高效液相色谱法对癫痫患者血清苯妥英钠浓度的测定

目的 建立用高效液相色谱法测定血清苯妥英钠浓度的方法。方法 血清经乙醇抽提后，以甲醇为流动相，经色谱分离，在２４０ｎｍ处检测，用标准曲线法进行定量分析。结果 苯妥英钠浓度在０．１￣２．０ｇ／Ｌ范围内与峰面积之间具有较好的线性关系，回归方程为Ｙ＝０．０１３２＋１．０７３６Ｘ，相关系数（ｒ）为０．９９８，相对标准偏差（ＲＳＤ）为０．０８５％，平均回收率为９９．５３％。结论此方法血清苯妥英钠浓度特异性强     

四肢高能量暴力性骨折的院前急救及治疗方案的选择

目的探讨高能量创伤所致的四肢暴力性骨折的院前急救及院内治疗、手术时机及内固定的选择。方法对156例高能量暴力骨折实施院前急救和院内骨折的治疗处理,初期治疗多数采取石膏固定、骨牵引及外支架固定等临时固定,待患者全身情况和局部组织改善后,适时选择手术（7～33天,平均10天）,根据不同骨折类型选择内固定治疗（包括微创内固定）。结果 156例患者经过院前积极救治处理后,其中有6例患者因合并伤死亡,死亡率为3．85％,救治成功率96．15％;150例患者获得随访,优良率92％,术后并发症的发生率30％。结论采取有效、及时、规范、合理的院前急救措施,能为伤者赢得宝贵的时间,有效降低伤者死亡率及并发症;院内合理分期治疗,能有效提高伤者的治愈率,最大限度恢复患肢功能,降低肢体致残率及并发症的发生率。     

人巨细胞病毒IE1蛋白促进巨噬细胞分泌IL-1β、TNF-α及凋亡

为了研究HCMV IE1-GFP融合蛋白瞬时高表达对巨噬细胞分泌活性及其凋亡的影响,将真核表达载体pEGFP/IE1转染至巨噬细胞(Mφ),转染48h后,用荧光显微镜观察GFP-IE1融合蛋白或GFP的表达与定位。ELISA法检测细胞培养上清中IL-1β或TNF-α的含量以及用RT-PCR检测其mRNA的表达情况,并收集Mφ经PI染色后流式细胞术(FCM)检测其凋亡率。结果发现,GFP-IE1融合蛋白在Mφ内瞬时表达且定位于细胞核,GFP定位于整个细胞中。GFP-IE1融合蛋白在Mφ内瞬时高表达使Mφ分泌IL-1β和TNF-α量及其mRNA表达量均增加且Mφ凋亡率明显上升,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),而GFP表达对Mφ分泌及其凋亡无影响(P>0.05)。HCMV IE1瞬时高表达可上调Mφ分泌细胞因子IL-1β和TNF-α并促进Mφ凋亡。     

基于梅毒核酸疫苗pcD/Tp92的不同接种策略

目的 评估基于梅毒核酸疫苗pcD/Tp92的各接种优化策略对新西兰兔梅毒螺旋体(Tp)皮肤感染的免疫保护效应.方法 核酸疫苗pcD/Tp92采用2次肌内注射免疫或肌内注射初免鼻饲加强的免疫方式结合黏膜佐剂CpG ODN及Tp92重组蛋白,分别或联合免疫新西兰兔.酶联免疫吸附法(ELISA)检测各接种策略组免疫期间(0~8周)兔特异性抗体产生及变化水平,免疫8周后兔鼻咽部、阴道黏膜SIgA产生水平及兔脾细胞IL-2、γ干扰素(IFN-γ)诱导水平,噻唑蓝法(MTT)检测兔脾淋巴细胞增殖水平.记录各组在初次免疫后第10周兔皮下接种Tp标准株感染后接种部位感染早期皮损的变化.结果 采用pcD/Tp92核酸疫苗肌内注射初免,CpG-ODN联合Tp92重组蛋白抗原鼻饲新西兰兔加强免疫的接种策略组(C2组)分别与pcD/Tp92疫苗肌注组(A2组),pcD/Tp92疫苗肌注初免,pcD/Tp92鼻饲加强免疫组(B1组)或结合黏膜佐剂CpG ODN联合免疫的接种策略组(B2组)相比,既能促进pcD/Tp92核酸疫苗在兔体内免疫期间(8周)诱生更高特异性抗体水平(C2组:1.825±0.175;A2组:1.372±0.322;B1组:0.893±0.297;B2组:1.294±0.124;P<0.05),IL-2(C2组:154.7±14.6;A2组:112.3±13.4;B1组:76.6±21.5;B2组:97.3±18.7;P<0.05)及IFN-γ(C2组:277.4±24.4;A2组:232.8±25.3;B1组:165.7±22.6;B2组:211.3±24.6;P<0.05)分泌水平,以及更高的T细胞增殖分化水平(SI C2组:3.57±0.24;A2组:3.08±0.22;B1组:2.12±0.14;B2组:2.88±0.18;P<0.05),还能刺激更高的黏膜特异性SIgA抗体,导致最低Tp感染部位皮损Tp阳性率(6.67%)及溃疡病灶形成率(6.67%)从而达到有效的保护作用.结论 pcD/Tp92核酸疫苗肌内注射初免,CpG ODN联合Tp92重组蛋白鼻饲加强免疫的接种策略能在新西兰兔体内诱导最强的黏膜免疫和免疫保护效应.     

Asor—PL—硫代磷酸反义apo（a）RNA连结物制备

唾液酸糖蛋白ｏｒｏｓｏｍｕｃｏｉｄ经脱唾液酸酶脱去唾液酸，得脱唾液酸糖蛋白，用水溶性碳二亚胺把多聚赖氨酸与Ａｓｏｒ及ＰＬ与反义ａｐｏ（ａ）ＲＮＡ连接起来，再通过亲和层析和分子筛高铲液相色谱层析的方法分离纯化制备，最后用反相高效液相色谱脱盐，冷冻真空干燥，－２０℃保存备用。     

微量内毒素促平滑肌细胞增殖作用的实验观察

本文观察了微量内毒素对动脉壁平滑肌细胞的促增殖作用及硝苯吡啶对这一作用的影响。结果发现：在一定范围内，内毒素具浓度依赖性促平滑肌细胞增殖作用，且以培养液中浓度为１０－７ｇ／ｍｌ作用最强。硝苯吡啶可显著抑制内毒素的这一作用。提示（１）内毒素通过促进平滑肌细胞的增殖而与动脉粥样硬化的形成密切相关；（２）内毒素的促平滑肌细胞增殖作用与细胞内外Ｃａ２＋的跨膜运转有关。     

16SrDNA技术在鼻咽癌患者和正常人咽部细菌组成中的比较研究

目的比较分析鼻咽癌患者和正常人咽部标本中的细菌种类和比例,探讨细菌感染和鼻咽癌的关系。方法选择11例初次确诊的鼻咽癌患者以及11例与鼻咽癌患者年龄和性别匹配的健康对照者,两组1年内均未使用抗生素、化疗等药物。提取咽拭子中的细菌总DNA,针对16SrDNA保守区设计通用引物进行PCR扩增,PCR产物克隆到T载体,在转化的白色克隆中随机挑选100个左右进行测序。将获得的16SrDNA序列与网上已公布的16SrDNA序列进行Blast比对,分析克隆群中细菌的种类和比例。结果11例鼻咽癌患者中9例结核分枝杆菌和奈瑟菌占优势菌群;另2例排第四和第五位,而在11例健康对照者中未发现结核分枝杆菌和奈瑟菌。鼻咽癌患者与健康对照者的菌群分布明显不同。结论用16SrDNA技术发现鼻咽癌患者与正常人咽部细菌组成存在较大的差异,结核分枝杆菌和奈瑟菌感染可能与鼻咽癌相关。     

hDaxx融合蛋白高表达降低活化巨噬细胞分泌IL-1β

目的　研究GFP -hDaxx融合蛋白 (GFP -hDaxx)即时高表达对激活巨噬细胞分泌IL - 1 β的影响。方法　将GFP -hDaxx真核细胞表达载体pEGFP/hDaxx转染巨噬细胞 ,利用Westernblotting检测表达产物。通过hDaxx在巨噬细胞内的即时高表达 ,测定LPS刺激巨噬细胞后 0 .5h、4h、1 2h时 ,活化巨噬细胞分泌细胞因子IL - 1 β的含量。结果　pEGFP/hDaxx在巨噬细胞内成功表达GFP -hDaxx融合蛋白。GFP -hDaxx在巨噬细胞内的高表达 ,使LPS诱导活化的巨噬细胞分泌IL - 1 β量明显降低 (在4h及 1 2h时与对照组差异有显著性 ,P <0 .0 0 1 )。结论　hDaxx即时高表达降低活化的巨噬细胞分泌IL - 1 β。     

锁定钢板与加压钢板治疗肱骨骨折合并桡神经损伤的疗效比较

目的：探讨锁定钢板与加压钢板治疗肱骨骨折合并桡神经损伤的临床疗效。方法选取2006年4月～2013年4月修文县人民医院骨科收治的肱骨骨折合并桡神经损伤患者60例,随机均分为给予锁定钢板内固定治疗的观察组和加压钢板内固定治疗的对照组（n=30）,观察手术相关指标和术后恢复情况。结果观察组患者术中出血量、术后NRS疼痛评分低于对照组,constant肩关节功能评分、QOL-30生活质量评分高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论锁定钢板治疗有助于减小手术创伤、促进术后恢复,在肱骨骨折合并桡神经损伤的治疗中具有积极的临床价值,值得临床推广应用。     

人巨细胞病毒IE1核酸疫苗的免疫效果研究

[目的]用人巨细胞病毒(HCMV)IE1核酸疫苗pcDNA3.1(-)-IE1免疫BALB/c小鼠,初步研究其产生的体液免疫和细胞免疫应答水平。[方法]将pcDNA3.1(-)-IE1通过肌肉注射免疫BALB/c小鼠,通过PCR测定和免疫组化检测其在肌细胞中的表达,细胞因子测定、淋巴细胞转化实验检测免疫效果。[结果]PCR检测到与IE1大小一致的片段,免疫组化结果显示IE1基因在小鼠肌细胞中表达IE1目的蛋白。小鼠脾淋巴细胞经PHA刺激后,实验组IL-4、IL-2、IFN-γ含量以及淋巴细胞转化率显著增高,与对照组比较差异有统计学意义(P﹤0.05)。[结论]pcDNA3.1(-)-IE1核酸疫苗能在BALB/c小鼠肌细胞中稳定存在并能表达HCMV IE1蛋白,pcDNA3.1(-)-IE1核酸疫苗可诱导BALB/c小鼠脾细胞分泌IL-4、IL-2、IFN-r并刺激BALB/c小鼠脾细胞增殖。