自身γ δ T细胞治疗乙型肝炎的临床观察

目的观察γδT细胞和HepG212115细胞共培养后对其HBV复制和HBeAg表达的影响。评估用γδT细胞过继回输治疗乙型肝炎的疗效。方法在体外用异戊希焦磷酸法和IL-2激活人外周血PBMCs,细胞经10 d培养后用流式细胞术检测培养前后γδT细胞含量和Perforin、GranB、NKG2D表达量;将γδT细胞与HepG212115细胞按一定比例共孵育培养后,ELISA法测定上清中HBeAg的表达。将培养10 d的γδT细胞回输给患者;患者一个疗程接受γδT细胞总数在0.8×1010～7.0×1010。结果培养10 d时γδT细胞数为91.27%,其细胞表达的Perforin、GranB、NKG2D分别为和62.8%、72.7%和60.8%。所扩增的γδT细胞能够部分抑制HepG212115细胞中HBeAg的表达。治疗前138例HBeAg阳性者,治疗后有76例HBeAg（55.1%）转阴。总有效率为77.51%。结论γδT细胞能够降低HepG212115细胞中HBeAg表达;用自身γδT细胞过继回输治疗乙型肝炎后患者的HBeAg＋HBV-DNA转阴率达74%。该治疗无毒副作用,对乙型肝炎是一种安全有效的治疗方法。     

慢性丙型肝炎患者干扰素诱发甲状腺炎的研究进展

IFN诱发的甲状腺炎(IIT)是慢性丙型肝炎(CHC)患者接受IFN治疗时最常见的内分泌疾病之一,引起了临床广泛关注.IIT的发病机制可能为IFN引起的免疫调节异常和(或)对甲状腺的直接毒性作用.IIT可分为自身免疫紊乱导致的Graves病(GD)、桥本甲状腺炎(HT)和无症状的甲状腺自身抗体阳性;对甲状腺直接毒性作用诱发的破坏性甲状腺炎和非自身免疫性甲状腺功能减退.检测基线促甲状腺激素(TSH)及甲状腺抗体水平、治疗中密切监测TSH有利于及时发现IIT并进行处理,减少其发生和发展.大多数IIT是可控的而无需停止IFN治疗;非自身免疫性甲状腺炎通常较容易恢复.     

不同刺激因子对人CIK细胞功能影响

本研究观察不同的细胞刺激因子共刺激对人CIK细胞增殖和功能的影响。用淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞(PBMNC),按常规方法从PBMNC培养细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞),然后根据加入CD28 mAb、IL-15和IL-21将实验分为5组:对照组(CIK),CB28+IL-15+IL-21组,IL-15+IL-21组,CD28+IL-15组和CD28+IL-21组。用全自动五分类血液分析仪计数CIK细胞的增殖能力;用流式细胞术测定细胞刺激因子诱导的CIK细胞的粒酶B(granzyme B),穿孔蛋白(perforin)和CD107α等分子的变化;用ELISA法检测细胞因子IL-10、IL-12、INF-γ和TNF-α的含量;乳酸脱氢酶释放法测定细胞刺激因子共刺激的细胞对人肺癌细胞株A549(A549)、乳腺癌细胞株MFC-7(MFC-7)和人黑素瘤细胞株HME1(HME1)的杀伤活性。结果表明,在CIK细胞培养体系中加入不同的刺激因子,细胞增殖能力有明显的差异,以含CD28、IL-15和IL-21组细胞增殖倍数最高,在培养第10日时该组的增殖倍数为255.3±6.3,明显高于对照组,IL-21+IL-15组和CD28+IL-21组细胞增殖倍数分别为166.6±13.5、199.4±15.0和228.8±16.6(P<0.05),添加CD28和IL-15组则穿孔蛋白含量明显高于其他组。所有共刺激组的穿孔蛋白、粒酶B和CD107a表达百分率均明显高于对照组(P<0.05)。对A549、MFC-7和HME1细胞杀伤活性以含CD28+IL-15组最高(82.2%、59.3%和70.6%),明显高于对照组(60.9%、49.6%和48.4%)(P<0.05)。在CIK细胞培养体系中增加CD28+IL-15+IL-21组中细胞分泌IFN-γ量显著高于其他各组(P<0.05)。结论:不同刺激因子活化的CIK细胞的增殖能力、分泌细胞因子和杀伤活性有明显差异,在培养体系中增加相应的细胞刺激因子对细胞功能定向培养有一定意义。     

老年病人髋部骨折术前及术后谵妄的危险因素

本文旨在评估髋部骨折术前及术后谵妄的危险因素。选取364例患有及未患认知障碍的老年病人，年龄在65岁及以上。应用谵妄评定方法（GAM）对病人每日进行评估，     

生食黄独零余子致肝损伤

1例34岁女性患者为治疗鼻炎自行间断生食黄独零余子7或8个,间隔1年后再次生食黄独零余子1个,4 d后患者出现恶心及皮肤、巩膜黄染。实验室检查：丙氨酸转氨酶（ALT）732 U/L,天冬氨酸转氨酶（AST）597 U/L,γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）204 U/L,碱性磷酸酶（ALP）202 U/L,总胆红素（TBil...     

前列地尔联合恩替卡韦治疗合并腹水的乙型肝炎肝衰竭效果观察

目的观察前列地尔联合恩替卡韦治疗乙型肝炎肝衰竭合并腹水患者的临床效果。方法选取2011年9月-2014年6月于中国人民解放军九七医院住院治疗的乙型肝炎肝衰竭合并腹水患者84例,随机分为治疗组(n=42)和对照组(n=42)。两组患者均予保肝、退黄、利尿、白蛋白营养支持等常规治疗,对照组加用恩替卡韦,治疗组加用前列地尔和恩替卡韦联合治疗。观察记录患者治疗前后的肝功能指标(TBil、ALT、AST)、PTA、HBV DNA载量、临床疗效及24 h尿量和腹水消退情况。计量资料组间比较采用t检验,计数资料组间比较采用χ2检验。结果 2组内治疗前后肝功能指标(TBil、ALT、AST)、PTA、HBV DNA水平比较差异均有统计学意义(P值均0.05);治疗组与对照组间治疗后TBil、ALT、AST、PTA比较差异均有统计学意义[TBil:(197.4±47.6)μmol/L vs(287.5±150.6)μmol/L,t=2.30,P0.05;ALT:(189.4±63.8)U/L vs(263.4±79.5)U/L,t=2.73,P0.05;AST:(138.7±87.5)U/L vs(250.8±90.4)U/L,t=3.43,P0.05;PTA:(63.5±17.0)%vs(45.5±15.1)%,t=2.60,P0.05]。治疗组患者临床疗效的显效率和总有效率显著高于对照组(显效率:40.48%vs 28.57%,χ2=4.32,P0.05;总有效率:85.71%vs66.67%,χ2=4.20,P0.05);治疗组患者腹水消退情况的显效率和总有效率显著高于对照组(显效率:47.62%vs 23.81%,χ2=13.20,P0.05;总有效率:88.10%vs 52.38%,χ2=12.81,P0.05)。结论前列地尔联合恩替卡韦治疗乙型肝炎肝衰竭临床效果好,可有效改善预后,安全性好,值得推广。     

阿托伐他汀对人NK 细胞杀伤结肠癌细胞的影响及其机制研究

目的:探讨阿托伐他汀对人NK 细胞杀伤结肠癌细胞的影响及其机制。方法:不同浓度的阿托伐他汀作用于3 株结肠癌细胞(HCT-116、SW-480、Caco-2),CCK-8 法测定阿托伐他汀对结肠癌细胞生长抑制率的影响。SCGM 培养基体外扩增人NK 细胞,自动生化分析仪测定NK 细胞对3 株结肠癌细胞的杀伤活性;流式细胞仪检测结肠癌细胞MICA/ B 的表达率。结果:(1)NK 细胞的培养:培养前CD3- CD56+的NK 细胞占外周血单个核细胞的比例为4.5%,培养10 d 时NK 细胞的比例增至93.1%。(2)阿托伐他汀对3 株结肠癌细胞生长抑制率的影响:阿托伐他汀作用48 h 后,在浓度5 ~40 μmol/ L 的4 个实验组中,HCT-116 细胞的生长抑制率较对照组升高(P<0.05)。作用96 h 后,在1.25 ~ 40 μmol/ L 的所有浓度组(6 个)中,HCT-116 细胞的生长抑制率均显著高于对照组(P<0.05)。另外, HCT-116 细胞的生长抑制率随着阿托伐他汀浓度的升高而逐渐上升,相关分析显示,阿托伐他汀的浓度与HCT-116 细胞的生长抑制率呈正相关(r[48 h] = 0.13,r[96 h] = 0.22,P<0.05)。(3)NK 细胞经阿托伐他汀作用96 h 后,除浓度为20 μmol/ L 和40 μmol/ L 时抑制率高于对照组,其他各组对NK 细胞生长无明显影响。(4)阿托伐他汀对NK 细胞杀伤结肠癌细胞活性的影响:NK 细胞对HCT-116 细胞的杀伤活性在阿托伐他汀浓度2.5 ~10 μmol/ L 组均显著高于对照组,对SW-480 的杀伤活性在5 ~20 μmol/ L 组较对照组明显升高,对Caco-2 的杀伤活性在2.5 ~20 μmol/ L 组显著高于对照组(P<0.05),其中同一浓度时对HCT-116 细胞杀伤作用最强。(5)阿托伐他汀对结肠癌细胞MICA/ B 表达的影响:在阿托伐他汀浓度2.5 μmol/ L 及5 μmol/ L 组,HCT-116 细胞MICA/ B 的表达率与对照组比较显著升高(P <0.05),在10 μmol/ L 及20 μmol/ L 组,SW-480 细胞MICA/ B 表达率显著高于对照组(P <0.05),在2.5 ~40 μmol/ L 组,Caco-2 细胞MICA/ B 的表达率均较对照组显著升高(P<0.05)。结论:(1)阿托伐他汀能够呈剂量依赖性抑制结肠癌细胞HCT-116、SW-480 及Caco-2 的生长;(2)阿托伐他汀能够增强NK 细胞对结肠癌细胞的杀伤活性,可能与阿托伐他汀上调结肠癌细胞MICA/ B 的表达有关;(3)阿托伐他汀可以上调3 株结肠癌细胞MICA/ B 的表达率,提高结肠癌细胞的免疫原性。     

葛根素联合复方甘草酸单铵S治疗酒精性肝炎的疗效探讨

目的探讨葛根素联合复方甘草酸单铵S治疗酒精性肝炎的临床疗效。方法选取2011年2月-2014年2月解放军97医院收治的92例酒精性肝炎患者,随机分为联合组和对照组各46例。对照组在常规治疗方案的基础上,加用复方甘草酸单铵S治疗;联合组在对照组治疗方案的基础上,加用葛根素联合治疗。两组患者治疗20 d,对比其治疗前后的TBil、ALT、AST、GGT、白蛋白(Alb)水平、Glasgow酒精性肝炎(GAHS)评分及腹部超声,同时对比两组患者的临床疗效和不良反应。计量资料组间比较采用t检验,计数资料组间比较采用卡方检验。结果治疗后两组患者的GAHS评分、TBil、ALT、AST和GGT均显著低于治疗前,差异均有统计学意义(P值均0.05);联合组治疗后的TBil水平为(20.96±6.85)μmol/L,ALT水平为(33.72±14.18)U/L,AST水平为(38.69±6.38)U/L,均显著低于对照组,差异均有统计学意义(P值均0.05);联合组治疗后的显效率为63.04%,总有效率为93.48%,腹部超声的改善率44.44%,均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P值均0.05);两组患者不良反应的对比,差异无统计学意义(P0.05)。结论葛根素联合复方甘草酸单铵S可提高酒精性肝炎的临床疗效,保护患者的肝功能,且安全性较好,值得推广应用。     

PBL教学法在感染科住培生教学查房中的应用

目的 探讨PBL教学法在感染科住院医师规范化培训教学查房中应用的效果.方法 将2018年1月—2019年12月我在院感染科轮转的30名住培医师随机分配至观察组或者对照组,观察组采用PBL教学查房,对照组采用传统教学查房,轮转结束后进行理论知识和实践能力的考核,分析两组学习成绩的差异,采用问卷调查评估PBL教学效果.结果...     

汉黄芩素提高人CD3AK细胞杀伤肝癌细胞的实验研究和机理探讨

目的:观察汉黄芩素对人CD3AK细胞增殖及对肝癌细胞SMMC-7721杀伤活性的影响,并探讨其发生的机制。方法:分离健康者外周血PBMC;在体外用多种细胞因子联合诱导培养CD3AK细胞。收集培养第7天的CD3AK细胞给予不同浓度汉黄芩素诱导48 h:CCK-8法检测人CD3AK细胞增殖率;MTT法检测汉黄芩素对SMMC-7721细胞生长的影响;流式细胞术(FCM)检测汉黄芩素作用前后CD3AK细胞穿孔素(PFP)、颗粒酶B(Gr B)、CD107a的表达;乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定汉黄芩素对CD3AK细胞杀伤肝癌细胞SMMC-7721活性;Western blot检测药物诱导前后CD3AK细胞胞外信号调节激酶(ERK1/2)蛋白表达。用transwell chambers小室进行药物诱导前后肝癌细胞SMMC-7721迁移率检测。划痕愈合实验观察药物诱导后肝癌细胞SMMC-7721生长融合情况。结果:汉黄芩素能明显促进CD3AK细胞增殖,汉黄芩素浓度为3.2 mg/L时,细胞增殖率比对照组(0 mg/L)高23%,两者比较有统计学差异(P0.05)。在汉黄芩素为3.2 mg/L时诱导的CD3AK细胞对靶细胞SMMC-7721杀伤活性最高(60.4%),与对照组(42.7%)比较差异有统计学意义(P0.05)。经汉黄芩素诱导后的CD3AK细胞PFP、Gr B、CD107a表达显著高于对照组(P0.05)。汉黄芩素作用48h后的CD3AK细胞其ERK1/2蛋白表达较对照组均有所上调,浓度在12.5~0.8 mg/L时,ERK1/2蛋白表达高于对照组(P0.05)。经浓度为50、12.5、3.2、0.8、0.2mg/L汉黄芩诱导48 h后,肝癌细胞SMMC-7721通过transwell小孔细胞数以汉黄芩浓度为12.5 mg/L时最低、肝癌细胞SMMC-7721的融合率以3.2 mg/L时最低,与对照组比较有统计学意义(P0.05)。结论:汉黄芩素在一定浓度范围内能够促进CD3AK细胞增殖,增强其对肝癌细胞SMMC-7721的杀伤活性,抑制SMMC-7721细胞生长、迁移和细胞的融合。汉黄芩素促进CD3AK细胞增殖和功能改变可能与活化细胞ERK1/2蛋白,上调CD3AK细胞表面PFP、Gr B、CD107a的表达有关。