Visfatin基因表达下调对小鼠脂肪细胞及肝细胞脂代谢的影响

目的探讨Visfatin基因表达抑制对小鼠脂肪细胞及肝细胞脂代谢相关基因的影响。方法构建并筛选具有最佳抑制率的pGene-sil-Visfatin表达载体,转染小鼠3T3-L1脂肪细胞及Hepa1-6肝细胞,Western印迹法测定两种细胞的Visfatin蛋白水平,实时荧光定量PCR法测定Vis-fatin、脂代谢相关基因的mRNA表达水平,油红O染色法测定脂肪细胞内甘油三酯(TG)含量变化。结果 pGenesil-visfatin可有效抑制两种细胞Vis-fatin蛋白表达。脂肪细胞转染pGenesil-Visfatin后,脂代谢相关基因PPARα/γ,HSL,ATGL,AP2,SREBP1,FAS,ACC mRNA表达均下降(其中PPARγ与ACC P<0.05,余P<0.001),TG含量降低,但无统计学差异;肝细胞转染后,PPARα,SREBP1,FAS以及SREBP2,HMGCR,LDLr mRNA表达显著降低(P<0.001),而HSL,ATGL与ACC变化无统计学意义(P>0.05)。结论 Visfatin基因表达下调可能对细胞脂质代谢具有调节作用。     

血小板参数在乳腺癌患者早期诊断中的价值

目的 探讨血小板参数测定在乳腺癌早期诊断中的应用价值.方法 回顾性分析2015年1-12月该院收治的103例乳腺癌患者与117例纤维腺瘤患者入院24 h内的静脉血血小板参数,包括血小板计数(PLT)、血小板压积(PCT)、平均血小板体积(MPV)、平均血小板内容物浓度(MPC)、平均血小板内容物含量(MPM)、血小板分布宽度(PDW),与100例同期健康体检人群作对照组进行比较,并绘制ROC曲线评价血小板各参数的诊断效能.结果 与对照组相比,纤维腺瘤组和乳腺癌组的PLT、PCT显著增高(P＜0.01),MPC、MPM、PDW显著降低(P＜0.01),MPV差异无统计学意义(P＞0.05);与纤维腺瘤组相比,乳腺癌组的MPC明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).MPC用于诊断乳腺癌的ROC曲线下面积最高(AUC=0.841),当诊断临界值为249.5 g/L时,敏感性为82.5％,特异度为73.6％.结论 血小板参数的检测,尤其是MPC,对乳腺癌的早期诊断具有一定的应用价值.     

未知功能基因JAZF1过表达对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢的影响

目的 观察JAZF1基因(Juxtaposed with another zincfinger gene 1)过表达对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢相关基因的影响.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-QPCR)法检测JAZF1 mRNA在健康C57BL/6J小鼠多种组织表达分布情况;构建JAZF1真核表达载体并瞬时转染3T3-L1细胞,RT-QPCR法检测JAZF1、糖脂代谢相关基因mRNA的表达;用Western印迹法测定各组细胞JAZF1蛋白水平;油红O染色比色法检测细胞内脂质积聚的变化.结果 转染48 h后,JAZF1转染组脂肪细胞中,JAZF1 mRNA及蛋白表达明显高于阴性对照和空载组,激素敏感脂肪酶(HSL)mRNA表达水平明显增加(P<0.05),脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、类固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)mRNA相对表达量明显降低(均P<0.01),脂肪细胞甘油三酯酶(ATGL)、葡萄糖转运子1(GLUT1)、GLUT4 mRNA表达并无明显改变;油红O染色显示JAZF1转染组细胞内脂质积聚明显降低(P<0.05).结论 JAZFl在C57BL/6J小鼠多种组织均有表达,提示其可能在维持正常生理功能中起着一定作用.3T3-L1细胞过表达JAZF1可减少脂质合成、增加脂解,并可明显改善脂质积聚,可能是肥胖和糖尿病治疗的一个潜在靶点.     

p53诱发转录因子FoxM1在卵巢癌中的表达及临床意义

目的研究p53诱发转录因子FoxM1在卵巢癌中的表达及其临床意义。方法首先在卵巢癌患者组织中初步鉴定p53和FoxM1表达;其次在A2780细胞培养过程中添加Nutlin-3、CHX、PFTα调控p53的表达,再鉴定FoxM1表达情况,分析两者相关性;最后,调控p53表达量后研究DPP促使A2790凋亡的能力。结果在卵巢癌患者组织样品中,随着Ⅰ~Ⅳ期分级,p53和FoxM1表达量显著上升;添加Nutlin-3、CHX、PFTα后A2780细胞生长状况无明显的变化,其中CHX和PFTα组p53表达显著抑制,FoxM1也随之明显下降,Nutlin-3组p53表达显著上升,FoxM1也随之上升;在A2780细胞中添加DPP后,p53和FoxM1表达量均显著降低;上调p53表达后,A2780对DPP的敏感性显著增强,诱导细胞凋亡效果明显。结论在卵巢癌细胞中,p53诱发FoxM1的表达,此外p53和FoxM1参与DPP诱导卵巢癌细胞的凋亡途径。     

血气分析仪与干化学仪测定血钾离子结果比较

目的分析血气分析仪与干化学仪测定血钾离子结果的可比性。方法以干化学检测系统为比较方法(X),以血气分析仪检测系统为实验方法(Y),对同一时间采集的ICU新生儿动脉血进行血钾离子检测,以医学决定水平浓度的系统误差小于或等于美国临床实验室修正法规CLIA′88允许总误差(TEa)的1/2为标准,判断结果的可比性。结果两种检测系统的血钾离子结果有直线相关关系(r=0.976,P<0.01),3个医学决定水平中,仅在3.0mmol/L处时两种系统间的系统误差可被临床接受。结论血气分析仪检测的全血钾离子浓度低于干化学仪测定的血清钾离子浓度,应以干化学仪检测结果作为诊疗依据,而血气分析仪结果仅供参考。     

0岁～3岁婴幼儿呼吸道病毒IgM抗体检测分析

目的了解广东省妇幼保健院0岁~3岁呼吸道感染患儿五种常见呼吸道病毒特异性IgM的检测情况,指导临床治疗及合理用药。方法收集2015年3月~2016年2月医院因呼吸道感染住院0岁~3岁的4607例患儿血清标本,采用间接免疫荧光法(IFA)同时检测甲型流感病毒(IV-A)、乙型流感病毒(IV-B)、副流感病毒(PIV)、腺病毒(ADV)和呼吸道合胞病毒(RSV)5种呼吸道病毒的IgM抗体,比较不同季节感染阳性率,并比较不同年龄及性别感染阳性率。结果 4607例样本中共检出IgM抗体阳性664例(14.41%),其中混合感染98例,占14.76%(98/664);被检病毒中IV-B阳性率最高,占61.30%,其次为ADV、PIV、RSV和IV-A,分别占12.95%、12.35%、9.49%和3.91%;随年龄增长阳性率逐渐增高,不同年龄患儿病毒阳性率差异有统计学意义(χ2=141.355,P0.05),其中2~3岁患儿阳性率最高,达34.40%;春季感染率最高,达26.79%,不同季节的病毒感染率差异有统计学意义(χ2=143.374,P0.05);不同性别患儿病毒感染率差异无统计学意义。结论 IV-B感染是医院婴幼儿呼吸道感染的主要病原体,2~3岁婴幼儿的病毒感染率最高,病毒感染不同季节差异明显,高发于春季。     

铁螯合剂和硝酸镓对碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌生长的影响

目的：检测铁螯合剂和硝酸镓对临床标本分离的碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌生长的抑制作用,分析铁螯合剂及硝酸镓的抗菌机制。方法采用微量稀释法检测铁螯合剂和硝酸镓对20株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的抑制作用,同时观察不同铁离子浓度对硝酸镓抑菌作用的影响。结果铁螯合剂去铁胺和去铁铜对试验菌株的最低抑菌浓度（MIC）值分别为32μmol／L和64μmol／L,而硝酸镓对试验菌株的MIC值为16μmol／L,各菌株对同一种药物的MIC值相同,且高浓度的铁离子能够降低硝酸镓的抑菌作用。结论铁螯合剂通过结合铁离子,硝酸镓通过与铁离子竞争,均限制细菌对铁的摄取和利用,干扰细菌铁代谢途径而抑制细菌生长,具有较强的抗菌作用,对碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的生长具有抑制作用。     

高脂喂养apoE~(-/-)小鼠组织成纤维细胞生长因子21及其受体的改变

目的 探讨在环境和遗传因素共同诱导的胰岛素抵抗状态下组织成纤维细胞生长因子21(FGF-21)及其受体(FGFR)的变化.方法 雄性apoE~(-/-)小鼠,随机分为普通喂养组(NF组,n=20)和高脂喂养组(HF组,n=20),喂养16周.以3-[~3H]-葡萄糖为示踪剂的扩展胰岛素钳夹技术评价小鼠胰岛素敏感性和糖代谢变化.用实时荧光定量PCR法检测肝脏和脂肪组织FGF-21、FGFR1、FGFR2、FGFR3和FGFR4以及β-klotho mRNA表达,用Western印迹法测定血浆和组织FGF-21蛋白水平.结果 HF组小鼠空腹血糖、血浆胰岛素、甘油三酯、游离脂肪酸和胆固醇水平明显升高(均P<0.01).在钳夹稳态时,HF组血浆胰岛素水平明显高于NF组(P<0.01),HF组葡萄糖输注率(GIR)明显低于NF组(P<0.01).在钳夹结束时,HF组葡萄糖清除率(G_(Rd))明显低于NF组(P<0.01).钳夹稳态期,NF和HF组肝糖输出率(HGP)分别被抑制约70%和51%(均P<0.01).HF组肝和脂肪组织FGF-21和β-klotho mRNA水平均明显高于NF组(均P<0.01).HF组肝和脂肪组织FGFR1和FGFR3 mRNA的表达明显较NF组显著增高(P<0.01和P<0.05).FGFR4 mRNA水平在HF组肝组织中的表达明显高于NF组(P<0.05).HF组血浆FGF-21蛋白水平明显高于NF组(P<0.01),肝和脂肪组织FGF-21蛋白水平也显著升高(均P<0.05).结论 高脂喂养apoE~(-/-)小鼠FGF-21、β-Klotho及FGFR1和FGFR3水平显著升高,它们可能是FGF-21调节糖脂代谢的主要作用靶点.     

T2DM患者空腹血浆视黄醛结合蛋白-4水平及对罗格列酮治疗的反应

目的：测定2型糖尿病（T2DM）患者空腹血浆视黄醛结合蛋白-4（RBP-4）浓度,并观察罗格列酮对血浆RBP-4的影响．方法：34例单用二甲双胍降糖治疗效果欠佳的T2DM患者（T2DM组）加用罗格列酮4mg／d治疗12wk．30例新近诊断未使用任何降糖药物的初发T2DM患者（nT2DM组）．检测nT2DM组及T2DM组治疗前后的体质量指数（BMI）、腰臀比（WHR）、血压、体脂含量（FA）（％）等．采用放免法测定血浆RBP-4水平和胰岛素水平;酶法检测血糖和血脂;高压液相法检测糖基化血红蛋白（HbAlc）,计算胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）和分泌指数（HOMA—IS）,评价各个代谢指标与血浆RBP-4的相关性．结果：T2DM组RBP-4水平高于nT2DM组[（20．40±0．99）vs（16．94±0．78）mg／L,P〈0．01]．罗格列酮治疗后,患者游离脂肪酸（FFA）、HbAlc、空腹血糖（FPG）、餐后2h血糖（2hPG）、HOMA—IR（均P〈0．01）,空腹胰岛素（Fins）显著降低（P〈0．05）．但RBP-4水平变化差异无统计学意义．空腹血浆RBP-4水平与性别（r=0．292,P=0．019）、三酰甘油（TG）（r=0．287,P=0．021）和2 h Pins（r=0．329,P=0．008）显著相关．多元逐步回归分析结果表明,2 h Pins是影响血浆RBP-4水平的独立相关因素．结论：初发T2DM患者RBP-4水平明显低于血糖控制不佳的T2DM患者,罗格列酮治疗可以降低血糖控制不佳T2DM患者血糖,改善胰岛素敏感性,但未明显改变血浆RBP-4水平．     

JAZF1基因过表达对鼠肝细胞糖脂代谢相关基因表达的影响

目的探讨JAZF1过表达对鼠肝细胞IAR-20及Hepa1-6糖脂代谢相关基因的影响。方法克隆鼠JAZF1编码区并构建pIRES2-EGFP-JAZF1表达载体,利用脂质体法将目的基因转染到鼠肝细胞IAR-20及Hepa1-6中,采用实时荧光定量PCR测定各处理组JAZF1 mRNA表达情况,以及糖脂代谢相关基因SREBP1、AOC、FAS、HSL、PPARa、ATGL、G1uT-1、G1uT-4和细胞因子FGF-21mRNA的变化情况。结果JAZFl基因在鼠肝细胞中过表达导致脂代谢基因SREBP1,ACC,FAS表达降低（P〈0．01）,PPARa和HSL表达增加（P〈0．01）,对AXG-L无影响（P〉0．05）,使糖转运相关基因GluT-1表达增加（P〈0．01）,GluT-4无显著变化（P〉0．05）,对FGF-21无影响（P〉0．05）。结论JAZF1过表达可以抑制肝细胞的脂肪生成,促进脂肪分解,并可能增加基础葡萄糖转运。