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1.
目的 研究EB病毒转化外周血B淋巴细胞建成的永生细胞株在传代过程中遗传特性是否发生改变.方法 对10株永生细胞株进行30代的长期传代培养,采用染色体显带、微卫星DNA及端粒酶活性检测技术,观察不同传代次数的永生细胞株二倍性、染色体核型、微卫星DNA及端粒酶活性的改变.结果 永生细胞株在30代以内,在染色体二倍性、核型、微卫星DNA方面保持稳定,未检测出端粒酶活性.结论 经EB病毒转化的永生细胞株在有限代次内遗传特征是稳定的. 相似文献
2.
建立不同民族永生细胞株质量控制方法的探讨 总被引:1,自引:0,他引:1
目的以建立普米族、独龙族和怒族永生细胞为基础,探讨EB病毒转化细胞、细胞培养、冻存、复苏以及支原体检测等建立永生细胞株的技术要点及质量检测方法.方法采用EB病毒转化技术建立3个民族永生细胞株;培养法和PCR法对细胞株进行支原体污染检测;染色体G显带及核型分析细胞株的遗传稳定性.结果成功建立了3个民族B淋巴细胞永生细胞株,转化率分别为98%、86%和76%.对已建株保存的3个民族的永生细胞进行复苏培养,复苏成活率为100%.支原体污染检测均为阴性.染色体计数和G带分析显示,细胞株经早期传代培养后,仍然保持二倍体特征,未发现染色体结构畸变.结论本研究中传代培养、细胞冻存、细胞复苏和支原体污染防范等一整套技术过程是满足建库要求的.同时为大规模永生细胞库的建立和进行相应的质量监测提供了科学的依据.另外,本研究还对一些影响转化的因素和可能的机理进行了探讨. 相似文献
3.
藏汉民族线粒体基因组全序列的比较研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 以藏汉民族线粒体基因组全序列为基础,进行Haplogroup构建和系统发生分析,在全序列水平上比较核苷酸的变异,阐释可能的变异机制和蕴含的生物学意义.方法 采用Applied Biosystems 3730DNA自动测序仪分别对40名藏族和50名汉族的标本进行线粒体DNA序列测定,应用phredPhrap 16.0软件进行全序列拼接,并以rCRS(revised Cambridge Reference Sequence)为标准与测定序列进行比对分析;根据MTTO-MAP的标准,通过Network方法进行Haplogroup构建和系统发生的分析,并结合其它方法对产生的数据进行深入解读.结果 数据分析结果显示:在系统发生上,藏汉民族90个线粒体DNA序列归类到13个Haplogroups,除M9以外,其它各Haplogroup出现频率之间比较差异无统计学意义;通过两个民族的线粒体DNA全序列比对,发现21个分布频率有统计学意义的变异位点,其中的5个为新变异位点;另外,对D-Loop区的5个突变位点进行了单倍型构建,90个标本可分为2种Supertype,发现在藏汉民族之间Supertypel和Supertype 2的分布频率均有统计学意义.结论 藏汉民族在种族起源和系统发生上具有较近的母系遗传关系;在全序列有统计学意义的位点究竟是适应性或者中性选择,抑或是一种病理性突变尚需深入的探讨. 相似文献
4.
5.
目的:建立喉症丸中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法进行测定,Thermo C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%磷酸二氢钾(用磷酸调节pH=3.2)(40∶60),流速1.0mL·min~(-1),检测波长296nm,柱温40℃,进样体积10μL。结果:该方法系统适应性良好,华蟾酥毒基、脂蟾毒配基分别在48.70~113.64μg·mL~(-1)(r=0.999 8)和9.23~21.53μg·mL~(-1)(r=0.999 8)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为101.1%(RSD=0.6%,n=6)、100.6%(RSD=0.1%,n=6),该方法精密度良好,流速和柱温耐用性考察均符合要求。结论:该方法简便准确、灵敏、重复性好,适用于喉症丸中蟾酥的质量控制。 相似文献
6.
bcl-2 bcl-x和bax基因多态性与系统性红斑狼疮易感相关性 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 探讨bcl-2、bcl-X和bax基因中7个多态位点同系统性红斑狼疮(SLE)是否存在相关性。方法 采用引物引入限制性内切酶分析(PIRA-PER)、四引物扩增阻滞突变系统以及单链构象多态性(SSCP)技术,分析100名正常人和88例SLE患者bcl-2基因的3个单核苷酸多态性(SNP)位点(dbSNP:rs1800477,rsl801018.rs1564483)、bcl-x基因的3个SNP位点(dbSNP:rs6060900,rs6089046,rs5841091)及bax基因的1个微卫星位点。以Logistic回归分析统计实验数据。结果 SLE患者组bcl-2基因rs1800477位点的GG基因型频率高于正常人群(P=0.013),rs1564483位点GG基因型频率则低于正常人群(P=0.024);rs1801018位点则无统计学意义。bcl-x和bax的所选位点均没有表现出多态性。结论 bcl-2基因rs1800477和rs1564483两位点多态性可能与SLE相关。 相似文献
7.
目的:探讨引起急性腹泻门诊病例的常见病原体,为临床治疗提供参考.方法:回顾性分析2016年1月2017年1月某院感染科收治的300例急性腹泻门诊病例的临床及病原学资料.结果:300例感染性腹泻患者,夏季发病率最高占29.27%,其次为秋季16.50%.大便培养阳性118例,其中病原菌构成比前3位分别为大肠埃希菌30.51%、喇疾杆菌23.73%和肠球菌属11.01%;轮状病毒检测阳性47例.婴幼儿感染性腹泻以轮状病毒为主要病原,学龄前期儿童以大肠埃希商和疯疾杆菌为主要病原.结论:急性腹泻门诊病例病原复杂多样,临床诊治过程中应重视病原学诊断,以合理用药. 相似文献
8.
目的了解甘肃省兰州市城关区男男性接触人群(men who have sex with men,MSM)艾滋病和梅毒流行趋势,分析相关危险因素,为降低MSM人群艾滋病和梅毒感染率提供科学依据。方法分析2012—2013年城关区MSM人群相关知识、行为调查问卷和血清学相关资料。结果在调查的801名MSM人群中,年龄最小17岁,最大57岁,21~30岁居多,占52.18%;高中文化程度居多,占41.95%,未婚占73.16%,本地户籍占92.76%;艾滋病相关知识知晓率为81.40%,最近一次与同性发生肛交行为安全套使用率为81.52%,最近六个月与同性发生肛交行为每次都使用安全套的比例仅为35.46%;有49.93%的MSM人群在最近六个月发生过商业性肛交性行为,每次都用安全套的比例为62.25%;有15.36%的MSM人群在最近六个月与异性发生过性行为,每次都用安全套的比例为51.22%;HIV阳性率3.75%,梅毒阳性率10.61%。结论兰州市城关区MSM人群安全套坚持使用率低、多性伴、梅毒感染率较高等促使HIV的传播,部分MSM双性恋的行为,使HIV具有向普通人群传播的危险。 相似文献
10.