HIV-1gp41核心结构模拟位的筛选与鉴定

目的：筛选并鉴定HIV-1 gp4l核心表位。方法：用识别HIV-1 gp41的构象特异性单克隆抗体NC-1筛选噬菌体12肽库，通过夹心ELISA、NC-1特异性阻断实验、竞争抑制实验鉴定阳性噬菌体克隆，DNA序列分析阳性克隆。结果：经3轮筛选，随机挑取24个噬菌体克隆，ELISA鉴定表明有lO个克隆可与NC-1结合，DNA序列分析并推导氨基酸序列，共5种序列：HDVHHRWVYLLS、ITVNEWLYTSEQ、HGRSHGMFKPKR、MGPIARPHWHLN、DMYRSPRPKPDT。其中gp41N肽和C肽所形成的复合物可特异性阻断表达HDVHHRWVYLLS，VNEWLYTSEQ和MGPIARPHWHLN的克隆与NC-1的结合。结论：所得序列HDVHHRWVYLLS，VNEWLYTSEQ及MGPIARPHWHLN模拟HIV-1 gp41六螺旋束核心表位。     

胸腺萎缩及其对免疫系统的影响

胸腺萎缩分为生理性(又称年龄性)萎缩和病理性(又称意外性)萎缩。一些病理学家乃至一些免疫学家常把病理性胸腺萎缩当成生理现象而不予以重视。不少的免疫学工作者通过切除动物胸腺来研究胸腺与免疫系统的关系,积累了丰富的资料,但有关胸腺萎缩及其对免疫系统影响的报道却较少。生理性萎缩往往与一些老年性疾病有密切关系,而急性病理性胸腺萎缩常可导致严重的免疫缺损。因此,研究胸腺萎缩及其对免疫系统的影响是更为重要。本文就目前一些有关文献及本人一些初步实验资料就胸腺萎缩的原因、可能的机制、结构与功能的改变等方面进行阐述,祈与同道们共同商讨。     

脱氧胆酰酪氨酸的体外杀精和抗HIV活性研究

目的:检测自制的避孕型杀微生物剂的候选化合物脱氧胆酰酪氨酸(deoxycholyltyosine,DCT)体外杀精和抗HIV活性。方法:采用改良的Sander-Cramer方法,并用计算机辅助精子分析技术检测与DCT孵育后的各项精子运动参数。采用ELISA法检测核心抗原p24的含量,并采用染料转移法检测DCT抑制HIV诱导的细胞-细胞融合的活性。采用XTT法检测DCT对阴道上皮细胞VK2/E6E7的毒性。结果:DCT的体外杀精作用最小有效浓度(MEC)为1.0±0.2mg/ml;抑制HIV复制的半数有效浓度(IC50)为21.50±3.17μg/ml;不能阻止HIV病毒进入靶细胞;DCT对阴道上皮细胞系VK2/E6E7的细胞毒性较低。结论:DCT可作为避孕型杀微生物剂进行研发,预防意外妊娠和HIV的性传播。     

作用于gp41的HIV融合抑制剂高通量筛选方法的研究

目的　对作用于gp4 1的HIV融合抑制剂筛选方法进行研究和改进 ,使其成为更加简便的高通量药物筛选模型。方法　采用夹心ELISA方法 ,检测HIVgp4 1六股α 螺旋束的形成。结果　以特异性识别HIVgp4 1六股α 螺旋束的单克隆和多克隆抗体为基础建立的改良夹心ELISA方法 ,特异性好 ,准确性高 ,更为简便和经济 ,能稳定有效地检测样品对 gp4 1六股α 螺旋束形成的抑制作用。 结论　本研究建立的改良方法可作为高通量药物筛选方法 ,用于从中草药库、噬菌体肽库和微生物发酵液等复杂组分样品中筛选作用于 gp4 1的HIV融合抑制剂 ,以研究开发抗HIV药物     

艾氏腹水癌对免疫系统的影响——Ⅴ、宿主胸腹中DNA和RNA合成与含量的变化

Shirasska报道,带瘤小鼠脾脏DNA的合成及含量明显增高,相当于对照组的两倍左右,认为肿瘤组织可以释放生长刺激因子,增强宿主组织器官DNA的合成;但也有不少学者认为肿瘤组织释放的是生长抑制因子,能抑制淋巴细胞的增殖。我们在以前的试验中已经发现,在肿瘤早期,ICR带瘤鼠胸腺发生萎缩,胸腺细胞减少,但胸腺细胞的有丝分裂反而升高,脾脏肿大,外周免疫器官和外周血中的T淋巴细胞增多;但到了肿瘤晚期,胸腺     

链状酰胺类化合物B07的体外杀精效果及其对精子质膜的影响

目的:研究一种链状酰胺类化合物(B07)的体外杀精作用及其对精子质膜的影响。方法:上游收集高活力人类精子分别与0μg/ml(对照组),5~640μg/ml B07作用30 min,随后用计算机辅助精液分析仪分析记录精子的活率及运动参数;用160μg/ml B07与精子作用,记录5 min、30 min、60 min和120 min时精子活动率;处理后的精子一部分经SYBR-14/PI双染后用荧光显微镜观察,另一部分通过电子显微镜来观察质膜的变化情况;并以壬苯醇醚(N9)作为阳性对照。结果:随着B07浓度的升高,精子活率和活力呈下降趋势,最低有效浓度(MEC)为640μg/ml;荧光显微镜下经B07处理的精子呈橙色,而N9处理的精子呈红色;电子显微镜显示B07组精子头部肿胀起泡,尾部针孔样损伤,N9组精子呈溶解性改变。结论:B07具有体外杀精作用,且该作用有时间和浓度依赖性,且其对精子质膜的影响小于N9。     

HIV-1 CRF07_BC毒株gp41 NHR结构域N51的表达及结构分析

目的对来源于HIV-1中国流行株CRF07_BC的包膜糖蛋白gp41NHR结构域的N51进行表达和结构及抗原性分析。方
法运用重叠延伸PCR方法扩增出N51Fd基因,将其插入真核表达载体pFUSE-hIgG1-Fc2,并进行核苷酸序列测定。利用生物
信息学软件、圆二色谱法、免疫印迹法对表达的N51FdFc-BC重组蛋白进行结构和抗原性分析。结果成功构建pFUSE/
N51Fd-BC表达载体,并在真核表达体系实现了目的蛋白的高效表达。免疫印迹结果显示该重组蛋白大小约为35000,可与抗
HIV-1gp41N/C多肽的抗体反应。生物信息学分析显示N51FdFc-BC重组蛋白相对分子质量为34315.1,等电点PI为7.59,且
形成了无规则卷曲结构,易于与抗体反应,可作为抗原。圆二色谱的分析与生物信息学软件预测的结果一致。结论
N51FdFc-BC重组蛋白具有无规则卷曲结构,可适合作为HIV-1亚单位疫苗的免疫原。
     

杀伤性淋巴细胞杀伤靶细胞并保护自身的分子机制

杀伤性淋巴细胞杀伤靶细胞并保护自身的分子机制姜世勃免疫学教研室杀伤性淋巴细胞（ＫＬ）主要包括细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）和自然杀伤细胞（ＮＫ），主要功能是杀伤机体内的靶细胞（ＴＣ），如植入的异体组织细胞、肿瘤细胞及病毒感染的细胞￣［１］。因此，ＫＬ是...