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目的制备高纯度的猪链球菌烯醇化酶(SsEno)重组蛋白并通过抗体封闭实验评价SsEno对猪链球菌抗吞噬能力的影响,鉴定其与人纤维蛋白原(hFg)结合的活性。方法构建hisSsEno重组表达质粒,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE分析蛋白表达情况,镍柱亲和纯化目的蛋白并用Western blot法进行验证。用hisSsEno免疫兔制备其高滴度的抗血清并通过人全血杀伤模型评价Eno对猪链球菌抗吞噬能力的影响。采用ELISA和Far-Western blot法鉴定hisSsEno与hFg结合活性。结果成功构建了His标签蛋白原核表达质粒并获得了高纯度的hisSsEno重组表达蛋白。SsEno免疫的抗血清能显著降低强致病的猪链球菌05ZYH33在人全血中的存活能力。hisSsEno能特异地与hFg结合。结论获得了hisSsEno重组表达蛋白,通过抗体阻封和全血杀伤模型发现SsEno是猪链球菌潜在的抗吞噬因子,且hisSsEno能特异性结合hFg。 相似文献
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甲苯胺蓝染色方法改进 总被引:1,自引:0,他引:1
染料的主要成分是色原,能使染料发生颜色的原子团称发色团。一种染料中可含有一个或多个发色团。甲苯胺蓝属噻嗪类染料,为碱性染料,可作细胞核染色剂。这类染料一般有2个发色团,一个是口印胺基,一个是醌型苯环。醌型苯环有明显的异染性,可分别表示为α-异染性(阴性),呈蓝色,即正染性;β-异染性(弱阳性),为紫色或紫红色;γ-异染性(阳性),为红色。但此种异染性染色后经酒精脱水时,又转变成正色性。此染料特点是对于神经元的尼氏体染色效果好,还可染黏液、软骨基质、肥大细胞等。 相似文献
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笔者总结了从事人体寄生虫学实验教学多年的工作经验,对于学生使用普通光学显微镜出现的问题进行了汇总,并提出了自己的解决方法。目的是引起同行的注意,在实验课上引导学生养成良好地使用普通光学显微镜的习惯,以利于提高教学质量和学生的实际操作能力。 相似文献
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目的观察妇炎洁、肤阴洁、艾伦和洁尔阴等四种妇科洗剂体外抗阴道毛滴虫的效果。方法培养三代后的阴道毛滴虫用培养基稀释成一定浓度的细胞悬液。实验孔:将以上四种妇科洗剂的原液用培养基稀释成不同浓度(相对浓度),加入96孔细胞培养板中(0.1ml/孔)。对照孔:加入培养基0.1ml/孔。每孔中均加入原虫0.1ml/孔(含虫5000个)。用MTT法检测实验孔和对照孔的各孔吸光度(A)值。结果在20,10,5,2.50,1.25ml/dl的相对浓度时,对阴道毛滴虫的相对抑制率分别为:妇炎洁为72.8%,65.2%,61.6%,54.8%和53.8%;肤阴洁为48.5%,44.0%,36.7%,31.7%和24.0%;艾伦为35.0%,28.4%,28.1%,10.7%和8.4%;洁尔阴为46.1%,37.3%,31.7%,27.5%和24.0%。妇炎洁、肤阴洁与洁尔阴各浓度之间抑制率比较差异有统计学意义(P〈0.05);艾伦各浓度之间抑制率比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论①妇炎洁、肤阴洁、艾伦和洁尔嬲等四种妇科洗剂在体外均有一定的抗历道毛滴虫的作用;抗阴道毛滴虫效果与洗剂的浓度有关;浓度越高,效果越好。②在相同的浓度时,妇炎洁的抗阴道毛滴虫效果最强,肤阴洁和洁尔阴次之,艾伦的作用最弱。 相似文献