贵州省2019-2021年人源和猪源戊型肝炎病毒基因特征

目的 分析贵州省部分地区人源和猪源戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)流行株基因特征。方法 2019-2021年在贵州省医疗机构收集急性HEV感染者(抗-HEV IgM阳性)血清标本,在屠宰场收集猪胆汁和血清标本,提取HEV核酸,对HEV ORF2区基因进行扩增和测序,构建系统进化树,分析基因型、基因亚型及其核苷酸和氨基酸同源性。结果 从450例急性HEV感染者标本和196份猪标本中共获得53条人源和2条猪源HEV序列。人源序列的核苷酸和氨基酸同源性分别为81.39%-100%和95.92%-100%,猪源序列分别为87.40%和100%;人源和猪源HEV均与HEV基因4型参考株的核苷酸同源性最高,分别为89.93%和89.83%。55条HEV序列位于系统进化树的3个分支,其中24条与4b亚型、20条与4a亚型、11条与4d亚型参考株处于同一分支,且核苷酸同源性最高,分别为95.54%、93.10%、95.72%。2条人源序列各发生1个位点的氨基酸替换。结论 2019-2021年贵州省部分地区人群和猪群中HEV优势流行株为基因4型,包括4b、4a和4d亚型,氨基酸...     

国产抗乙型肝炎病毒核心抗原抗体免疫球蛋白M检测试剂的比较

目的为中国急性乙型病毒性肝炎（乙肝）监测,筛选合适的抗乙肝病毒核心抗原抗体免疫球蛋白M（Immunoglobulin M Antibody to Hepatitis B Virus Core Antigen,Anti-HBc-IgM）检测试剂。方法选择市场销量较大的三种酶联免疫吸附试验Anti-HBc-IgM检测试剂,平行检测参比系统各3次,比较各试剂的组内相关系数（Intraclass Correlation Coefficient,ICC）、变异系数,以评价试剂的可靠性,绘制受试者工作特征曲线（Receiver Operating Characteristic,ROC）,计算ROC下面积（Area Under Curve,AUC）、部分（Partial）AUC（pAUC）、固定特异度下灵敏度[Sensitivity at a Fix Specificity,Se（FPR=e）],以评价试剂的真实性。结果三种试剂的ICC均接近于1,一致性均好,两两比较中A试剂稳定性最好,变异性最小（Bootstrap法,P〈0.05）。B试剂ROC位于最上方,AUC中位数最大,和A、C比较均有统计学意义（Bootstrap法,P〈0.05）;B和C、A试剂的pAUC中位数和Se（FPR=0.05）中位数差异无统计学意义。结论符合国家标准的三种试剂,以雅培试剂作为参照相比,综合评价结果,B试剂较好。     

乙型肝炎疫苗长期免疫效果评价及免疫持久性研究

目的 评价我国新生儿乙型肝炎(乙肝)疫苗免疫后的长期保护效果,为乙肝防控和乙肝疫苗HepB免疫策略提供参考.方法 用横断面调查和分层整群抽样的方法,在乙肝疫苗免疫效果观察监测点收集1987-1996年出生(13～22岁)、全程接种乙肝血源疫苗的人群,以及1997-2008年出生(1 ～ 12岁)、全程接种乙肝重组酵母疫苗人群的血清样本和资料;用微粒子酶免疫法检测HBV感染指标,结合本底资料和乙肝疫苗免疫史进行分析.结果 在河北正定、广西隆安、上海黄浦、青海同德和湖南湘潭5个监测点共收集1～12岁重组酵母疫苗免疫人群样本8133例,13 ～22岁血源疫苗免疫人群样本4848例,5个监测点的HBsAg平均阳性率均显著低于本底值,疫苗总体保护效果分别为86.04％～96.14％;河北正定、青海同德和湖南湘潭的年龄分布差异无统计学意义,广西隆安和上海黄浦的结果显示19～22岁人群HBsAg阳性率偏高;Anti-HBs阳性率随免疫年龄增长而下降,重组疫苗免疫人群从1～2岁组的86.84％下降至11～12岁组的46.40％,17 ～18岁组的Anti-HBs阳性率处于较低水平,而19～22岁组出现升高;几何平均浓度(GMC) ＜10 mIU/ml(Anti-HBs阴性)的比例随着年龄增长逐渐升高,100～999.99 mIU/ml和≥1000 mIU/ml的比例随着年龄的增长呈现下降趋势.结论 血源疫苗免疫后13～ 22年、重组酵母疫苗免疫后1～12年的总体保护效果良好;不必开展加强免疫,建议加强监测18岁以上人群的Anti-HBs水平,对GMC＜10 mIU/ml者开展加强免疫.     

4种戊型肝炎病毒IgM抗体诊断试剂在一起暴发疫情中的性能比较

目的 比较4种戊型肝炎(戊肝)病毒(hepatitis E virus,HEV)IgM抗体诊断试剂盒在1起暴发疫情中的诊断性能。方法 应用4种试剂检测一起戊肝暴发疫情中研究对象的急性期血清标本中的IgM抗体,并检测HEV RNA;进行统计学分析。结果 MP、科华、万泰和贝尔公司试剂的HEV IgM抗体检出率分别为40.00%(108/270)、29.26%(79/270)、28.52%(77/270)和20.37%(55/270),一致率为78.52%(212/270);对HEV RNA阳性血清标本,MP、科华和万泰试剂的检测灵敏度均为66.67%(32/48),贝尔试剂灵敏度为58.33%(28/48);对急性戊肝临床诊断病例血清标本,MP、科华和万泰试剂检测灵敏度为69.81%(37/53),贝尔试剂灵敏度为60.38%(32/53);贝尔与科华、贝尔与万泰试剂对HEV RNA阳性或急性戊肝临床诊断病例血清标本的HEV IgM抗体检出率差异具有统计学意义(McNemar检验：P<0.05),而其他试剂的检出率之间差异无统计学意义(McNemar检验：P>0.05);对H...     

缩宫素引产持续时间与宫缩乏力性产后出血的相关性

目的:分析小剂量缩宫素引产用药持续时间与宫缩乏力性产后出血相关性。方法:对符合引产指征的晚期妊娠孕妇予小剂量缩宫素引产,进行临床资料的回顾性分析,比较用药24、48、72 h内分娩宫缩乏力性产后出血发生率。结果:予小剂量缩宫素引产,在24 h内分娩的产妇与正常分娩产妇宫缩乏力性产后出血发生率差异无统计学意义(P>0.05)。用药48、72 h内分娩宫缩乏力性产后出血发生率明显增加,且随着时间的延长宫缩乏力性产后出血发生率呈现递增趋势(P<0.05)。结论:缩宫素引产用药持续时间越久,宫缩乏力性产后出血发生几率越大。对于开始静脉滴注缩宫素引产24 h仍未分娩的产妇,提早做好产后出血的抢救工作很有必要。     

牡蛎中戊型肝炎病毒检测方法的比较

目的对牡蛎中戊型肝炎病毒(hepatitis E virus, HEV)检测方法进行比较, 为牡蛎中HEV的检测提供技术参考。方法参考欧盟ISO/TS 15216-2∶2019, 用蛋白酶K消化法对人工污染HEV粪便悬液的牡蛎消化腺标本进行前处理后, 分别用四种核酸提取方法进行HEV RNA提取, 通过Real time RT-PCR检测, 比较HEV回收率;分别用蛋白酶K消化法、蛋白酶K消化+PEG沉淀法和蛋白酶K消化+PEG沉淀+氯仿抽提法对人工污染的牡蛎消化腺标本进行前处理, 用最优核酸提取方法进行HEV RNA提取, 通过Real time RT-PCR检测, 比较三种前处理方法的HEV回收率和抑制率。将最优HEV检测方法应用于市售牡蛎标本检测。结果四种核酸提取方法的HEV回收率分别为1.37%, 2.50%, 4.24%和7.56%, 差异有统计学意义(F=847.220, P<0.001);三种前处理方法的HEV回收率分别为6.02%, 13.65%和21.17%, 差异有统计学意义(F=16.800, P<0.001), 蛋白酶K消化+PEG沉淀+氯仿抽提法回...     

不同消毒剂对HBV核酸和表面抗原的作用效果研究

目的 评价实验室常用的消毒剂对乙型肝炎病毒(HBV)的核酸和表面抗原的作用效果。方法 采用悬液法将不同消毒剂与HBV混合,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)评价消毒剂对乙肝表面抗原(HBsAg)的作用效果,通过实时荧光定量PCR评价消毒剂对HBV DNA的作用效果。结果 对于高浓度的HBV核酸和HBsAg,1%卫可(Virkon)处理1h可使HBV DNA和HBsAg变为阴性,含氯消毒剂和75%乙醇仅对低浓度HBV血清有效,而过氧化氢对所有浓度的HBV核酸和HBsAg效果都不明显。结论 当实验室发生HBV阳性血清溅洒等生物安全事故时,采用20~40倍体积1%卫可处理1h较为适宜。     

戊型肝炎病毒3种核酸检测方法的比较

目的 比较戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)3种核酸检测方法的敏感性及特异性。方法 将HEV基因4型代表株的开放阅读框(open reading frame,ORF)2区部分基因序列克隆至pUC57载体,合成质粒DNA,使用A、B两种实时定量方法检测该质粒,比较最低检出限;使用其他标本做特异性检测。使用3种方法平行检测急性戊肝病例血清标本,比较检测结果。结果 A、B方法对质粒DNA的最低检出限均可达35拷贝数/反应,特异度均为100%;A、B和C方法对急性戊肝病例血清标本HEV RNA检出阳性率分别为47.8%(43/90)、43.3%(39/90)和41.1%(37/90),一致率为88.9%(80/90),3种方法的检出率之间无统计学差异(χ2＝0.8414,P＝0.6566)。A方法检测Ct值≤34.6或者B方法检测Ct值≤35.6的血清标本,C方法扩增成功率为100%。结论 A方法的敏感性和特异性均较高,C方法为灵敏的基因检测方法。     

河北省某“献血村”人群乙型病毒性肝炎流行现状及危险因素分析

目的了解单采血浆还输血球的有偿献血20年后,河北省某"献血村"人群乙型病毒性肝炎(乙肝)的流行现状,探讨乙肝传播的危险因素,为预防控制乙肝在该人群传播提供参考。方法以河北省某"献血村"常住村民为研究对象,进行问卷调查、采集静脉血,利用酶联免疫吸附试验检测乙肝病毒(Hepatitis B Virus,HBV)血清学标志物,采用统计分析系统9.2软件对数据进行统计分析。结果河北省某"献血村"人群乙肝病毒表面抗原(HBV Surface Antigen,HBs Ag)和抗乙肝病毒核心抗原抗体(Antibody to HBV Core Antigen,Anti-HBc)流行率分别为4.46%(22/493)和33.87%(167/493),均接近河北省自然人群水平。母婴传播是导致HBs Ag阳性的主要因素[母亲HBs Ag阳性组vs阴性组:比值比(Odds Ratio,OR)=13.177,95%可信区间(Confidence Interval,CI):2.457~70.669];接种乙肝疫苗(Hepatitis B Vaccine,Hep B)是Anti-HBc阳性的保护因素(接种组vs未接种组:OR=0.014,95%CI:0.003~0.058)。结论 HBV在河北省某"献血村"人群主要通过母婴传播。目前预防控制乙肝的策略应放在发现HBs Ag阳性的孕产妇,阻断母婴传播,以及提高成年人群Hep B的接种率。     

国产甲型肝炎病毒总抗体检测试剂的评价

目的比较国内常用抗甲型肝炎(甲肝)病毒总抗体(Total Antibody to Hepatitis A Virus,Anti-HAV)酶免疫测定(Enzyme Immunoassay,EIA)试剂的性能,为甲肝血清流行病学调查试剂的选择提供参考。方法以雅培(Abbott)HAVAb2.0试剂的检测结果作为金标准,确定参比系统的总Anti-HAV含量。用A、B两种国产总Anti-HAVEIA试剂,平行检测参比系统8遍,记录CO/S值并作ln(CO/S+0.1)转换,通过广义线性化估计方程(Generalized Estimating Equation,GEE)模型估计各次测试样本的阳性概率,计算比较两种试剂的可靠性指标和真实性指标:组内相关系数(Intraclass Correlation Coefficient,ICC)、变异系数(Coefficient of Variability,CV)和全部受试者工作特征(Receive Operation Characteristic,ROC)曲线下面积和部分ROC曲线下面积,以及固定特异度下的灵敏度[Sensitivityata Particular False-Positive-Rate(1-Specificity),Se(FPR=e)],对比阐明两者之优劣。结果 A试剂的ICC和CV分别为0.9971和5.7840%,B试剂的为0.9952和6.2931%(Bootstrap法,P<0.05);A试剂的ROC曲线下面积(Areaunder Curve,AUC)和部分(Partial)ROC曲线(特异度为0.9～1)下面积(pAUC)分别为0.9557和0.0717,B试制的为0.9404和0.0663(Bootstrap法,P<0.05);在特异度为0.920～0.970时,间隔0.005计算的Se(FPR=e),在特异度为0.945、0.950、0.955、0.960几个观察点时,A试剂的灵敏度>B试剂(Bootstrap法,P<0.05);而在特异度为其他观察点时,对应灵敏度的差异尚无统计学意义(Bootstrap法,P>0.05)。结论 A、B两种试剂均表现出良好的诊断能力,虽然某些指标的差异有统计学意义,但差异有无实际意义,值得进一步探讨。在实际应用时,可根据具体情况进行选择。