华南地区质粒介导超广谱β-内酰胺酶的基因分型研究

目的：了解华南地区质粒介导超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）的发生率及基因型特征。方法：收集2001年4月－9月革兰阴性菌临床分离无重复株共1184株，采用NCCLS表型筛选和确认试验进行了ESBLs产酶的识别，E-test法检测各亚型ESBLs的MICs值，质粒接合及电转化实验，耐药质粒提取及酶切指纹分析，等电聚焦电泳，PCR通用引物扩增TEM、SHV、CTX－M、VEB、PER、SFO基因及其克隆测序进行ESBLs基因分型和质粒定位。结果：革兰阴性苗ESBLs的检出率为14．6％（173／1184）；获得产ESBLs接合子67株，电转化子11株，其中产CTX－M－14型ESBLs为33．3％（26／78）、CTX－M－3为23．1％（18／78）、CTX－M－9为14．1％（11／78）及SHV-2a为2．6％（2／78），未定型为5．1％（4／78）；29．5％（23／78）野生株伴广谱酶TEM－1或SHV－1型；各型ESBLs基因约定位在35－190kb大小的可接合性低执行者拷贝数天然质粒上；CTX－M型ESBLs以对头孢噻肟高水平高耐为特征。结论：华南地区质粒介导的ESBLs以CTX－M型衍生酶为主，其次是SHV型酶。     

MRSA PBP2a表达的影响因素及MecA基因的检测价值

【目的】探讨温度、pH、盐浓度对甲氧西林耐药金葡菌 (methicillin resistantstaphylococcusaureus,MRSA)青霉素结合蛋白2a(penicillin bindingprotein ,PBP)表达的影响 ,以及PBP2a编码基因MecA的检测价值。【方法】采用聚合酶链式反应(PCR)检测MRSA特异性MecA基因和美国临床实验室标准委员会 (NCCLS)推荐的琼脂板稀释法 (32℃ ,pH7 2 ,40g/LNaCl苯唑西林MIC≥ 4mg/L)筛选MRSA。检测 2 0株MRSA在不同温度、pH、盐浓度时对苯唑西林、头孢唑林和头孢他啶的体外药物敏感性 ,测定MIC范围 ,MIC50 和MIC90 ;SDS PAGE分析 10株MRSA膜青霉素结合蛋白 (PBP2a)在不同培养条件时表达数量的差异 ,并进行配对差值的t检验。【结果】 180株金葡菌检测出MecA基因阳性MRSA 5 6株 ,按琼脂板稀释法检出 5 2株MRSA ,4株未被检出 (苯唑西林MIC分别为 :2 ,2 ,1,0 5mg/L) ,37℃、pH 5 2和 9g/LNaCl分别与 32℃、pH 7 2和 40 g/LNaCl条件下诱导 10株MRSA ,所表达的PBP2a含量前后比较差值有显著性 (P∶0 .0 2～ 0 .0 5 ,0 .0 1～ 0 .0 0 5 ,0 .0 2～ 0 .0 5 )。【结论】不同温度、pH、盐浓度通过诱导耐药蛋白PBP2a的表达明显影响MRSA对苯唑西林、头孢唑林和头孢他啶耐药水平 ,而其MecA基因却不受培养条件的影响 ,可以快速检测MR     

E-test试条对异质性耐万古霉素葡萄球菌的检测

目的 探讨E—test对异质性耐万古霉素葡萄球菌的检测价值。方法 从连续接触万古霉素的脑心浸液琼脂(BHIA)平板上挑取万古霉素异质性耐药葡萄球菌苗株，应用万古霉素E—test试条、药敏纸片和琼脂平板对倍稀释法测定药敏结果。结果 E—test检测的对万古霉素异质性耐药葡萄球菌MRSHl09，MRSH2，MRSH13，MRSH31，MRSH60，MRSHl08，MRSH73，MRSH97，MRSH102的MIC依次为：16、24、48、48、16、32、24、24mg/L，其中耐药7株占77．8％(7/9)，中介2株占22．2％(2/9)；琼脂对倍稀释法的MIC为：16、32、64、32、16、32、32、16、32mg/L，耐药6株占66．7％(6/9)，中介3株占33．3％(3/9）；药敏纸片直径依次为：14、12、10、11、10、15、13、10，13mm，敏感率为11．1％(1/9)。结论 E—test可以便捷直观地鉴定对万古霉素异质性耐药葡萄球菌的药敏结果，与琼脂平板对倍稀释法接近，优于纸片法。     

INF-γ基因转染肺泡巨噬细胞抗肿瘤活性的研究

背景与目的活化的肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)具有抗肿瘤功能,γ干扰素(interferon-γ,INF-γ)是巨噬细胞的活化因子之一,其与巨噬细胞体外共同培养可增强巨噬细胞的免疫功能。本研究旨在了解人INF-γ基因体外转染肺癌患者的AM后对其抗肿瘤功能的影响。方法经肺泡灌洗获AM,分离纯化,以INF-γ基因转染AM,以RT-PCR方法和ELISA方法检测人INF-γ基因的成功转染;分别检测AM产生TNF-α、NO、IL-1的水平及AM杀伤L1210细胞的活性。结果 RT-PCR方法和ELISA方法均显示人INF-γ基因已成功转染AM;经人INF-γ基因转染后,肺癌患者AM产生TNF-α、NO、IL-1的水平较对照组明显升高(P<0.05);AM杀伤L1210细胞的活性较对照组明显增强(P<0.05)。结论 INF-γ基因体外转染肺癌患者的AM,能使AM的抗肿瘤活性明显增强。     

成人肠杆菌科菌血症病原菌的临床分布及耐药性分析

目的了解医院内成人肠杆菌科菌血症病原菌的临床分布及耐药现状,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法收集成人菌血症患者血培养标本进行病原学鉴定,分析成人肠杆菌科菌血症病原菌的临床分布及其对常见抗菌药物的敏感度,比较产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性与阴性的肠杆菌科病原菌对常见抗菌药物的耐药率。结果共分离出成人肠杆菌科菌血症病原菌354株,主要来源于血液科、感染科、急诊科、肝胆外科,主要菌种为大肠埃希菌、克雷伯杆菌、阴沟肠杆菌。其中,对大肠埃希菌耐药率较低的抗菌药物有亚胺培南、美罗培南、厄他培南、哌拉西林/克拉维酸钾、替卡西林钠/克拉维酸钾、阿莫西林/克拉维酸钾、头孢西丁钠,耐药率均低于15%;耐药率较高的抗菌药物有氨苄西林、哌拉西林、头孢呋辛、头孢唑林钠、头孢曲松钠、头孢噻肟钠,耐药率均不低于50%。ESBLs阳性108株,检出率为31%。ESBLs阳性肠杆菌株对常见抗菌药物的耐药率普遍高于ESBLs阴性肠杆菌株(P均<0.05),但两者对亚胺培南、美罗培南、厄他培南、哌拉西林/克拉维酸钾、替卡西林钠/克拉维酸钾的耐药率相近(P均> 0.05)。共检出耐碳青霉烯类肠杆菌科菌...     

广州地区医院获得性肺炎耐药性监测

目的明确广州地区医院获得性肺炎(HAP)的病原菌构成及耐药情况。方法2004年1月-2005年10月,在广州市6所三级甲等医院发生HAP的病原菌进行鉴定,纸片扩散法检测其耐药性。结果HAP前8种病原菌分别为铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、白色假丝酵母菌、嗜麦芽寡养单胞菌、鲍氏不动杆菌、洋葱伯克霍尔德菌、大肠埃希菌等;革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌均严重耐药,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌占91.8%,溶血葡萄球菌全部耐甲氧西林。结论广州地区HAP耐药严重,必须加强防治措施。     

头孢丙烯治疗下呼吸道细菌性感染的临床评价

目的：评价头孢丙烯治疗下呼吸道细菌性感染的有效性和安全性。方法：采用随机对照开放试验方法。选用头孢呋辛片为对照药，共治疗下呼吸道细菌感染81例，头孢丙烯组40例，500mg；头孢呋辛组41例，500mg，均为每日两次，疗程7－14d。结果：头孢丙烯组及头孢呋辛组有效率分别为90．0％和80．5％，细菌阳性病例有效率分别为82．1％，和72．4％，本试验共分离致病菌57析，细菌清除率分别为82．1％和75．9％，安全性评价分别为41例和43例，不良反应发生率分别为7．3％和9．3％，经统计学处理差异无显著性（P＞0．05），结论：采用头孢丙烯治疗急性下呼吸道细菌感染安全，有效。     

活动性肺结核与细胞因子

肺结核的发生与机体细胞免疫功能失衡有关。活动性肺结核可认为是保护性免疫反应减弱的结果。细胞因子(cytokine，CK)可精确协调T淋巴细胞活化和单核细胞到炎症部位聚集，在结核病保护性免疫反应中起关键作用。深入探讨活动性肺结核患者CK变化可加深理解肺结核病的保护性和病理性免疫反应，为结核病预防和治疗开辟新的途径。     

转移性肺癌并发肺曲菌病1例报告

病例报告女,65岁,住院号311330。患者于入院前2周开始无明显诱因出现头晕、乏力、纳差、失眠伴少许干咳。两周来症状进行性加重,经胸片检查发现双肺有散在团块状阴影,于1989年1月3日入院。起病以来无发热、气促、胸痛、咳痰,无心悸、出汗、食量增多等。既往有高血压史2年,不规则服降压药。饲养白鸽史1年。     

白细胞介素-12在荷瘤肺的变化

目的 为了观察肺癌患者肺泡巨噬细胞的抗肿瘤免疫功能。方法 以Elisa法检测肺癌患者荷瘤侧及非荷瘤侧肺泡巨噬细胞产生的IL－12，同时外周血单核细胞产生的IL－12，设良性肺病组为对照组。结果 肺癌组非荷瘤侧肺泡巨噬细胞产生IL－12较对照组低，而荷瘤侧肺泡巨噬细胞产生IL－12较对照组高；肺癌组外周血单核细胞产生IL－12较对照组低。结论 肺癌患者机体存在抗肿瘤免疫缺陷，但肺癌组织临近肺泡巨噬细胞抗肿瘤免疫活性增强，这可能是机体自身的一种抗肿瘤免疫调节。