干扰趋化因子Fractalkine的表达对胰腺癌细胞株生物学功能的影响

目的 探讨阻断趋化因子Fractalkine(FKN)对胰腺癌细胞株SW-1990和PNAC-1生物学功能的影响.方法 腺病毒作为载体包装FKN-小干扰RNA(siRNA),转染人胰腺癌细胞株SW-1990和PNAC-1.应用克隆形成实验、MTT法和细胞侵袭实验检测FKN-siRNA转染与否、胰腺癌细胞增殖和侵袭力的变化.Western印迹法和RT-PCR检测转染FKN-siRNA的胰腺癌细胞FKN、TNF-α和IL-6蛋白和mRNA的表达.统计学处理采用单因素方差分析.结果 FKN-siRNA转染人胰腺癌细胞株SW-1990和PNAC-1后,与对照组的克隆数[分别为(1.97％±0.25％)和(1.77％±0.25％)]和阴性FKN-siRNA组的克隆数[分别为(2.10％±0.30％)和(1.97％±0.25％)]相比,细胞克隆增大,克隆数[分别为(5.27％±0.35％)和(4.60％±0.30％)]增多,差异均有统计学意义(F=113.51、103.86,P值均＜0.05).MTT实验48 h和72 h后,转入FKN-siRNA的转染人胰腺癌细胞株SW-1990和PNAC-1吸光度(48 h时分别为1.28±0.07和1.19±0.14;72 h时分别为1.49±0.11和1.52±0.16)高于对照组([48 h时分别为0.80±0.03和0.74±0.11;72 h时分别为0.89±0.03和0.93±0.04)和阴性FKN-siRNA组(48 h时分别为0.85±0.02和0.76±0.05;72 h时分别为0.89±0.02和1.07±0.09),差异均有统计学意义(F=83.80、71.99、17.19、23.51,P值均＜0.05).细胞侵袭实验中,转入FKN-siRNA的细胞侵袭力强于对照组和阴性FKN-siRNA组,差异有统计学意义(F=37.37、9.08,P值均＜0.05).FKN-siRNA转染后,SW-1990和PNAC-1细胞中,FKN蛋白(F=118.93、88.62)和mRNA(F=47.91、72.59)表达水平下降,同时TNF-α和IL-6的蛋白(FTNF-α=112.90、77.88,FIL-6=165.27、286.49)和mRNA(FTNFα=47.93、45.19,FIL-6=36.41、23.67)表达水平增高,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 应用siRNA技术静默趋化因子FKN的功能后,胰腺癌细胞株的增殖活性和侵袭力增强,表明FKN可能抑制了胰腺癌细胞的生物学活性.     

自动间歇腰椎牵引治疗老年人腰椎间盘突出症

腰椎间盘突出症是引起老年人腰腿痛最常见的原因之一。我院近2年采用自动间歇牵引治疗老年人腰椎间盘突出症62例，取得了较好的疗效。1资料和方法1．1观察组腰椎间盘突出症62例，男17例，女45例。年龄60～79岁，平均64．5岁。病程12d～27年。48例腰椎X线摄片和CT扫描，14例单纯X线摄片检查，其中单侧型59例，双侧型3例。突出部位于L3～44例，L4～516例，L5～S19例，2个及2个以上突出33例。伴有椎体缘骨质增生、后纵韧带肥厚和钙化26例，相对椎管狭窄症5例。治疗采用上海宏机通用机械厂生产的QL3型自动电子牵引治疗床，调控渐进式牵引，…     

中药透热疗法治疗腰椎间盘突出症临床研究

中药透热疗法治疗腰椎间盘突出症临床研究陈洁，韩晓燕，吴正山，刘志民，顾瑞峰，马万林，霍秀平，王伟（秦皇岛市第三医院０６６０００）张树贤，刘天武（秦皇岛市第一医院０６６０００）腰椎间盘突出症是引起腰腿痛最常见的疾病，青中年发病率高，该病的诱发包括：长期...     

y型干扰素、调节性T细胞与炎症性肠病

炎症性肠病（IBD）是一类病因和发病机制尚未完全明确的肠道疾病,目前认为免疫功能紊乱和免疫耐受异常是导致其发病的主要因素。肠黏膜免疫调节细胞和多种细胞因子参与了IBD的免疫反应和炎症过程,此文从炎性细胞因子y型干扰素、调节性T细胞的特性及它们在IBD中的作用和相互作用等方面简述了该领域的研究进展。     

抑制TLR4表达在雷公藤内酯醇增强胃癌BGC823细胞对5-FU敏感性中的作用

目的:观察雷公藤内酯醇(TPL)是否可通过抑制Toll样受体4(TLR4)表达以增强胃癌BGC823细胞对5-FU的敏感性,并分析其相关的下游分子机制。方法:采用CCK-8法检测不同浓度TPL以及TPL联合5-FU对BGC823细胞的增殖的影响。将BGC823细胞分为对照组、5-FU组(仅予5-FU)、TPL+5-FU组以及脂多糖(LPS)+TPL+5-FU组;Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测TLR4、磷酸化AKT(p-AKT)、Survivin、活性Caspase-3蛋白表达。结果:TPL可呈浓度-时间依赖性的抑制BGC823细胞增殖。与5-FU组比较,TPL联合5-FU后对BGC823细胞的抑制率明显增加(P<0.01),其5-FU的半数抑制浓度(IC₅₀)显著降低(P<0.01)。与5-FU组比较,TPL+5-FU组凋亡细胞数和细胞凋亡率均显著增加(P<0.01);而LPS+TPL+5-FU组凋亡细胞数以及细胞凋亡率均较TPL+5-FU组显著下降(P<0.05)...     

农村卫生投入存在的问题及对策

国家“五部委”制定的(关于我国农村实现“2000年人人享有卫生保健”规划目标》规定,县、乡政府年度卫生事业拨款应占两级财政支出的8％。这对农村卫生事业的发展起到了经济保障作用,很多地方都积极落实“五部委”要求的指标,推动了本地农村卫生事业的不断发展。但也应看到,在落实这一指标中还存在一些问题,在农村卫生投入上还需要进一步完善。     

微探头超声内镜在上消化道隆起性病变中的诊断价值

目的:探讨微探头超声内镜(mEUS)在上消化道隆起性病变中的诊断和治疗作用。方法:对71例上消化道隆起性病变的患者行微探头超声内镜检查,根据隆起性病变的起源层次,患者接受内镜下治疗、外科治疗或随访。结果:息肉8例,囊肿5例,异位胰腺3例,脂肪瘤4例,腔外压迫3例,黏膜下肿瘤48例,均明确了解了病变的起源层次。对部分患者行内镜下治疗、外科手术,术后病理诊断与超声诊断符合率达94%。结论:mEUS检查能明确上消化道隆起性病变的大小、起源层次,对治疗方案的选择有指导意义。     

调节性T细胞与炎症性肠病

炎症性肠病(IBD)包括溃疡性结肠炎(UC)和克罗恩病(CD),是一种病因和发病机制尚未完全明确的肠道疾病。肠黏膜免疫调节细胞和多种细胞因子参与免疫反应和炎症过程,免疫功能紊乱和免疫耐受异常是导致其发病的主要因素。此文就调节性T细胞与IBD的研究进展作一综述。     

联合干扰素-α和吉非替尼对结肠癌细胞的生物学作用研究

目的 探讨干扰素(IFN)-α、吉非替尼对人结肠癌细胞系HCT116的增殖、凋亡作用.方法 采用结肠癌细胞HCT116为研究对象,观察不同浓度IFN-α(50 U/ml和100 U/ml)、吉非替尼(0.5 μmol/L,2.5 μmol/L和5.0 μmol/L)单独和联合应用(IFN-α 50 U/ml+吉非替尼0.5 μmol/L)和不同作用时间点(作用24、48和72 h)对细胞的生物学作用.四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测药物对细胞的增殖抑制作用,光学显微镜观察细胞形态变化,流式细胞学检测细胞凋亡情况.采用SPSS 13.0软件进行统计学分析,两组间比较采用t检验,多组数据比较采用单因素方差分析.结果 IFN-α、吉非替尼单独和联合应用均能明显抑制HCT116的增殖(P值均 <0.05),且抑制程度与药物作用时间和药物浓度之间存在依赖效应.药物作用下可观察到细胞呈现凋亡形态学改变,流式细胞学结果显示HCT116细胞凋亡率明显增加,IFN-α(50 U/ml)、吉非替尼(0.5 μmol/L)单独和联合应用72 h后细胞凋亡率分别为15.6%±0.6%、13.6%±0.4%和31.2%±0.3%明显高于对照组的6.8%±0.3%,差异均有统计学意义(P值均<0.01).结论 IFN-α、吉非替尼均能抑制HCT116细胞生长并诱导细胞凋亡,两者联合应用具有协同增效作用.

Abstract：

Objective To investigate the effects of interferon-α (IFN-α) and gefitinib on the proliferation and apoptosis of human colon cancer cell line HCT116. Methods Colon cancer cell line HCT116 was selected as research objective. The biological effects of IFN-α and gefitinib alone or combined on the cells were observed at different time point (after worked for 24, 48 and 72 hours). The proliferation inhibition of the medicine on the HCT116 cells was measured by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay. Morphologic changes were observed under optical microscope. Apoptosis was measured by flow cytometry (FCM). The results were analyzed with SPSS 13.0 software, two groups compare was tested by t test, and single factor variance analysis was for multiple group data compare. Results IFN-α and gefitinib alone or combined could significantly inhibit the proliferation of HCT116 cells (P<0.05), and there was a time and dose-dependent manner between the degree of inhibition and the working time and concentration of the medicine. With the work of the medicine, apoptosis morphologic changes were observed in the cells. And FCM result indicated that the apoptosis rate significantly increased. After treated with IFN-α and gefitinib alone or combined for 72h, the cell apoptosis rate were 15.6%±0.6%, 13.6%±0.4% and 31.2%±0.3% respectively, which was obviously higher than control group (6.8%±0.3%, P<0.05). Conclusion Both IFN-α and gefitinib were able to inhibit the proliferation and induce apoptosis of HCT116 cells moreover, and a synergistic effect was observed while combine used there two medicines.