葡萄糖醛酶转移酶的分子生物学研究进展

葡萄糖醛酸转移酶(UDP-glucuronosyl transferase,UGT)是化学物质体内生物转移化第二时相中最重要的代谢酶,它是一个超基因家族.该酶能催化葡萄糖醛酸与大量的外源性和内源性化学物质进行葡萄糖醛酸结合反应.随着UGT基因的克隆和基因产物的表达成功,人们对UGT的功能和基因结构的认识逐渐深入.本文就UGT的功能、基因结构及与UGT基因有关的胆红素代谢缺陷性疾病作一简要的综述.     

细胞色素P450 3A4基因多态性及与肝癌易感性研究

目的 探讨细胞色素P450 3A4(CYP3A4)基因的多态性与肝癌的关系。方法 应用聚合酶链反应（PCR）、变性梯度凝胶电泳（DGGE）、单链构象多态（SSCP）和DNA测序技术，对84例肝癌患者和144例健康对照的CYP3A4基因的多态性进行了研究。结果 通过对CYP3A4基因10个外显子的检测，发现2例肝癌患者的第7外显子第15742位核苷酸发生了A→G转换，使得第183位氨基酸残基由天冬酰胺转变为丝氨酸；发现第10内含子存在一单核苷酸多态，表现第20338位核苷酸发生了G→A转换。病例组G／G、G／A和A／A基因型频率分别为59.52％,36.90%和3.58%；对照组则为59.72%，33.33%和6.95％。两组比较没有统计学差异。结论 CYP3A4基因可能高度保守，虽有突变，但属罕见。     

王成祥治疗特发性肺纤维化经验

特发性肺间质纤维化(IPF)是一种以进行性呼吸困难和慢性咳嗽为其突出症状,病理表现为肺部瘢痕组织的慢性炎症性间质性肺疾病,发病机制包括慢性炎症假说和肺损伤后异常修复(纤维化)等。IPF症状明显,发作频繁者,严重影响了患者的生存质量,但目前尚无有效治愈手段,抗纤维化药物、糖皮质激素和抗增殖药物为其主要治疗药物。传统中医药强调辨证论治,对症治疗。根据症状,IPF属于中医“肺痹”“喘症”范畴,中医学认为肺痹主要病机为肺肾亏虚为其本,痰浊、湿邪、瘀血、热毒等邪实为标,病位在肺,涉及肾、脾等脏。在中医辨证论治指导下,王成祥教授在临床中对IPF患者对症施治,取得了良好疗效,为改善IPF患者症状,提高患者生存质量提供了宝贵经验。     

从免疫炎性损伤角度探讨5种清热解毒药物抗流感的机制及其临床意义

目的探讨黄芩、板蓝根、白头翁、虎杖、白花蛇舌草5种清热解毒代表药物抗流感病毒感染所致免疫炎性损伤的作用机制。方法在流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株FM1感染小鼠后的不同时相(初期、极期、后期),采用ELISA法,动态观察清热解毒代表药物对小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、γ干扰素(IFN-γ)5种炎性细胞因子含量的影响。结果黄芩在感染后第3日可显著降低血清TNF-α、IL-1、IL-6含量,并于感染后各时相均可增加IFN-γ含量,感染后第1~5日增加IL-10含量。板蓝根在感染后第3日能显著降低血清TNF-α含量,第3~5日降低IL-6含量,并在感染后第1天升高IL-10含量,在感染后第3~5日能升高IFN-γ含量。白头翁在感染后第3日能明显降低血清TNF-α、IL-1、IL-6含量,同时显著升高IL-10含量。虎杖在感染后第1日可显著升高血清IL-10含量,在感染后第5日升高IFN-γ含量。白花蛇舌草在感染后第3日降低血清IL-6含量,在感染后第5日升高IFN-γ含量。结论黄芩的抗流感作用主要表现在流感病毒感染引起的急性外感热病的极期;板蓝根在流感病毒感染的各个时相均有一定的治疗作用;白头翁在流感病毒感染的极期可抑制炎性损伤;虎杖在感染流感病毒的初期与后期均可减少促炎性细胞因子的分泌;白花蛇舌草在流感病毒感染的极期及后期均可起到一定的抗免疫炎性损伤。各药物均具有抑制炎性损伤、防止多脏器功能衰竭、防止休克、退热和抑制促炎性细胞因子的分泌,调节机体免疫,从而减轻炎症反应的作用。     

蛋白指纹图谱技术在骨肉瘤临床诊断中的初步应用

目的 比较骨肉瘤患者和正常对照者血清蛋白表达谱的差异,筛选骨肉瘤相关血清蛋白标志物,并建立基于决策树的预测模型,为筛选和建立骨肉瘤临床诊断的血清学指标提供依据.方法 27例骨肉瘤患者血清(男17例,女10例)及47名相匹配者正常对照血清标本随机分为两组:60份(23例骨肉瘤,37名正常对照)为建模组,14份(4例骨肉瘤,10名正常对照)为盲法筛选组.利用表面增强激光解吸离子化-飞行时间-质谱(surface enhanced laser desorption/ionization time of fight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术进行蛋白质谱分析.采用蛋白质飞行质谱仪对结合在CM10芯片上的血清蛋白进行读取分析.通过Biomarker Wizard软件比较两组人群血清蛋白质谱的差异,经生物信息学分析得到决策树模型并进行盲法验证.结果 在质荷比(M/Z)1488.15～19842u范围内,共检测到96个有效蛋白峰,其中9个峰差异有统计学意义.利用三倍交叉证实方法对建模组的蛋白质谱数据进行1000次随机抽样,得到1000个决策树.根据交叉证实的正确率选出最佳的20个决策树模型作为最终预测模型.用其对14个盲法筛选样本进行归类预测的正确率为85.71%.结论 应用SELDI-TOF-MS技术可筛选出骨肉瘤相关血清蛋白标志;建立的决策树模型可以对骨肉瘤作出较为准确的预测判断.     

细胞色素P4502D6基因多态与肝癌易感性研究

本文应用 PCR- RFLP方法对 84例肝癌患者和 144例健康对照的引起 CYP2D6酶活性完全缺乏的 A型和 B型突变 , 以及 3种引起 CYP2D6酶活性降低的多态性 ( C188→ T、 C2938→ T和 G4268→ C)进行了检测 , 旨在探讨 CYP2D6基因的多态性与肝癌的关系 .     

毛蚶中甲肝病毒净化实验研究

[目的 ]　研究被甲肝病毒污染的毛蚶净化方法。　 [方法 ]　采用二氧化氯 (ClO2 )、臭氧 (O3)和紫外线等物理和化学联合方法 ,通过循环水系统 ,净化被人工染毒的毛蚶。　 [结果 ]　应用ClO2 、O3和紫外线不同组合方法净化 4d能有效灭活甲肝病毒浓度 (TCID50 )为 1 0 4 的人工染毒毛蚶中的甲肝病毒 (HAV)。　 [结论 ]　ClO2 、O3和紫外线联合净化方法具有灭活毛蚶体内HAV的作用 ,但其效果与净化时间和毛蚶体内HAV浓度密切相关。     

谷胱甘肽-S-转移酶M1和T1空白基因型与肝癌遗传易感性的研究

目的谷胱甘肽－Ｓ－转移酶Ｍ１和Ｔ１（ＧＳＴＭ１和ＧＳＴＴ１）空白基因型与肝癌遗传易感性的关系。方法应用多重ＰＣＲ技术检测６３例肝癌患者和８８例健康对照的ＧＳＴＭ１和ＧＳＴＴ１空白基因型。结果病例组ＧＳＴＭ１空白基因型的频率为５７．１％，对照组则为４２．０％，二者差异无显著性（χ２＝３．３５，Ｐ＝０．０６７），处于临界水平。ＯＲ值为１．８４（９５％ＣＩ＝０．９１～３．７３）。病例组ＧＳＴＴ１非空白基因型的频率为８７．３％，对照组则为６２．５％，二者差异有非常显著性（χ２＝１１．４２，Ｐ＝０．０００７２７４），ＯＲ值为４．１３（９５％ＣＩ＝１．６４～１０．７０）。叉生分析表明，ＧＳＴＴ１非空白基因型与肝癌的关联大于ＧＳＴＭ１空白基因型，两因素在肝癌发生中存在协同作用。结论具有ＧＳＴＭ１空白基因型和ＧＳＴＴ１非空白基因型的个体，患肝癌的危险性增加。     

药物代谢酶基因多态与肝癌关系研究

目的：探讨I相代谢酶CYP2E1、CYP2D6、CYP3A4和Ⅱ相代谢酶GSTMl、GSTTl、GSTP1、UGTlF基因多态在肝癌发生中的作用。方法：应用PCR技术对84例肝癌患者和144例健康对照的上述代谢酶基因进行分型。结果：单因素和多因素非条件1ogisic回归分析显示GSTMl空白基因型、GSTTl空白基因型、CYP2El c1／c1基因型和UGTlF 754位点G／G基因型均是肝癌的易感基因型。联合分析显示，随着拥有易感基因个数的增加，患肝癌的危险性增加。结论：CYP2El、GSTMl、GSTTl和UGTlF基因均可作为肝癌高危人群筛检的重要指标。     

细胞色素P450 2E1基因多态与肝癌遗传易感性研究

目的：探讨细胞色素Ｐ４５０ ２Ｅ１基因多态与肝癌的关系。方法：应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法对８４例肝癌患者和１４４例健康对照的细胞色素Ｐ４５０ ２Ｅ１基因ＲｓａⅠ多态进行检测。结果：病例组基因型Ａ频率为７１．４３％,等位基因ｃ１频率为８４．５２％,对照组则分别为５５．５６％和７５．３５％,两组差别均有统计学意义（Ｐ〈０．０５）。其比值比分别为２．００和１．７９,提示具有基因型Ａ或等位基因ｃ１的个体患肝