宁波地区金黄色葡萄球菌临床株肠毒素基因与多位点序列分型研究

目的 了解宁波地区金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)临床株肠毒素基因分布和多位点序列分型特征。方法 收集宁波市各医院分离的金黄色葡萄球菌临床株,利用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测金黄色葡萄球菌肠毒素A(sea)、金黄色葡萄球菌肠毒素B(seb)、金黄色葡萄球菌肠毒素C(sec)和金黄色葡萄球菌肠毒素D基因(sed),对肠毒素基因阳性菌株利用多位点序列分型(multi-locus sequence typing, MLST)进行分子分型。结果 2006、2008和2011-2013年共收集临床株155株,其中肠毒素基因阳性株为45株,阳性率为29.03%;4种基因阳性率依次为16.77%、5.81%、11.61%和3.87%;形成8种基因组合,以sea(14株)、sec(9株)和sea+sec (8株)三种组合为主。45株菌株可分为15个ST(sequence type,ST),ST1有14株,占31.11%;ST5有6株,占13.33%; ST1121和ST15的菌株均为4株,各占8.89%。与全国其他地区比较,在宁波地区临床株中发现ST12、ST573和ST1121三种新的ST。45株菌株在系统进化树上形成7个主要分支。在ST1克隆群中,sea阳性率为72.73%(16株),sec阳性率为54.55%(12株),以sea+sec组合为主(8株)。结论 宁波地区金黄色葡萄球菌临床株肠毒素基因阳性率较高,以携带sea和sec为主, 形成8种基因组合。有15种ST型,发现ST12、ST573和ST1121三种新的ST。ST1克隆群为流行优势菌株,其次为ST5克隆群。ST1克隆群以携带sea和sec为主。     

宁波地区腹泻患者细菌性病原检测与分析

摘要：目的　了解宁波地区腹泻患者病原菌构成和耐药性,为防控感染性腹泻提供依据。方法　病原菌检
测采用直接分离与增菌分离相结合的方法;细菌筛检和鉴定采用生化和生化鉴定试剂条ＡＰＩ等法,鉴定到
种、群;病原菌血清分型采用血清凝集法;药敏试验采用Ｋ Ｂ法;耐药基因检测采用ＰＣＲ 法,统计学分析
采用ＳＰＳＳ１１．０软件包进行,率的比较采用χ
２ 检验和犉分析。结果　９２５６份标本中检出８类１６种３４７３
株病原菌,检出率为３７．５２％,其中,副溶血性弧菌、沙门菌和气单胞菌的检出率分别为１６．１３％ （１４９３／
９２５６）、３．９９％ （３６９／９２５６）和３．４４％ （３１８／９２５６）,副溶血性弧菌的检出率明显高于其他病原菌（χ
２＝
２１．６８,犘＜０．０１）;血清分型发现副溶血性弧菌的Ｏ３ 群（３４９／４８０）、沙门菌的甲型副伤寒菌（１６８／３６９）、
志贺菌的躈氏志贺菌（１１７／１７５）、致病性大肠埃希菌Ｏ１１９ （２８／６６） 为各病原菌的优势菌,检出了躈氏
１Ｃ、２Ｃ 和４Ｃ 志贺菌新亚型;药敏试验显示病原菌对大多数抗生素敏感,但有４５株为多重耐药菌,其中
气单胞菌２３株、志贺菌８株、致泻性大肠埃希菌８株、金黄色葡萄球菌３株、变形杆菌２株、沙门菌１株,
占总菌数的２．４５％,检出了犫犾犪 犜犈犕、狊狌犾犾和犪犪犮犮等３种耐药基因。结论　宁波地区感染性腹泻病原构成
复杂,副溶血性弧菌是最主要的流行病原菌;检出躈氏Ｃ 型志贺菌提示其血清型可能或正在转换,需加强
对志贺菌变迁的监测,以预防疾病的暴发;致病性不强的气单胞菌和类志贺邻单胞菌检出率较高,应引起
关注;耐药菌株中有２．４５％的病原菌为超广谱β 内酰胺酶（ＥＳＢＬ） 菌株,涉及多个菌属,提示临床治疗
中合理用药是减少耐药菌的传播和扩散的关键。
关键词：感染性腹泻;病原菌;分离鉴定;药敏
中图分类号：Ｒ５１２．５　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１４）０２ ００９６ ０６     

宁波市区2009-2010年部分游泳池水卫生监测结果分析

目的：了解宁波市区游泳池水卫生状况,为进一步加强对游泳场所监督管理提供依据。方法：水样176份游泳池水按GB标准和有关技术规范进行卫生指标检测,并进行了合格率评价。结果：2年间共采集水样176份,总合格率为85.23%;其中,尿素合格率为96.59%、余氯合格率为78.41%、细菌总数合格率为85.23%、大肠菌群合格率为96.59%;pH值和浑浊度均为合格。结论：宁波市区游泳池水质卫生状况较好,但仍要进一步加强,以确保游泳池水质的卫生安全。     

应用筛检方法快速检测小海产品中副溶血性弧菌

目的:研究筛检海产品中副溶血弧菌方法,提高检出率和检测速度。方法:用PCR快速筛检,GB法寻找目标菌,以生化分步筛检作出初步确定,再经系统生化鉴定确认之。结果:356份海产品经筛检检出副溶血弧菌141株,检出率为39.61%,其中PCR一次性检出了141株副溶血性弧菌阳性基因,GB法分离到115株副溶血性弧菌,26株通过二次增菌才分离到,生化筛检与系统特殊化一致率达100%,检出带TDH毒力基因副溶血性弧菌5株,未检出TRH毒力基因。结论:应用发现PCR、GB和典型生化分步联合的筛检方法,可用于筛检食品中副溶血弧菌,具有快捷、大容量、方便的优点,为进一步开展食品多病原污染物监测工作打下了基础。     

宁波地区志贺菌血清分型、耐药性和毒力分析

目的 了解志贺菌血清型动态、耐药性和毒力情况,为防控和治疗提供依据。方法 志贺菌检测和鉴定采用国家标准方法,药敏试验采用改良K-B法,耐药和毒力基因采用PCR法。结果 254株志贺菌分B、D和C共3个血清群,分别为170株、83株和1株,占66.93%、32.68%和0.39%。B群又分为10个亚型,其中福氏c亚型(1c、2c和4c)最多,占54.12%(92/170)。ipaH、set1A、set1B、sen、ial和virA毒力基因中,菌株检出率分别为100.00%、88.04%、88.04%、80.43%、93.48%和88.04%,菌株携带毒力基因最多5种,最少2种。药敏检测显示2株B群志贺菌对检测抗生素全部敏感,其余菌株耐药在4种～13种,未检出耐碳青霉烯类抗生素的志贺菌。结论 随着福氏c亚型志贺菌传入本市,其流行株血清型发生了变迁,Fc亚型志贺菌成为新的流行株,且ESBLs株最高,携带毒力基因最多,使其更容易逃避宿主的免疫杀伤,增加临床抗生素治疗难度。     

宁波市耐三代头孢菌素志贺菌携带β-内酰胺酶与基因分型

目的了解本市耐三代头孢菌素志贺菌携带ESBLs及其基因型,为疾病防控提供依据。方法采用直接和增菌培养法,分离患者标本中志贺菌;药敏采用K-B法,ESBLs志贺菌表型确证采用纸片法;CTX-M、OXA、TEM和SHV耐药基因采用PCR法;耐药基因分型采用核苷酸序列法,用BLAST分析比较确定基因型别。结果药敏筛检出69株耐三代头孢菌素志贺菌,占ESBLs志贺菌的74.19%。检出CTX-M(CTX-M-1群和CTX-M-9群)、OXA和TEM耐药基因,检出率分别为79.71%、79.01%和26.09%,未检出CTX-M-2群和SHV耐药基因。DNA序列比对CTX-M-1群以CTX-M-15型为主,还检出7个其它型;CTX-M-9群则以CTX-M-14型多,其它型检出6个;49株OXA和18株TEM耐药基因测序后均为1型(OXA-1型和TEM-1型)。携带2种以上耐药基因的志贺菌21株,占30.43%。结论本市志贺菌对头孢曲松等三代头孢菌素耐药率较高,检出的ESBLs酶型种类多,CTX-M(CTX-M-1群的CTX-M-15型和CTX-M-9群的CTX-M-14型)是主流酶型,且可同时携带多种耐药基因,给疾病防控带来困难。OXA-1型的高携带率,提示我们应加强分析。B群志贺菌无论是表型的耐药性,还是耐药基因检出率均高于D群志贺菌,该发现有助志贺菌的扩散与流行研究。     

乙型肝炎表面抗原阳性从业人员前S1抗原检测与分析

目的：研究从业人员HBsAg携带者血液中前S1抗原情况，比较不同乙型肝炎病毒抗原抗体血清学指标模式、年龄段和性别检出前S1抗原的差异。方法：用ELISA方法检测从业人员HBsAg携带者，选择不同性别、乙型肝炎病毒抗原抗体血清学指标模式和年龄段的354名HBsAg阳性携带者检测前S1抗原，用x^2检验分析其差异。结果：前S1抗原在HBsAg阳性携带者中女性检出率为41．6％，男性为29．7％，女性高于男性，差异有统计学意义（P〈0．05）；不同血清学模式中，HBeAg阳性从业人员前S1抗原检出率高于HBeAg阴性从业人员（P〈0．01）；在不同年龄段检出前S1抗原无差异（P〉0．05）。结论：前S1抗原检出率在女性中高于男性，不同乙型肝炎病毒抗原抗体血清学指标模式检出率有差异，不同年龄组无差异。