骨髓增生异常综合征发病机制探讨

目的：探讨骨髓增生异常综合征（MDS）的发病机制。方法：采用造血祖细胞体外培养技术,观察40例MDS患者骨髓细胞粒－巨噬细胞集落形成单位（GM－CFU）体外生长情况及患者血清、骨髓细胞对正常人造血祖细胞体外增殖作用的影响。结果：MDS中的难治性贫血（RA）74％为造血干细胞缺损（HSCD）;原始细胞增多的难治性贫血（RAEB）、转化中的原始细胞增多的难治性贫血（RAEB－T）、慢性粒单细胞白血病（CMML）100％为免疫介导型（IC）;环形铁粒幼红细胞增多的难治性贫血（RAS）仅2例,造血微环境缺陷（HMED）及IC型各1例。结论：RA、RAS与RAEB、RAEB－T、CMML患者可能是两种本质不同的群体,研究MDS的发病机制对克服治疗上的盲目性,提高疗效,判断预后具有重要意义。     

二甲双胍通过线粒体途径诱导人骨髓瘤细胞株U266细胞凋亡

目的:二甲双胍具有体外抑制肿瘤细胞生长的作用,但是对于多发性骨髓瘤细胞生长的影响和作用机制尚未可知。本研究探讨二甲双胍对人骨髓瘤细胞株U266的生长抑制作用及其可能的机制。方法:将不同浓度的二甲双胍作用于骨髓瘤细胞,采用MTT法检测细胞增殖抑制率、PI单染检测细胞周期。Western blot检测BCL-2蛋白家族蛋白表达水平的变化以及细胞色素C的释放。结果:二甲双胍可抑制U266细胞增殖,且抑制率呈时间和浓度依赖性变化;与对照组相比,二甲双胍作用48 h,细胞阻滞于G_1/G_0期;BCL-2、BCL-XL的蛋白表达水平降低、而BAX的蛋白表达水平明显升高;细胞色素C从线粒体释放到细胞质中的量增加,PARP的蛋白质剪切明显增强。结论:二甲双胍能够抑制U266细胞增殖及诱导细胞凋亡,线粒体凋亡途径可能是二甲双胍诱导细胞凋亡的机制之一。     

成人急性淋巴细胞白血病IL-7R基因突变及临床特征分析

目的:研究成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者IL-7R基因突变及临床特征。方法:选择2016年5月至2018年12月确诊的初治成人ALL患者164例,采用靶向特异的第二代测序技术检测包括IL-7R基因突变在内的16种Ph-like ALL突变,分析IL-7R基因突变ALL患者的临床特征及IL-7R基因的突变率,发生位点及突变类型。结果:164例成人ALL患者中,10例患者发生IL-7R突变,突变总频次为13次,突变率6. 1%,10例中男性5例(50%),女性5例(50%); B-ALL 6例(占60%),T-ALL 4例(占40%),均位于exon6。置换突变6例,缺失突变3例,插入突变4例。1例患者为IL-7R三突变,1例患者为IL-7R双突变。其中6种突变为新发现的类型,包括:c.720_724del、c. 723_726del、c. 721_722ins AGTG、c. 727_728ins TAACGGCCCCCTGCT、c. 727_728ins ATGCAGG GAGCGAA、c. 728_729ins AAGTGTCA基因突变位点,经治疗的9例IL-7R突变的ALL患者中有5例为复发难治型。结论:本研究发现了6种IL-7R的新突变基因位点并发现伴IL-7R基因突变的ALL临床治疗效果较差,需扩大样本量进一步研究该基因突变对预后的影响。     

端粒相关蛋白PinX1和磷酸化激酶Aurora A的相互作用

目的:鉴定端粒相关蛋白PinX1与有丝分裂期极光激酶(Aurora A)的相互作用及其功能,进一步研究PinX1调控参与细胞有丝分裂期的具体机制.方法:以pGBKT7-PinX1为诱饵对人HeLa细胞cDNA文库进行筛选,对筛选到的结果进行测序分析;构建Aurora A原核及真核表达质粒;采用免疫共沉淀及蛋白质体外沉降...     

急性髓系白血病细胞淋巴系分化抗原的表达

目的:探讨急性髓系白血病(AML)中淋巴系分化抗原(LyAg)的表达情况.方法:475例AML患者,FAB分型:AML-M0 31例,AML-M1 45例,AML-M2 218例,AML-M3 54例,AML-M4 18例,AML-M5 101例,AML-M6 4例,AML-M7 4例.采用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术免疫表型分析.结果:在475例AML患者中,38.95%表达LyAg,其中T细胞相关抗原CD7表达最常见(27.58%),其在AML各亚型的表达依次为AML-M0 61.29%、AML-M1 40.00%、AML-M2 34.86%、AML-M5 16.83%.B细胞相关抗原CD19表达于少数AML患者(7.37%),主要是AML-M1(11.11%)、AML-M2(10.55%)和AML-M0(9.68%)患者.结论:CD7和CD19是AML最常表达的LyAg,其与AML-M0、AML-M1、AML-M2有关,与AML-M3关系不明显.     

沙利度胺联合改良VAD方案治疗多发性骨髓瘤21例

2004年1月至2005年12月,作者采用改良VAD方案联合沙利度胺治疗多发性骨髓瘤(MM)21例,取得了较好疗效,报道如下.     

四硫化四砷对NB4细胞增殖的抑制作用

目的探讨四硫化四砷(As4S4)在体外对NB4细胞增殖的抑制作用。方法As4S4(处理)NB4细胞后,应用台盼蓝排斥实验测定细胞活力,用MTT实验测定细胞增殖抑制率,并观察As4S4对NB4细胞集落形成能力的影响。结果NB4细胞在As4S4存在下进行培养,其细胞活力受到显著抑制,应用MTT实验检测到的As4S4对NB4细胞增殖抑制作用呈剂量依赖性,半数抑制浓度为2.86μmol/L。同时As4S4以剂量依赖的方式抑制NB4细胞的集落形成能力。结论As4S4在体外具有降低NB4细胞活力、抑制NB4细胞增殖及其克隆形成能力的作用。     

吉西他滨对白血病细胞系HL-60细胞的抑制作用

目的观察吉西他滨对HL-60细胞增殖、凋亡及C-myc蛋白表达的影响,探讨吉西他滨对白血病细胞的作用及其与c-myc间的关系,为其作为新的抗白血病药物提供实验依据。方法体外培养HL-60细胞,吉西他滨及阿糖胞苷处理细胞0、24、48、72 h后倒置显微镜下观察细胞生长状态及形态学改变;锥虫蓝拒染法计数活细胞,计算细胞存活率,观察吉西他滨对细胞生长的影响;应用流式细胞仪进行细胞周期分析、检测凋亡率;免疫组织化学染色法检测C-myc蛋白表达改变。结果24 h时不同质量浓度吉西他滨组均显著抑制细胞存活,随药物质量浓度增加存活率减小,各组间比较有显著性差异（P〈0.01）;各组随作用时间延长存活率降低,在48、72 h抑制作用显著强于24 h;G0/G1期细胞比例升高而S期细胞比例降低,细胞阻滞在G0/G1期;凋亡率为（17.4 f1±4.88）%,较空白组（4.29±3.07）%和阿糖胞苷对照组（8.16±3.43）%显著升高（Pa〈0.01）;免疫组织化学染色示吉西他滨组C-myc蛋白在细胞中表达阳性平均积分为42.00±8.54,较空白组（248.33±20.74）和阿糖胞苷组（102.67±12.06）显著降低（Pa〈0.01）。结论吉西他滨对HL-60细胞生长及C-myc蛋白表达有明显抑制作用;能使细胞周期发生重新分布,将细胞阻滞在G0/G1期,从而抑制细胞增殖,并可诱导白血病细胞凋亡;在抑制HL-60细胞增殖、诱导其凋亡及抑制C-myc表达方面,吉西他滨的作用显著强于相同剂量的阿糖胞苷,有望成为新药物用于白血病的治疗。     

化疗药物对TRAIL在急性白血病原代细胞表达的影响

为了探讨TRAIL在急性白血病原代细胞表达及化疗药物对TRAIL在急性白血病细胞表达的影响,采集16例初诊的急性白血病患者化疗前、化疗1天后、3天后和5天后的外周血,分离单个核细胞并用流式细胞术检测TRAIL的表达;同时采集12例初诊的急性白血病患者化疗前骨髓,分离单个核细胞进行培养,分别加VP-16和/或干扰素,培养一定时间后检测TRAIL的表达水平.结果表明：与化疗前相比,初治急性白血病患者外周血单个核细胞TRAIL的表达水平在化疗1天后即明显提高（P＜0.05）;在体外培养实验中,VP-16上调TRAIL在急性白血病骨髓单个核细胞的表达（P＜0.05）,VP-16联合干扰素与单独应用VP-16相比,TRAIL的表达水平无差异（P＞0.05）.结论：化疗药物治疗白血病的机制之一可能是通过诱导TRAIL的表达而促进白血病细胞的凋亡.