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目的 对舟山市3例疑似发热伴血小板减少综合征(SFTS)病例进行病原学鉴定、确诊,并分析其遗传特征.方法 选用巢式RT-PCR测定新布尼亚病毒核酸及L、M、S3个特异性基因,并对基因扩增产物进行测序,测序结果与GenBank上公布的序列进行比对确认.用DNAStar软件构建进化树与序列距离表.用间接免疫荧光法测定患者恢复期和急性期血清新布尼亚病毒IgG抗体滴度.结果 3例SFTS患者急性期血清中均能检测到新布尼亚病毒的3个特异性基因片段,其中S基因核苷酸序列与舟山市同类基因核苷酸序列的同源性在94.4%~ 100.0%,患者恢复期血清病毒抗体滴度较急性期增高4倍以上.结论 经过病原学鉴定,3例临床疑似患者确诊为发热伴血小板减少综合征的新近感染病例.舟山市新布尼亚病毒的遗传特征比较稳定. 相似文献
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目的 研制黄热病、西尼罗热、登革热、基孔肯雅热、埃博拉出血热、马尔堡出血热、拉沙热等多种病毒性传染病集合检测基因芯片,并建立一种适用于直接检测核酸含量较低临床血清标本的新型芯片靶基因扩增标记方法.方法 设计并筛选出上述病毒70mer寡核苷酸特异探针各20条,打印于同一基因芯片上;以phi29 DNA聚合酶结合带标签序列的随机引物进行临床标本中病毒全基因组扩增,再以Cy3荧光染料标记的标签序列引物进行PCR随机扩增标记,标记产物用多种病毒芯片进行杂交检测.结果 检测1~4型登革热、基孔肯雅热病例临床血清标本,结果显示该方法准确、特异、敏感;检测西尼罗热、黄热病、埃博拉出血热、马尔堡出血热、拉沙热等病毒核酸的模拟血清标本,同样得到特异的阳性杂交信号,与预期结果一致.结论 本研究建立的多种病毒集合检测基因芯片及其靶基因扩增标记方法,可直接应用于血清标本中上述病毒核酸的检测. 相似文献
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齐鲁石化公司中心医院五分院儿科 淄博市 255434齐鲁石化公司胜利炼油厂是国家特大型企业,有职工家属2万余人,绝大多数居住在相对集中、密集的炼油厂生活区内(以下简称本地区)。过去由于本地区对再发性腹痛(RAP)认识不足,未予重视,以致反复就诊,延误治疗。为探讨RAP病因,本文对确诊的89例RAP进行了一系列调查,现报道如下。…… 相似文献
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自1990年以来,我们针对市区由于接生员接生导致孕产妇死亡率增高的薄弱环节,采取了逐步淘汰接生员工作,促进了基层妇产科的正规化建设,提高产科质量,降低了孕产妇死亡. 相似文献
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目的 制备检测埃博拉病毒(EBOV)的基因芯片,并探索利用EBOV质粒对其进行初步验证.方法 设计20条特异性70mer寡核苷酸探针,点样制备成9×8的芯片阵列.采用phi 29 DNA聚合酶多重置换扩增(MDA)和荧光标记PCR技术,将标记好的样本与经过预杂交的芯片杂交、洗脱、扫描、最终进行数据分析.结果 埃博拉病毒... 相似文献
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实时荧光定量RT-PCR快速检测H7N9禽流感病毒 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 构建一种灵敏、特异、快速的实时荧光定量RT-PCR反应体系用于临床H7N9禽流感疑似病例早期诊断及外环境H7N9病毒的监测.方法 以H7N9禽流感病毒H7基因和N9基因为靶基因设计引物以及TaqMan探针,并对引物、探针及反应条件进行优化,验证该反应体系检测的特异性、灵敏度、重复性和检测速度,然后与两种商品化试剂盒(试剂盒I和试剂盒Ⅱ)进行各项指标及184份现场样本作平行比对.结果 新建立的H7N9禽流感病毒实时荧光定量RT-PCR反应体系呈典型的扩增曲线、扩增时间约50 min,H7基因与N9基因的最低检出限分别为28拷贝/μL与41拷贝/μL.重复性测定显示,H7和N9检测Ct值的变异系数(CV)分别为0.17%~0.89%和0.33%~0.59%,扩增效率分别为0.9491和0.9713;与其他常见禽流感病毒或肠道病毒无明显交叉反应.184份现场可疑样本阳性检出率为5.43%(10/184),与试剂盒Ⅱ结果一致.结论 本研究建立的实时荧光定量RT-PCR反应体系具有检测速度快、灵敏度高、特异性强、重复性好、结果可靠等特点,可用于临床疑似病例的应急检测、早期诊断及养鸡场、活禽交易市场等外环境H7N9禽流感病毒监测. 相似文献