTRAIL组、顺铂组和阴性对照组比较,差异具有显著性(P<0.05);联合用药组和其他3组比较差异均有显著性(P<0.01)。各组裸鼠的毒副作用轻微,治疗前后体重无明显变化。结论:rhTRAIL、顺铂均可抑制A549裸鼠移植瘤的生长,rhTRAIL和顺铂联用具有协同增效作用。rhTRAIL有望成为一种重要的生物制剂应用于肺癌的多学科综合治疗。     

优降糖致低血糖精神失常1例

患者男,60岁,因头痛、头晕20年,胸闷痛加重3天于1990年12月11日入院。无多饮、多食、多尿史,无精神病史及家族史。BP 17.5/12kPa,发育正常,营养一般,神清、肺无异常。心界向左扩大,心率76次/分,A_2>P_2,未闻及杂音。尿常规(一),肝功能正常。血肌酐137mmol/L,尿素氮5.5mmol/L,心电图示左室肥厚劳损。入院诊断高血压病Ⅱ期,冠心病。给极化液、复方降压片、消心痛等治疗。因查血糖9.5mmol/L,加服优降糖2.5mg,每日3次。服药第3日晨6时,患者步态蹒跚赤脚行至凉台,众目下乱解小便,随后进屋乱扔东西,不认人。劝之不反应。在病友床上抓到点心乱扔并吃了3块约25g,被逼上床,查血压18/12kPa,面色正常,无汗,心率72次/分,神经系统检查正常,半小时后,精神恢复正常,言谈举止均自然。追问对发作无记忆。夜间无心慌、饥饿等不适,但梦多。医生误诊为夜游症,继用原药治疗。次日6时,又突然谵语,怒目叫骂,随便打人。由多人按在床上,肌注冬眠灵50mg,急查血糖2.4mmol/l,输葡萄糖10g后恢复正常。仍对适才举上无记忆,事先无任何不适。停用优降糖,2日后复查血糖8.9mmol/L,经访两年无类似情况发生。     

70例青年人肺癌临床诊断分析

目的探讨青年人肺癌早期易延误诊治的原因,以期提高早期诊断率.方法回顾分析70例≤35岁青年人肺癌的临床诊治经过.结果70例中男性44例,女性26例,年龄18～35岁,其中60例首诊误诊,误诊率85.7%,12例先后予抗生素治疗,时间20 d～3个月,平均1.40个月.21例予抗痨治疗,时间1个月～12个月,平均6.98个月.结论对青年人肺癌认识和警惕性不高是造成早期延误诊治的主要原因;加强对青年人肺癌的认识和警惕性,重视常规胸片检查;对高度可疑肺癌者及经长期抗痨、抗炎治疗效果欠佳者应积极行手术病理和体液细胞学检查.早发现,早诊治可望改善青年人肺癌的预后.     

P53表达预测非小细胞肺癌化疗的耐药性及养肺解毒方的干预治疗

目的 探讨P53表达对预测非小细胞肺癌(NSCLC)化疗耐药性的意义及采用中药养肺解毒方对其的干预治疗.方法 选择Ⅲ、Ⅳ期NSCLC患者96例,经纤维支气管镜或者CT引导下95经皮细针肺活检获取标本,通过免疫组织化学、RT-PCR检测P53表达.依据其结果,分为P53阳性组(n=54)和P53阴性组(n=42).依据治疗方案的不同,每组再分为吉西他滨(健择,1250 mg/m2)+顺铂(70mg/m2)治疗组(T1组,P53阳性,27例;T2组,P53阴性,21例)和健择(1250mg/m2)+顺铂(70mg/m2)+养肺解毒方(随症加减,1剂/d,1次/d)治疗组(T3组,P53阳性,27例;T4组,P53阴性,21例).治疗周期为21 d,共4个周期.观察各组病例治疗后的有效率和中位生存期(MST).结果 阳性组P53 mRNA相对吸光度A值(57.65±4.78)明显高于阴性组(24.83±1.81)(P＜0.05).T2组治疗有效率42.9%(9/21)高于T1组29.6%(8/27),MST(9.55±0.54)个月也长于T1组(7.82±0.48)个月(均P＜0.05).T4组治疗有效率57.1%(12/21)高于T3组37.0%(10/27),MST(11.03±0.63)个月长于T3组的(8.78±0.51)个月(均P＜0.05).而且T3组的治疗有效率和MST明显优于T1组,T4组优于T2组(均P＜0.05).结论 P53蛋白和mRNA基因高表达可以预测非小细胞肺癌的耐药性.中药养肺解毒方可能通过降低非小细胞肺癌化疗耐药来提高疗效.