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目的以MDCK细胞为种子细胞、胶原凝胶复合Matrigel为支架材料,采用组织工程技术体外构建组织工程化肾小管片层,观察不同浓度Matrigel以及静态拉伸作用对MDCK细胞在三维支架中极性重建并形成小管样结构的影响。方法将培养的MDCK细胞与添加不同浓度Matrigel的液态Ⅰ型胶原混合,在12孔板内铸模形成MDCK细胞-胶原片层。通过相差显微镜、HE染色、免疫荧光染色等方法对细胞的生长情况及形成的三维肾小管结构进行比较和鉴定。在此实验的基础上,对片层施加静态拉伸力,观察静态拉伸作用对细胞生长、小管样结构形成的影响。结果随培养时间的延长,各实验组片层内的MDCK细胞逐渐增殖、黏附、聚集。单纯以胶原为支架材料的片层内MDCK形成囊腔状结构;添加Matrigel的胶原片层内MDCK细胞可形成管腔样结构,且低浓度Matrigel的胶原片层内细胞存活率高。静态拉伸作用能够刺激细胞的生长、管腔样结构的形成。结论本研究应用组织工程技术,以MDCK细胞为种子细胞、添加Matrigel的液态Ⅰ型胶原为支架材料,培养过程中施加静态拉伸力,体外成功构建出组织工程化肾小管胶原组织片层,肾脏小管上皮细胞可在该支架材料中完成极性重建的自组装过程。 相似文献
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胰腺癌因其位置隐秘,临床症状不典型,难以早期诊断,临床医生应重视胰腺癌的一些早期症状;上腹隐痛、持续腰背痛、不明原因的食欲减低等.利用彩超、CT、螺旋CT等无创检查,协助诊断或鉴别诊断.目前CT开展较普及,又为无创检查,因此认为CT是诊断胰腺癌较好的手段.螺旋CT则更优于一般CT,有报道:螺旋CT因尾影少、成像质量高、速度快、增强后动脉相显示更清楚,其判断胰腺癌血管侵犯的敏感性和特异性都达到100%.螺旋CT与彩超一样可作为诊断胰腺癌的一线检查手段.当影像学检查难以确定时,可行EUS检查,它是目前诊断胰腺癌敏感性、特异性最高的影像学方法之一,由于其不受肠道气体的干扰,而且探头离胰腺更近,显示也更清晰,对早期胰腺癌的诊断价值极高,可以准确地测定肿瘤大小并定位.但减少误诊及漏诊的关键,是临床医生不能忽视胰腺癌的一些非特异性表现,及时利用影像学检查作出诊断,达到早期治疗的目的. 相似文献
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我们观摩过不少的幼儿园教学活动,也认真聆听过一些专家们的点评与建议,针对语言教育活动结合我们的教育教学实践,谈谈自己对组织好一次语言教育活动的一些粗浅看法。 相似文献
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目的 探讨大鼠心肌梗死后慢性心力衰竭模型建立方法及指标评价体系.方法 SD大鼠麻醉后开胸,手术组结扎左侧冠状动脉前降支,制备心梗后心衰模型,假手术组采取仅在相同结扎位置穿针,不结扎的方法.术后8周处死.术前、术后5分钟、处死前分别记录标准肢体导联心电图、心脏超声,评价电生理、心功能指标;处死后采用苏木素-伊红(HE)染色、Masson染色评价病理改变;使用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中B型尿钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)浓度.结果 该研究中手术组及假手术组手术存活率分别为72.5%、75.0%;手术组术后5分钟心电图Ⅰ、Ⅱ、aVL导联出现ST段抬高,T波高耸的典型心肌梗死心电图改变,术后8周ST段、T波回落;此外,术后8周的手术组左室射血分数和左室短轴缩短率均低于假手术组(均为P<0.01),HE染色可见残存心肌细胞、成纤维细胞、毛细血管增生等慢性纤维化表现,Masson染色显示梗死区残存心肌纤维之间纤维瘢痕组织形成;血清BNP水平也明显高于假手术组(均为P<0.01).结论 冠脉结扎法建立心梗后心衰模型存活率高、简单易行,采取的心电、心功能、病理、检验评价指标获取简单、重复性强,便于对模型进行筛选. 相似文献
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在神经系统,Necdin只在成熟神经元的细胞核中表达,可能与成熟神经元分裂静止状态的保持有关.近年的研究表明,Necdin是一种生长抑制蛋白,能与多种因子如SV40大T抗原,腺病毒E1A,转录因子E2F1以及肿瘤抑制蛋白p53等结合,在功能上类似于成视网膜瘤蛋白Rb.necdin基因缺陷时,会引起脑内,特别是下丘脑神经元分化障碍.人类necdin基因位于PWS综合征的基因缺失区,可能与PWS的一些症状有关.本文从Necdin蛋白的基本概况,生物功能以及Necdin与疾病三个方面进行了综述. 相似文献
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目的 观察种植到原代皮层神经元中的PCI2细胞,在神经生长因子(nerve growth factor NGF)作用下分化成的神经元样细胞与原代皮层神经元之间功能性突触的形成,研究细胞移植环境中宿主细胞和移植细胞形成神经连接的可能及过程。方法 将绿色荧光蛋白(enhenced green flourescent protein EGFP)标记的PC12细胞种植到原代神经元中,建立共培养系统。NGF诱导其中的PC12细胞分化为神经元样细胞,可能与共培养的原代神经元形成突触连接。高钾离子的去极化刺激使突触末端囊泡被FM143染色,激光共聚焦扫描显微镜下观察,电子图像显示出活性的突触末端。结果 和对照组相比共培养系统中PC12神经元更成熟,FM1—43造影显示这些新的神经元与原代神经元之间产生了功能性突触囊泡活动。结论 与原代的神经细胞共培养有利于PCI2细胞在NGF作用下分化为神经元样细胞及形成神经突起,新形成的神经元可以和宿主神经元形成突触连接。 相似文献
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实验组织切片荧光染色后再行苏木素-伊红染色的方法及体会 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:初步探索荧光染色后的组织切片再行苏木素-伊红(HE)染色的技术方法和操作程序. 方法:分别用5 μm石蜡、冰冻两种组织切片按常规间接免疫荧光加荧光化学方法进行荧光染色,然后用pH 4.7~5.0 50%的乙醇洗脱封片的缓冲甘油,再进行常规HE染色.分别用荧光显微镜与光学显微镜观察、拍照,进行HE染色效果比较.结果:荧光染色后的组织切片标本再行HE染色,其染色效果和组织细胞结构的清晰度与组织切片单独进行HE染色相比无明显差异.结论:本实验操作方法简单;结果可靠;增加了单张切片的信息含量;节约实验成本;更为组织细胞形态学检测方法的相互转化与衔接提供了技术和思维平台. 相似文献
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探讨神经生长因子(NGF)诱导的交感神经元样PC12细胞作为体外再造心肌神经支配研究模型的可行性。用含0.04?TA的0.25%胰酶分离新生大鼠原代心肌细胞,然后与NGF诱导的交感神经元样PC12细胞共培养,通过光学显微镜观察、常规H.E.染色、激光共聚焦显微镜和扫描电镜观察等对其进行评价。结果表明:在二维共培养模型中,NGF诱导的交感神经元样PC12细胞长出神经突起,突起及其上的膨体能够到达跳动的心肌细胞表面,神经突起随心肌细胞一起跳动。采用神经元样PC12细胞作为体外再造心肌神经支配研究模型是可行的,神经细胞与心肌细胞可能存在支配关系。 相似文献
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目的:观察加味生脉散对大鼠缺血再灌注肾脏损伤的保护作用。方法:双侧肾动脉夹闭45min,再灌注24h,造成大鼠缺血再灌注肾脏损伤模型。分别测定加味生脉散治疗组、病理模型组、假手术组大鼠血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、组织中髓过氧物酶(MPO)和丙二醛(MDA)浓度,并进行组织病理学检查。结果:与病理模型组相比,加味生脉散治疗组的缺血再灌注大鼠血尿素氮下降42.8%(P=0.024),血清肌酐下降55.9%(P=0.011);肾脏组织MPO及MDA含量明显降低(P<0.01);组织病理学改变明显减轻(P<0.05)。结论:加味生脉散可减轻缺血再灌注引起的肾脏损伤,其机制与降低缺血再灌注有关的自由基损伤和炎性损伤有关。 相似文献
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在神经系统 ,Necdin只在成熟神经元的细胞核中表达 ,可能与成熟神经元分裂静止状态的保持有关。近年的研究表明 ,Necdin是一种生长抑制蛋白 ,能与多种因子如SV4 0大T抗原 ,腺病毒E1A ,转录因子E2F1以及肿瘤抑制蛋白p5 3等结合 ,在功能上类似于成视网膜瘤蛋白Rb。necdin基因缺陷时 ,会引起脑内 ,特别是下丘脑神经元分化障碍。人类necdin基因位于PWS综合征的基因缺失区 ,可能与PWS的一些症状有关。本文从Necdin蛋白的基本概况 ,生物功能以及Necdin与疾病三个方面进行了综述 相似文献