莱菔硫烷对人膀胱癌细胞周期的影响及机制研究

背景与目的:探讨莱菔硫烷对人膀胱癌细胞(T24)细胞周期的影响及作用机制。材料与方法:采用噻唑蓝(MTT)法研究不同浓度的莱菔硫烷对T24细胞生长的抑制作用并测定其半数抑制浓度(IC50);采用流式细胞仪检测莱菔硫烷对T24细胞周期的影响;采用westernblot研究莱菔硫烷对T24细胞中细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂P16和P27的表达情况。结果:在较低剂量范围内(≤40μmol/L),随着作用剂量的增加,莱菔硫烷对T24细胞的生长的抑制作用也明显增强。10、20、40μmol/L莱菔硫烷的抑制率分别为(12.5±3.95)%,(25.0±2.50)%、(50.0±5.33)%;在较高剂量(60μmol/L~160μmol/L)时,这种抑制作用不再呈剂量依赖性;莱菔硫烷作用72h后的IC50值为(51.12±7.10)μmol/L;莱菔硫烷能使T24细胞周期阻滞于G0/G1期,20μmol/L莱菔硫烷作用48h后,在G0/G1峰之前出现凋亡峰;20μmol/L莱菔硫烷作用于T24细胞8、12、24h后能明显诱导P27蛋白的表达,作用早期(8h)时能诱导P16蛋白的表达。结论:莱菔硫烷能抑制T24细胞生长并使该细胞周期阻断在G0/G1期,其作用机制主要是通过诱导P27蛋白及早期诱导P16蛋白来实现的。     

075十字花科蔬菜的癌症预防作用

十字花科蔬菜富含芥子油苷类植物化学物.人们日常食用的许多蔬菜(如白菜、菜花、卷心菜、甘蓝等)都属于十字花科.流行病学研究及实验研究发现十字花科蔬菜具有显著的抗癌作用,起主要作用的是其中以芥子油苷为前体存在的异硫氰酸盐.本文综述了近年来十字花科蔬菜中芥子油苷类植物化学物的抗癌作用研究进展.     

药物代谢酶维生素E琥珀酸酯抑制苯并(a)芘

目的　探讨药物代谢酶在维生素E琥珀酸酯 (VES)抑制苯并 (a)芘毒性中的作用。方法　建立B(a)P诱导的小鼠前胃癌模型 ,观察不同途径投予VES对前胃癌的抑制作用。再选择最佳途径观察两相药物代谢酶在此过程中的变化。采用免疫荧光光度法检测小鼠肝脏微粒体 (S - 9组分 )中Ⅰ相药物代谢酶乙氧基异吩恶唑 0 -脱乙基酶(Ethoxyresorufin 0 -deethylase,EROD)活性 ;应用试剂盒测定S - 9组分中Ⅱ相药物代谢酶谷胱甘肽 -S -转移酶(GST)活性。结果　经口投予和腹腔注射VES均可明显降低B(a)P诱导的小鼠前胃癌的发生。VES可显著降低肝脏Ⅰ相药物代谢酶乙氧基异吩恶唑 0 -脱乙基酶 (EROD)的活性 (39 1± 3 0 5 ) ,与阳性对照组 (5 7 9± 3 16 )比较 ,有显著性差异。结论　VES可降低B(a)P诱导的小鼠前胃癌 ,作用机制可能是通过影响肝脏药物代谢酶的活性来实现。     

PBL教学法在预防医学本科教学中的应用效果

为了深入开展医学院校的教学改革,从PBL小组学生的问卷调查、教学督导委员会的反馈和学习成绩三个方面对预防医学本科的营养与食品卫生学课程PBL教学的效果进行了评估。结果发现学生的学习成绩和能力方面均有提高,但是,学生在主动学习的意识、自信心和与其他同学合作方面有待进一步提高。可见,PBL教学方法在预防医学本科的应用值得深入开展。     

莱菔子素对人肝细胞Ⅱ相代谢酶的作用研究

目的:探讨莱菔子素(sulforaphene)对人肝细胞系HHL-5细胞Ⅱ相代谢酶的影响。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法测定莱菔子素对HHL-5细胞的毒性作用;蛋白印记法(western blotting)检测莱菔子素对Ⅱ相代谢酶蛋白表达的影响。结果:5μmol/L莱菔子素处理HHL-5细胞24h促进细胞增殖,10～100μmol/L表现生长抑制作用;莱菔子素能明显诱导血红素加氧酶(HO-1)和硫氧还蛋白还原酶(TrxR)蛋白的表达并呈剂量依赖关系。结论:莱菔子素可诱导肝细胞Ⅱ相代谢酶HO-1和TrxR的表达,具有潜在的化学致癌物解毒功能。     

莱菔硫烷对膀胱癌细胞侵袭能力的影响及机制研究

目的:探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对膀胱癌细胞侵袭性及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)影响和作用机制。方法:常规培养膀胱癌细胞株T24后,采用Transwell侵袭小室法观察SFN对T24细胞体外侵袭能力的影响;采用Western blot法检测SFN作用T24细胞后EMT标志蛋白的表达变化。结果:10μmol/L SFN作用24h后的T24细胞穿透能力显著下降,明显诱导EMT标志蛋白E-cadherin的表达增高并下调vimentin的表达(P0.05)。结论:SFN能降低膀胱癌细胞的侵袭能力,其作用机制与抑制膀胱癌细胞EMT过程有关。     

维生素E琥珀酸酯诱导人胃癌细胞凋亡的作用

以人胃腺癌ＳＧＣ－７９０１细胞为实验模型，观察了维生素Ｅ琥珀酸酯对其生长的抑制作用，并且采用电镜，流式细胞术和末端脱氧核苷酸标记检测了ＶＥＳ诱导ＳＧＣ－７９０１细胞凋亡情况。结果表明，２０μｇ／ｍｌ ＶＥＳ处理ＳＧＣ－７９０１细胞４天，细胞生长抑制率达１００％，本研究结果还显示ＶＥＳ可诱导ＳＧＣ－７９－１细胞经历调亡，同样在２０μｇ／ｍｌ剂量下处理细胞２天，可引起８９．９６％引起的细胞凋亡。     

肝细胞分离技术中的关健因素

肝细胞分离方法的研究经历了机械震摇法、一步胶原酶灌注术、两步胶原酶灌注术三个主要的发展阶段。在这个漫长的发展过程中，钙离子和胶原酶的作用及两者的关系研究在肝细胞分离方法的发展中起决定性的作用。本文将简要地综述一下它们在肝细胞分离中的作用机理和作用特点。１　肝细胞分离方法的建立和意义　　人们最初试验分离肝细胞是在１９４０—１９６５年。当时已经认识到钙离子在细胞连接中起重要作用，即当钙离子缺乏时，肝细胞发生分离。在此理论基础上设计出了原始的肝细胞分离方法—机械震摇法〔１〕。但是，在随后的应用研究中即…     

莱菔硫烷对人膀胱癌细胞生长的影响及机制研究

目的:研究莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对人膀胱癌细胞生长的影响及作用机制。方法:以人膀胱癌细胞系T24细胞为离体研究对象,通过AO/EB荧光染色观察SFN诱导T24细胞凋亡核形态改变;采用流式细胞仪检测SFN对T24细胞周期的影响;RT-PCR法和Westernblot法检验SFN在mRNA和蛋白水平上对TrxR表达的影响。结果:(1)10μmol/L和20μmol/LSFN作用T24细胞24h和48h后,荧光显微镜下可见细胞核碎裂和凋亡小体的出现。(2)流式细胞仪检测可见,SFN能使T24细胞周期阻滞于G0/G1期,20μmol/LSFN作用48h后,在G0/G1峰之前出现凋亡峰。(3)RT-PCR结果:10μmol/LSFN作用T24细胞4h,10h,24h,TrxRmRNA表达有所增加,20μmol莱菔硫烷作用10h,24h后,TrxRmRNA表达明显增加。(4)Westernblot分析表明,10μmol/LSFN作用T24细胞24h和20μmol/LSFN作用T24细胞8h和24h后,TrxR蛋白表达有明显增加。结论:SFN能抑制T24细胞的生长,诱导T24细胞凋亡并使其细胞周期阻滞于G0/G1期,其作用机制与诱导TrxR的转录和翻译水平有关。