PCR技术在西沙恙虫病流行病学调查中的应用

应用ＰＣＲ首次同时检测西沙群岛现场采获的媒介恙螨及其宿主全民虫病立克次体（Ｒｔ）ＤＮＡ。地里纤恙螨阳性率１５．１５％；宿主血阳性率１１．４８％，脾脏阳性率１３．８９％，其中臭的阳性率为１２．７７％和１７．３９％，褐家鼠为１１．１１％和１２．５％，黄胸鼠未检出。     

PCR技术在西沙恙虫病流行病学调查中的应用

应用PCR技术首次同时检测西沙群岛现场采获的媒介恙螨及其宿主体内恙虫病立克次体(Rt)DNA.地里纤恙螨阳性率15.15%;宿主血阳性率11.48%,脾脏阳性率13.89%,其中臭鼩鼱的阳性率为12.77%和17.39%,褐家鼠为11.11%和12.5%,黄胸鼠未检出.     

恙螨与恙虫病立克次体的系列研究

恙虫病是由感染恙螨幼虫叮咬人体传入恙虫病立克次体所致的急性传染病。地里纤恙螨和小板纤恙螨分别为我国南方和北方的主要传播媒介。近年来,新、旧流行区的恙虫病陆续发生、疫情上升。本课题系为进一步控制恙虫病的流行,对我国主要媒介地里纤恙螨的一些生物学特征和恙虫病立克次体进行了系列研究,包括:①地里纤恙螨射线诱发突变、种株杂交、种株染色体与氨基酸测定;②恙螨人工接种恙虫病立克次体及其阳性恙螨模型的建立;③恙螨体内恙虫病立克次体的分离、检测及其效果;④恙螨、鼠宿主和患者体内恙虫病立克次体动态及其传病关系;⑤恙螨、鼠宿主和患者体内恙虫病立克次体株型特异性基因序列的扩增、鉴定及克隆     

基于沃尔巴克氏体的蚊媒和蚊媒病控制的生物安全性

沃尔巴克氏体是无脊椎动物胞内专性寄生、可经卵传递的胞内革兰阴性共生菌.用沃尔巴克氏体控制蚊媒及蚊媒病的原理是基于其所诱导的胞质不相容性和对病原体的抗性.沃尔巴克氏体对蚊媒病原体具有广泛抗性,其直径大于蚊虫唾液腺管直径,不能通过蚊虫叮咬感染人体或哺乳动物;反复受到沃尔巴克氏体感染蚊虫叮咬的人血中未检测到抗沃尔巴克氏体抗体.沃尔巴克氏体仅在宿主细胞内生存,不能在培养基内和环境中独立生长;它不产生孢子,不含质粒,不随宿主死亡而分解扩散至环境;它不会横向传播至生活在同一生境中的其他节肢动物.捕食沃尔巴克氏体感染的蚊幼虫和成虫的节肢动物不能通过捕食而获得感染;基于沃尔巴克氏体的蚊媒和蚊媒病控制所产生的生物安全风险几乎可以忽略.     

恙虫病立克次体型特异性基因序列的扩增与鉴定

目的：明确广东地区恙虫病立克次体（Ｒｔ）的流行株型别。方法：以Ｒｔ主要外膜蛋白５６ｋＤａ型特异抗原基因（ｔｓａ５６Ｋｄａ）为靶基因设计并合成群、型特异引物，采用ＮＰＣＲ法对广东地区的标本进行株型鉴定。结果：广东顺德、南海等地恙螨、野鼠及患者所携带Ｒｔ为Ｋａｒｐ株。结论：顺德、南海等地流行优势株为Ｋａｒｐ株，且媒介恙螨、鼠宿主及患者所携带的Ｒｔ为同一型别     

恙螨和鼠宿主体内恙虫病立克次体检测的基因技术方法的系统比较研究

为建立一种恙螨和鼠宿主体内恙虫病立党次体检测最敏感特异的基因技术万法,本文对包括DNA抽提、PCR、核酸杂交、PCR结合核酸杂交作了系统比较研究,结果证明,PCR结合核酸杂交比单用PCR敏感10倍,比单独核酸杂交敏感1000倍．而DNA快速抽提可代替酚一氯访法应用于鼠血和病人标本的检测,会抑制DNA快速抽提法能使阳性恙螨PCR检出率提高。     

我国恙螨与恙虫病的研究

恙螨包括媒介恙螨和非媒介恙螨.恙虫病是一种由恙螨传播的自然疫源性疾病.病原体为恙虫病立克次体[Rickettsia tsutsugamushi(Hyasi,Ogata,1931)];该病的流行特点很主要的一方面决定于媒介恙螨的生态学.由于媒介恙螨不但把恙虫病立克次体从鼠类传给鼠类,从鼠类传给人类,而且恙螨本身可以长期、多代保有和繁殖这种病原体,保持传病能力;因此,影响恙虫病传播的因素是复杂的,其中包括病原体、人群等方面的因素,但媒介恙螨是该病传播过程中最广泛和直接的因素.恙螨成虫和若虫以一些节肢动物等的卵或幼虫作为捕食的对象,恙螨幼虫则是寄生性的,以鼠类为主要宿主,偶而叮人.本文除介绍媒介和非媒介恙螨外,重点是分述媒介恙螨的传病和它的生理、生化等的研究,最后是防治建议.     

恙螨和鼠宿主体内恙虫病立克次体检测的基因技术方法的系统比…

为建立一种恙螨和鼠宿主体内恙虫病立克次体检测量敏感特异的基因技术方法，本文对包括ＤＮＡ抽提，ＰＣＲ，核酸杂交，ＰＣＲ结合核本杂交作了系统比较研究，结果证明，ＰＣＲ结合核酸杂交比单用ＰＣＲ敏感１０倍，比单独核酸杂交敏感１０００倍，而ＤＮＡ快速抽提可代替酚一氯仿法应用于鼠血和病人标本的检测，去抑制ＤＮＡ快速抽提法能使阳性恙螨ＰＣＲ检出率提高。