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1.
目的将激光显微分离(laser capture microdissection, LCM) 技术应用于噬菌体表面呈现肽库的筛选过程,建立一种可以直接在天然组织中筛选肽库的方法。方法将新鲜人骨肉瘤组织块在噬菌体肽库溶液振荡孵育后制成组织冰冻切片,免疫组化染色检测噬菌体在组织中的浸润扩散。改进常规LCM切片处理方法,以冻干法替代酒精/二甲苯法脱水,以期在LCM操作过程中提高切片上噬菌体的存活率。LCM法分离摄取骨肉瘤切片上的肿瘤靶细胞,转染回收这些细胞上特异结合的噬菌体。滴定法检测所筛选的噬菌体对特异性细胞的亲和力。结果利用LCM技术,可以由肿瘤冰冻切片上收集到足够的与特异性噬菌体短肽,应用于噬菌体表面呈现肽库筛选。经过3轮筛选后所获得的噬菌体与人骨肉瘤组织的特异性亲和力提高16倍。结论本研究首次将LCM技术应用于噬菌体表面呈现肽库的筛选,可以使我们直接在新鲜人肿瘤组织中筛选与特定细胞群甚至单个细胞亲合的短肽;同时又避免了天然组织中其他杂质细胞的污染,为研制细胞特异性导向载体提供了一个新的途径。 相似文献
2.
本文报道了硫酰氟,灭菌气对集装箱内蟑螂的蒸熏效果。箱体内温度32℃,相对湿度70%、应用5g/m^3和10g/m^3,15g/m^3的硫酰氟三种浓度,经4小时密封后开箱,试虫全都死亡,经试验室观察也无发现复苏现象。灭菌气(又称虫菌畏),箱内部温度34℃,相对湿度76%、施药后密闭4小时,应用40g/m^3、50g/m^3尚未死亡,密闭24小时才全部死亡,不再复苏。而对照组箱内放置24小时无死亡。 相似文献
3.
人α干扰素诱导骨肉瘤细胞Anoikis凋亡 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:恶性肿瘤细胞逃避Anoikis凋亡的特性是其原位侵袭和远处转移的一个重要原因。本文旨在研究应用人干扰素(IFN)α2a诱导骨肉瘤细胞出现Anoikis凋亡,并深入探讨其产生机理及信号传导途径。方法:采用抑制接触培养法建立细胞Anoikis凋亡诱导模型。观察IFN-α2a诱导骨肉瘤细胞MG-63产生的Anoikis凋亡。TUNEL法形态学检测MG-细胞凋亡,流式细胞仪定量检测细胞凋亡程度和细胞表面整联蛋白受体表达。特异性底物切开法检测半胱氨酸天门冬氨酸特异性蛋白酶(cysteine aspartate-specific proteases,caspase)信号途径。结果:人IFN-α2a可明显诱导骨肉瘤细胞MG-63产生Anoikis现象,并诱导了MG-63细胞caspase-8和caspase-3的活性,但IFN对整联蛋白亚单位α4,α5及αv无明显影响,上述整联蛋白封闭抗体对IFNα-2a诱导的MG-63细胞Anoikis凋亡无明显影响。结论:人干扰素α2a可以在体外通过调节细胞caspase信号途径,诱导骨肉瘤细胞MG-63产生Anoikis现象,从而抑制骨肉瘤的转移。 相似文献
4.
目的:总结ⅡB及Ⅲ期骨肉瘤的保肢综合治疗的经验与体会,探讨保肢手术在晚期骨肉瘤治疗中的价值。方法:骨肉瘤患者行保肢手术43例,其中ⅡB期36例,ⅢA期1例,ⅢB期6例。肿瘤部位均位于四肢长骨干骺端。根据患者肿瘤局部的条件及全身情况,分别采用瘤段切除人工假体替代、瘤段骨体外灭活回植及自体骨移植术等保肢手段重建骨关节功能,同时根据患者具体情况给予手术前后化疗。7例Ⅲ期骨肉瘤患者中3例进行了肺部转移灶切除术。上肢瘤段切除后功能重建的所有患者及下肢行假体置换的病例术后近期即可进行康复训练。结果:患者1,2年的生存率分别为60%和35%,肿瘤局部复发率为14%。并发症主要为肩关节脱位、膝关节活动范围不理想、局部肿瘤复发。结论:对ⅡB及Ⅲ期骨肉瘤患者进行选择性的保肢手术是可行的,有效的术前化疗可以提高保肢手术成功的机会;经济问题是骨肉瘤患者治疗中的一个重要问题;人工假体可使保肢患者的生活质量明显提高。 相似文献
5.
目的:探讨上腹部手术后行腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC)的临床经验.方法:回顾性分析37例上腹部手术后再行LC的临床资料.结果:本组曾行胃大部切除术17例,溃疡穿孔修补术8例,脾切除术7例,胆囊切开取石造瘘术和右半结肠切除术各2例,腹部闭合伤手术1例.原切口类型:上腹正中切口19例,右上腹经腹直肌切口7例,左侧、右侧经腹直肌探查切口(向上过脐)各4例,左上腹横切口3例.手术成功34例,中转开腹3例;手术平均48分钟;术后住院平均3.5天全部治愈.结论:有上腹部手术史的胆结石患者,LC安全可行. 相似文献
6.
7.
目的观察血必净治疗脓毒症疗效。方法使用随机平行对照方法 ,将62例住院患者按随机数字表法分为两组。治疗前及治疗后24h、72h采血检查血浆胱抑素。对照组31例予经验型抗感染治疗,头孢他啶,2 g/次,2次/d。治疗组31例100 ml血必净+150 ml生理盐水,1次/d,静脉滴注。连续治疗7 d为1疗程。观测临床症状、胱抑素C、不良反应。连续治疗2疗程,判定疗效。结果治疗组痊愈12例,显效8例,有效5例,无效6例,总有效率80.65%。对照组痊愈8例,显效3例,有效6例,无效14例,总有效率54.85%。治疗组疗效优于对照组(P〈0.05)。胱抑素C两组有改善(P〈0.05,P〉0.05),治疗组改善优于对照组(P〈0.01)。结论血必净治疗脓毒症效果显著,值得推广。 相似文献
8.
9.
目的 利用噬菌体表面呈现技术研制高活性、特异性抗骨肉瘤干扰素。方法 将干扰素IFNalc/86D DNA插入噬菌体质粒载体pCANTAB5E,并构建噬菌体IFNalc/86D AB环变库;通过在OS732细胞上竞争性亲合洗脱、MTT法对比检测抗肿瘤活性,筛选针对OS732细胞的高活性噬菌体-IFN突变体。结果 获得2个噬菌体-IFN突变体,其抗OS732细胞增殖活性较突变母体分别提高4倍和16倍 相似文献
10.