升丹制剂对小鼠机械性创面微循环影响的实验研究

目的 通过不同浓度的升压制剂对创面微循环影响来控制其对创面愈合的作用机制。方法 应用彩色病理图文分析系统,分析创面微血管增生数、扩张度及微血栓数。结果 在造模后３天、７天,实验且数值均显著高于对照组。结论 升丹制课题可以和改善创面微循环,减少微血栓,增加创面营养和血供,有利创面愈合。     

黄芪注射液载入修饰胶原促进血管再生的研究

目的:将黄芪载入胶原支架内,通过对胶原支架进行修饰,观察黄芪是否具有促血管生成活性及探讨可能的生物学机制.方法:将5,10μL黄芪注射液载入修饰后的胶原内,通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM,Chicken Chorioallantoic Membrane)实验模型,从胶原周围微血管再生数量、胶原内血红蛋白含量、胶原干重、CD_(34)抗原免疫组化标记等指标来考察黄芪注射液对肝素修饰后胶原促血管再生的作用.结果:黄芪联合肝素修饰后的胶原能够产生与血管内皮生长因子相当的疗效,血管计数、胶原血红蛋白含量、CD_(34)的表达均显著性增加(P＜0.01,与单纯胶原组比较);与单纯胶原组相比,胶原+黄芪10ul组胶原干重显著增加(P＜0.05).结论:黄芪注射液载入修饰后的胶原具有良好的促血管再生作用.     

三黄煎剂调节Aurora激酶A提高表柔比星对乳腺癌MDA-MB-231细胞药效的研究

目的:探讨三黄煎剂对表柔比星作用于MDA-MB-231细胞药效的影响及相关机制。方法:采用CCK-8法检测三黄煎剂对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的影响。RT-PCR法、Western Blot法检测三黄煎剂对MDA-MB-231细胞Aurora A、p53的mRNA及蛋白表达水平的影响。siRNA沉默MDA-MB-231细胞中Aurora A,并用CCK-8法检测对三黄煎剂作用于MDA-MB-231细胞增殖抑制的影响。CCK-8法、Annexin V-FITC/PI法检测三黄煎剂联合表柔比星对MDA-MB-231细胞增殖抑制率、凋亡率的影响。Western Blot法检测三黄煎剂联合表柔比星对MDA-MB-231细胞凋亡相关蛋白及Aurora A表达的影响。结果:三黄煎剂对MDA-MB-231细胞增殖抑制率呈浓度梯度依赖增长(P0.05),给药48 h疗效好于24 h(P0.05),与给药72 h无统计学差异(P0.05)。三黄煎剂能够调节MDAMB-231细胞Aurora A、p53的mRNA及蛋白的表达。siRNA沉默Aurora A后,将三黄煎剂对MDA-MB-231细胞增殖抑制率下调了34.6%(51.5%到33.7%)。三黄煎剂与表柔比星联用能够增加表柔比星对MDA-MB-231细胞的增殖抑制率及凋亡率,调节凋亡相关蛋白c-PARP,c-Caspase 3,Bcl-2,Bax及Aurora A的表达水平。结论:三黄煎剂能够增加MDA-MB-231细胞对化疗药物表柔比星的敏感性,可能与三黄煎剂对Aurora激酶A的抑制有关。     

温和灸联合隔盐灸改善乳腺癌化疗胃肠道反应疗效观察及机制探讨

目的:评价温和灸配合隔盐灸改善乳腺癌化疗所致胃肠道反应的疗效,胃蛋白酶原及部分作用机制。方法:将48例患者随机分为观察组和对照组,每组24例。对照组使用注射用盐酸托烷司琼(5 mg),静脉滴注,每日1次,共治疗3d;观察组在对照组治疗基础上配合使用温和灸足三里、中脘、关元、气海及隔盐灸神阙,每天1次,每次15 min,共治疗7 d。分别于治疗前及化疗第7天监测两组患者血清胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)、PGⅠ与PGⅡ比值(PGR)和胃泌素-17(G-17)水平。分别于治疗前与化疗第3、5、7天,比较两组患者胃肠道反应程度(恶心、呕吐、便秘、腹泻症状评分)。结果:化疗第7天,观察组血清PGⅠ、PGⅡ、G-17水平低于对照组(P<0.05),PGR与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。化疗期间观察组恶心、呕吐、便秘总体评分较对照组明显降低(P<0.05)。结论:温和灸配合隔盐灸可以有效改善乳腺癌化疗引起的恶心、呕吐、便秘症状,其机制可能与下调血清PGⅠ、PGⅡ及G-17水平有关。     

山茱萸多糖对乳腺癌MCF-7细胞的影响及其通过调控AMPK/SIRT1通路的作用机制研究

目的：探讨山茱萸多糖对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响,并通过观察山茱萸多糖对腺苷酸活化蛋白激酶/沉默信息调节因子1（ AMPK/SIRT1）通路的调控作用探索其可能的作用机制。方法：体外培养MCF-7细胞,随机分为对照组（正常培养基培养）和山茱萸多糖低、中、高剂量组（分别予12.5、25.0、50.0 mg/mL山茱萸多糖培养）以及山茱萸多糖高剂量+AMPK激活剂（ AICAR）组（予50.0 mg/mL山茱萸多糖+2.0 mmol/L AICAR培养）,采用平板克隆形成试验检测MCF-7细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,划痕试验检测细胞迁移情况,Transwell法检测细胞侵袭情况,蛋白免疫印迹法（ Western blot法）检测各组细胞AMPK、磷酸化AMPK（ p-AMPK）、SIRT1蛋白相对表达量。选择BALB/c裸鼠,建立荷瘤裸鼠模型,随机分为对照组（灌胃生理盐水）与山茱萸多糖组（每日灌胃800 mg/kg山茱萸多糖溶液）,每组6只,连续灌胃28 d。每7 d测量2组裸鼠肿瘤体积并做组间比较,灌胃结束后处死各组裸鼠取移植瘤,采用免疫组化法检测各组裸鼠移植瘤组织中AMPK、p-AMPK、SIRT1蛋白表达。结果：体外细胞学实验结果表明,山茱萸多糖低、中、高剂量组MCF-7细胞集落形成数明显低于对照组（ P＜ 0.05）,细胞凋亡率明显高于对照组（ P＜ 0.05）,细胞划痕愈合率、细胞侵袭数明显低于对照组（ P＜ 0.05）,细胞中p-AMPK、SIRT1蛋白表达明显低于对照组（ P＜ 0.05） ;山茱萸多糖高剂量+AICAR组MCF-7细胞集落形成数明显高于山茱萸多糖高剂量组（ P＜ 0.05）,细胞凋亡率明显低于山茱萸多糖高剂量组（ P＜ 0.05）,细胞划痕愈合率、细胞侵袭数明显高于山茱萸多糖高剂量组（ P＜ 0.05）,细胞中p-AMPK、SIRT1蛋白表达明显高于山茱萸多糖高剂量组（ P＜ 0.05） ;山茱萸多糖各剂量对上述指标的影响表现出显著的剂量依赖性（ P＜ 0.05）。荷瘤裸鼠实验结果表明,移植第14、21、28、35 d山茱萸多糖组裸鼠移植瘤体积显著小于对照组（ P＜ 0.05） ;干预结束后,山茱萸多糖组裸鼠移植瘤质量与瘤体组织p-AMPK、SIRT1蛋白阳性表达率均明显低于对照组（ P＜ 0.05）,AMPK蛋白阳性表达率与对照组比较差异无统计学意义（ P＞ 0.05）。结论：山茱萸多糖对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭有一定的抑制作用,并可促进MCF-7细胞凋亡,能抑制裸鼠移植瘤生长,其可能的机制为抑制AMPK/SIRT1通路激活。     

生肌玉红膏外敷治疗下肢慢性溃疡临床观察

目的观察生肌玉红膏外敷治疗下肢慢性创面患者的疗效。方法 240例下肢慢性溃疡患者随机分为观察组与对照组各120例,观察组采用生肌玉红膏,对照组采用凡士林油纱布,观察两组疗效。结果观察组临床痊愈率为29.17%,显效率为47.50%,对照组分别为10.83%、16.67%,两组比较P<0.01;观察组治疗4周后创面面积减小率、创面肉芽生长状况积分和生活质量总积分分别为81.56%±74.29%、(24.53±13.46)分、(2.82±1.98)分,对照组为29.84%±20.45%、(18.33±11.90)分、(3.64±2.24)分,两组比较P均<0.01;两组均未出现不良反应。结论生肌玉红膏可以促进下肢慢性溃疡创面愈合,提高患者生活质量,未见不良反应。     

HPLC-ELSD法测定黄芪注射液浓缩液微乳中黄芪甲苷含量

目的:建立黄芪注射液浓缩液微乳中黄芪甲苷的含量测定方法。方法:采用(HPLC-ELSD)。色谱柱:Zorbax C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈∶水(36∶70);检测波长:206nm;灵敏度为0.08 AUFS,流速:1.0 ml/min;柱温:25℃。ELSD参数:漂移管温度为55℃,空气气压280 kPa。结果:黄芪甲苷在0.004 145 6~0.040 456 0 mg/ml时有良好的线性关系(r=0.999 1),平均回收率为96.53%,RSD为0.76%。结论:HPLC-ELSD法具有准确、简便、灵敏度高、无干扰而且重现性好的优点,适合用于黄芪注射液微乳中黄芪甲苷含量的测定。     

中医药改善创面微循环研究进展

目的 探讨中医药在改善创面微循环方面的作用.方法 收集整理运用中医药治疗各种创面的有关文献,结合中医外科理论和现代医学创伤修复学说进行探讨,并与临床实践相印证.结论 祖国医学运用活血化瘀、祛腐生肌之法治疗各种创面,在改善创面微循环方面效果显著,具有一定优势,通过实验及临床研究均可以证明.     

生肌玉红膏促进慢性体表溃疡愈合的临床研究

目的：探讨生肌玉红膏促进体表慢性溃疡愈合的临床疗效及改善创面微循环的相关作用机制。方法：将30例慢性难愈性体表溃疡患者分为治疗组和对照组,每组各15例。治疗组给予生肌玉红膏覆盖创面,对照组给予凡士林纱布覆盖创面,疗程均为15d。分别于治疗后第3、7、14天切取溃疡中心肉芽,采用MPIAS2500彩色病理图文分析系统检测创面肉芽微血管密度（MVD）,氰化高铁血红蛋白法检测血红蛋白（Hb）含量,722分光光度仪检测羟脯氨酸（Hyp）含量,并采用照相法计算创面愈合率。结果：治疗组MVD、创面肉芽Hb含量、肉芽Hyp含量及创面愈合率均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05或0．01）。结论：生肌玉红膏能通过改善创面微循环促进体表慢性溃疡愈合。     

胶原海绵促进人脐静脉血管内皮细胞生长的体外实验研究

目的探讨胶原海绵促进人脐静脉血管内皮细胞生长的疗效与机制。方法实验组在细胞培养孔中加入含8 U胶原酶的0.2 ml PBS 2 mm×2 mm×2 mm正方体胶原海绵;对照组仅加入含8 U胶原酶的0.2 ml无菌的PBS液体。培养24 h后测血管内皮细胞增殖(MTT实验)、迁移(划痕实验)、及免疫蛋白印迹检测血管生成素1(Ang1)、血管内皮生长因子(VEGF)与整合素(Integraαv)。结果细胞培养后24 h,实验组可以显著促进HUVEC的增殖,增殖率达86%;实验组血管内皮细胞细胞迁移加快,12 h细胞迁移完成,显著高于对照组(P0.01);实验组VEGF、Ang1及Integraαv蛋白表达明显高于控制组,其中以整合素аv蛋白表达增加尤为显著,增加了80%。结论胶原海绵促进血管内皮细胞增殖与迁移,其中促进迁移的作用较强,机制之一为提高了血管内皮细胞中VEGF、ANG1、Integraαv蛋白表达。