视蛋白3调控人真皮成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白生成

目的 研究视蛋白3在正常人真皮成纤维细胞中对Ⅰ型胶原蛋白生成的影响及其可能的机制。方法 取小儿包皮真皮成纤维细胞分离、培养、传代，至3～5代，用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹分别检测视蛋白1～5的表达，细胞免疫荧光检测视蛋白3及Ⅰ型胶原蛋白表达及定位。设计针对人视蛋白3的小干扰RNA,利用脂质体转染入正常人真皮成纤维细胞，分别用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹检验视蛋白3抑制效率。成功下调视蛋白3后，用荧光定量PCR、免疫印迹法、酶联免疫吸附测定及细胞免疫荧光检测Ⅰ型胶原蛋白表达变化；通过CCK-8及EDU检测细胞增殖活力，流式细胞仪检测细胞周期，Transwell检测细胞迁移能力；通过蛋白免疫印迹法检测PI3K、AKT及磷酸化蛋白p-PI3K、p-AKT的表达情况。最后抑制通道蛋白AKT的磷酸化，通过蛋白免疫印迹法检测Ⅰ型胶原蛋白表达变化。结果 视蛋白1～5均在正常人真皮成纤维细胞中表达，其中视蛋白3基因及蛋白表达水平较其他视蛋白表达高，差异有统计学意义(P<0.05)。下调正常人真皮成纤维细胞中视蛋白3后，细胞合成及分泌Ⅰ型胶原蛋白水平降低，差异有统计学意义(P<0.05);...     

MV3和HaCaT细胞接种去表皮真皮组织上构建人工皮肤黑素瘤模型

文章亮点：1以往研究人工皮肤肿瘤组织模型所用的皮肤种子细胞多是分离于人皮肤的角质形成细胞,但是由于供体及伦理的原因使这种直接从皮肤上分离角质细胞建立皮肤模型的方法有一定局限性,而且,因种子细胞的供体及部位不同,其建立的皮肤模型可能存在着差异。     

干燥性闭塞性龟头炎1例

<正>1临床资料患者男,37岁。龟头红斑、血疱、色素脱失2年余。患者2年前龟头系带连接处出现一直径1cm大小的红斑,无明显不适,约10d后消退,不留瘢痕,无脱屑肥厚。此后性生活时,原红斑处会有破损伴少量出血,并在其两侧出现血疱,直径约0.5cm,疱     

儿童斑秃外周血Th17及Treg细胞相关细胞因子水平的变化及意义

目的探讨儿童斑秃患者外周血Th17及Treg细胞相关细胞因子水平的变化及意义,从免疫学角度分析T淋巴细胞在儿童斑秃发病机制中发挥的作用。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测50例儿童斑秃患者血清中Th17及Treg细胞相关细胞因子(IL-17、IL-6、TGF-β)水平,并与同期50例健康体检儿童进行比较。结果观察组外周血IL-17、IL-6水平显著高于对照组(P<0.05),TGF-β水平显著低于对照组(P<0.05);观察组中,不同脱发面积、病程长短、病情活动与否及是否初发间IL-17、IL-6、TGF-β水平差异均有统计学意义(P<0.05);观察组IL-17与IL-6水平呈显著正相关(r=0.760,P<0.001),而IL-17、IL-6与TGF-β水平均呈显著负相关(r值分别为-0.659、-0.642,P<0.001)。结论儿童斑秃的发病可能与Th17及Treg细胞相关细胞因子表达水平异常有关,其中Th17细胞相关细胞因子表达亢进,Treg细胞相关细胞因子表达下降。     

消斑美肤汤对黄褐斑患者血清一氧化氮及丙二醛的影响

目的 观察消斑美肤汤治疗肝肾阴虚型黄褐斑患者的临床疗效及对患者血清一氧化氮（NO）及丙二醛（MDA）水平的影响.方法 将106例肝肾阴虚型黄褐斑患者随机分为2组,治疗组口服消斑美肤汤,对照组口服维生素C及维生素E.治疗3个月后对比2组患者临床症状评分并检测血清一氧化氮及丙二醛水平.结果 治疗组疗后评分显著低于对照组疗后评分（P＜0.05）.治疗组治疗后一氧化氮及丙二醛水平均明显低于治疗前水平,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 消斑美肤汤能降低血清一氧化氮及丙二醛水平,减少黑色素的形成,并起到消除或减轻黄褐斑的作用.     

MV3和HaCaT细胞接种去表皮真皮组织上构建人工皮肤黑素瘤模型

背景：课题组曾成功的用MV3黑素瘤细胞和人角质形成细胞体外重建黑素瘤三维模型。 目的：利用MV3黑素瘤细胞和HaCaT细胞结合去表皮的真皮体外重建黑素瘤模型。 方法：MV3黑素瘤细胞和HaCaT细胞按照不同比例混合接种于人去表皮的真皮组织上,采用液下培养和空气-液面培养相结合技术进行培养,体外构建组织工程皮肤模型。对所构建的皮肤黑素瘤模型进行常规切片免疫组化观察。 结果与结论：苏木精-伊红染色显示MV3黑素瘤细胞在去表皮真皮表面成层分布或形成瘤灶,HaCaT细胞和瘤细胞混合生长,形成典型的表皮样结构。部分瘤细胞浸润到去表皮真皮浅层或内部,成瘤灶分布。CK10、CK-pan和S-100免疫组化染色显示阳性。随着MV3∶HaCaT细胞比例的增高,CK10,CK-pan由表层逐渐下移,由层状分布变为团块状分布,S-100蛋白染色则分层逐渐明显,部分区域成瘤状分布。结果可见利用MV3黑素瘤细胞和HaCaT细胞结合去表皮真皮体外可以构建皮肤黑素瘤模型。     

芒柄花素对人表皮共培养体黑素合成的影响

目的观察芒柄花素对人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养体系模型(人表皮共培养体)中酪氨酸酶活性及黑素合成的影响。方法建立人表皮共培养体,建成后分别加入30 mg/L、60 mg/L、120 mg/L芒柄花素,熊果苷为阳性对照组,测定芒柄花素和熊果苷对人表皮共培养体中酪氨酸酶活性以及黑素合成的影响。结果芒柄花素3种浓度对人表皮共培养体中酪氨酸酶活性及黑素合成与对照组比较均有明显抑制作用(P0.05),且浓度越高抑制作用越明显(P0.05)。高、中浓度芒柄花素黑素抑制率高于熊果苷(P0.05)。结论芒柄花素对黑素合成有明显抑制作用,机理与其对酪氨酸酶活性有抑制作用相关。     

养血祛风汤对特应性皮炎小鼠模型血清IgE、IL-4和IFN-γ的影响

目的观察养血祛风汤对特应性皮炎小鼠模型血清Ig E、白细胞介素(IL)-4、干扰素(IFN)-γ的影响。方法选取30只小鼠,经2、4-二硝基氟苯造模成功后,将小鼠分为实验组、对照组、空白组,分别给予相应药物灌胃,15 d后采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组Ig E、IL-4、IFN-γ水平。结果对照组小鼠皮损处改变病理符合特应性皮炎改变,血清Ig E、IL-4水平升高,IFN-γ水平下降,经养血祛风汤治疗后,实验组血清Ig E、IL-4水平显著下降(P0.01),IFN-γ水平升高(P0.05)。结论养血祛风汤有调节特应性皮炎小鼠模型血清Ig E、IL-4、IFN-γ水平的作用,同时对皮损处红斑、渗出、苔藓化有明显改善。